馬錢子散的配伍減毒增效實驗研究

梁玉紅

（黑龍江省嫩江縣人民醫(yī)院，黑龍江 黑河 161400）

記載于《中華人民共和國藥典》的馬錢子散是由地龍與馬錢子配伍而成的，具有疏通經(jīng)絡(luò)、祛除風(fēng)濕的功效，對于因風(fēng)寒、濕邪侵入而導(dǎo)致的腰痛、肢體痛、肢體萎縮以及周身痛等癥狀有著非常顯著的治療效果[1]。但是，馬錢子在具有顯著療效的同時也具有比較劇烈的毒性，甚至其中毒劑量與治療劑量非常相近，為了確保馬錢子散在取得顯著療效的同時也具有可靠的安全性，需要對馬錢子散進行減毒增效處理[2]。本文試通過實驗來研究如何為馬錢子散減毒增效。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 藥物

準(zhǔn)備好干燥的生藥馬錢子種子，按照藥典法使用1.6%含士的寧進行炮制。準(zhǔn)備好通過生藥鑒定的地龍干燥體，按照藥典法進行炮制。準(zhǔn)備好由地龍和馬錢子配伍而成的混合劑——馬錢子散，基于藥典中馬錢子散項下的相關(guān)方法進行配置。實驗前，將上述藥品放入0.5%的羧甲基纖維素鈉溶液中，制成混懸液，以備試驗中使用。

1.1.2 試劑和儀器

選擇產(chǎn)自牡丹江市的小鼠自主活動測定設(shè)備，型號為ZYC-1；同時，準(zhǔn)備好冰醋酸、二甲苯以及羧甲基纖維素鈉等試劑，純度均為“分析純”。

1.1.3 動物

選擇昆明種小白鼠20只，體重在18 g～22 g之間，其中雌性小白鼠有10只，雄性小白鼠有10只，全部提供自筆者單位所在地的中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心。

1.2 方法

1.2.1 馬錢子毒性試驗

通過數(shù)次預(yù)試驗可知馬錢子的100%死亡率致死量為0.30 g/kg、0%死亡率致死量為0.13 g/kg，將20只小白鼠基于性別與體重分為2組，實驗前12小時為其禁食但不禁水，使用0.5%的羧甲基纖維素鈉對馬錢子藥粉進行稀釋，按照0.2 mL混懸劑/10 g體重的比例為小鼠灌胃，給藥后觀察一周，記錄小鼠的死亡狀況與毒性反應(yīng)。

1.2.2 馬錢子散毒性試驗

通過數(shù)次預(yù)試驗可知馬錢子散的100%死亡率致死量為0.32 g/kg、0%死亡率致死量為0.14 g/kg，將20只小白鼠基于性別與體重分為2組，實驗前12小時為其禁食但不禁水，使用0.5%的羧甲基纖維素鈉對馬錢子散藥粉進行稀釋，按照0.2 mL混懸劑/10 g體重的比例為小鼠灌胃，給藥后觀察一周，記錄小鼠的死亡狀況與毒性反應(yīng)。

1.2.3 小鼠自主活動及鎮(zhèn)痛效果實驗

向小鼠胃中灌入蒸餾水，標(biāo)準(zhǔn)為0.2 mL/10 g觀察7日后，記錄小鼠在第3～7日的自主活動次數(shù)。在灌胃0.13 g/kg馬錢子與馬錢子散后為其注射冰醋酸促炎，觀察其15分鐘內(nèi)的扭體次數(shù)，以衡量其鎮(zhèn)痛效果。

2 結(jié) 果

2.1 馬錢子毒性試驗結(jié)果

高劑量組小鼠在灌胃5秒后便出現(xiàn)明顯的中毒癥狀，如：呼吸頻率加快、情緒煩躁、身體抽搐痙攣，最終停止呼吸，死亡。死亡時雙下肢伸直，雙上肢呈屈曲性強直狀態(tài)，尾僵直。死亡時間最早在灌胃后1分鐘，最長在5分鐘左右。低劑量組小鼠未見死亡，在隨后的7日內(nèi)體重增加，毛色良好。

表1 馬錢子毒性試驗結(jié)果

2.2 馬錢子散毒性試驗結(jié)果

高劑量組小鼠在灌胃10秒后便出現(xiàn)明顯的中毒癥狀，如：呼吸頻率加快、情緒煩躁、身體抽搐痙攣，最終停止呼吸，死亡。死亡時雙下肢伸直，雙上肢呈屈曲性強直狀態(tài)，尾僵直。死亡時間最早在灌胃后5分鐘，最長在10分鐘左右。低劑量組小鼠未見死亡，在隨后的7日內(nèi)體重增加，毛色良好。

表2 馬錢子散毒性試驗結(jié)果

2.3 自主活動次數(shù)和鎮(zhèn)痛效果

使用馬錢子散的小鼠其自主活動次數(shù)多于使用馬錢子的小鼠，并且其扭體次數(shù)少于馬錢子小鼠，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

表3 自主活動次數(shù)和鎮(zhèn)痛效果（次，±s）n=20

表3 自主活動次數(shù)和鎮(zhèn)痛效果（次，±s）n=20

藥物 扭體次數(shù) 第3日 第4日 第5日 第6日 第7日馬錢子 39±19 109±34 141±49 182±47 274±81 290±71馬錢子散 24±16 91±15 112±27 110±36 148±43 206±37 t 2.701 2.166 2.318 5.439 6.145 4.692 P 0.010 0.037 0.026 0.000 0.000 0.000

3 討 論

本研究對馬錢子散配伍進行了增效減毒試驗，從馬錢子毒性試驗和馬錢子散毒性試驗可以發(fā)現(xiàn)，為小鼠使用100%死亡率致死量的馬錢子與馬錢子散，使用馬錢子散配伍的小鼠其死亡率僅10%，而單用馬錢子的小鼠死亡率卻高達100%，可見馬錢子配伍后毒性顯著降低。而從小鼠自主活動次數(shù)的檢測結(jié)果的對比可以發(fā)現(xiàn)，馬錢子具有更強的中樞神經(jīng)興奮作用，其毒性高于馬錢子散，同樣可以證明馬錢子散配伍的減毒作用[3]。此外，通過兩組差異明顯的扭體次數(shù)可以發(fā)現(xiàn)，馬錢子散可以更有效地減少小鼠臀部高起或軀干后肢伸張等行為的出現(xiàn)，發(fā)揮出更強的鎮(zhèn)痛效果，即馬錢子散配伍具有鮮明的增效作用。綜上所述，馬錢子散配伍具有增效減毒效果。

4 結(jié) 語

本研究結(jié)果證明馬錢子散配伍可增效減毒，其具體機制有待進一步研究。

[1] 高 穎,優(yōu)化馬錢子總生物堿的制備及藥效學(xué)研究[D].南京:南京中醫(yī)藥大學(xué),2010:72.

[2] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:2010年版一部[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:46.

[3] 王 絢,陳 軍,蔡寶昌.馬錢子體內(nèi)分析研究進展[J].中國實驗方劑學(xué)雜志,2011,17(13):258-262.