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    苜蓿鮮草中提取葉蛋白最佳工藝研究

    2016-01-08 08:34:34黃新育,許英一,李紅
    現(xiàn)代畜牧科技 2015年4期
    關(guān)鍵詞:提取工藝苜蓿

    苜蓿鮮草中提取葉蛋白最佳工藝研究

    黃新育1,許英一2,李紅1,柴華1,楊偉光1,楊曌1,高海娟1,徐婷婷1

    (1.黑龍江省畜牧研究所161005;2. 齊齊哈爾大學(xué)食品與生物工程學(xué)院161006)

    摘要:該研究以北方寒冷地區(qū)龍牧801苜蓿鮮草為原料,用酸化加熱法提取苜蓿葉蛋白。研究提取溫度、提取液pH值、提取時(shí)間三因素對(duì)苜蓿葉蛋白提取率的影響。在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上,采用三因素三水平正交試驗(yàn)確定酸熱法提取苜蓿葉蛋白的最佳工藝條件為:提取溫度為60℃、pH值為4.0、提取時(shí)間為12 min,在此工藝條件下,粗蛋白提取率為45.32%。

    關(guān)鍵詞:苜蓿;葉蛋白;提取工藝

    紫花苜蓿為豆科苜蓿屬多年生草本植物[1]。苜蓿葉產(chǎn)量高,葉的蛋白質(zhì)含量高,是葉蛋白生產(chǎn)中常用的原料[2-3]。苜蓿葉蛋白被認(rèn)為是一種高質(zhì)量的食品[4],同時(shí)可用于飼料[5]和醫(yī)藥[3]等方面,而且苜蓿葉蛋白的應(yīng)用領(lǐng)域正在不斷拓寬[6-9]。葉蛋白的生產(chǎn)通常包括汁液提取、蛋白絮凝與分離和干燥這三個(gè)主要步驟[10], 每個(gè)步驟對(duì)葉蛋白的提取率和產(chǎn)品質(zhì)量影響都很大, 其中葉蛋白的絮凝最為關(guān)鍵[11]。葉蛋白的絮凝方法有加熱法、酸堿度法、發(fā)酵法、溶劑浸提法等[12-13]。本試驗(yàn)主要是以優(yōu)質(zhì)新鮮的苜蓿葉為原料,研究酸與溫度綜合處理對(duì)葉蛋白提取率的影響,以尋求最佳的提取途徑。

    1材料與方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑

    龍牧801苜?,F(xiàn)蕾期[14-15]鮮草取自黑龍江省畜牧研究所試驗(yàn)田;氯化鈉、鹽酸、氫氧化鈉、硫酸銅、硫酸鉀、濃硫酸、硼酸均為分析純,天津市科密歐化學(xué)試劑開(kāi)發(fā)中心。

    1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

    DS-1 高速組織搗碎機(jī):上海標(biāo)本模型廠;80-1臺(tái)式低速離心機(jī):江蘇省金壇市醫(yī)療儀器廠;PHS-25(數(shù)顯)pH計(jì):上海精密科學(xué)儀器有限公司;FD-1真空冷凍干燥機(jī):上海豫康科教儀器設(shè)備有限公司;SHZ-B 水浴恒溫振蕩器:上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠;GZX-DH.400BS 電熱恒溫干燥箱:上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠。

    1.3 測(cè)定方法

    1.3.1測(cè)定

    蛋白質(zhì)含量的測(cè)定采用微量凱氏定氮法[16]。

    1.3.2苜蓿葉蛋白提取率的計(jì)算

    酸熱法[17]提取苜蓿葉蛋白采用半微量凱氏定氮法測(cè)其中的蛋白質(zhì)含量。葉蛋白提取率按如下公式計(jì)算:

    1.4 實(shí)驗(yàn)方法

    1.4.1酸熱法提取苜蓿葉蛋白的工藝

    將苜蓿鮮葉剪切成長(zhǎng)度約為1cm的小段[18],采用鮮葉與2%的食鹽溶液重量比為1∶2進(jìn)行打漿2min。過(guò)濾后取濾液,對(duì)汁液調(diào)不同的pH值,置于水浴振蕩器中加熱絮凝,以5000r/min離心20min,得到葉蛋白。將葉蛋白置于真空冷凍干燥機(jī)烘干,即得到葉蛋白粉。測(cè)定提取率。

    1.4.2酸熱法提取苜蓿葉蛋白工藝的優(yōu)化研究

    本實(shí)驗(yàn)著重考察提取液pH值、提取溫度、提取時(shí)間三因素對(duì)紫花苜蓿葉蛋白提取率的影響。在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,設(shè)計(jì)三因素三水平的正交試驗(yàn)[19]對(duì)酸熱法提取紫花苜蓿葉蛋白的工藝進(jìn)行優(yōu)化研究。

    2結(jié)果與分析

    由表1極差分析結(jié)果可得出,按照極差R的大小,影響粗蛋白提取率的主次因素的順序?yàn)锽(提取溫度)>C(提取時(shí)間)>A(pH值),通過(guò)正交試驗(yàn)確定最佳組合為A2B3C3,即pH值為4.0,提取溫度為60℃,提取時(shí)間為12 min。由方差分析表2可知,提取溫度對(duì)粗蛋白提取率顯著影響(P<0.05),提取時(shí)間和pH值對(duì)粗蛋白提取率影響較小,這與極差分析的結(jié)果一致。由粗蛋白提取率大小還可以看出,正交表中直觀表現(xiàn)最佳組合為A1B3C3,與正交結(jié)果不符,進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)后得出,組合A2B3C3的粗蛋白提取率為45.32%,大于A1B3C3的粗蛋白提取率,說(shuō)明通過(guò)正交試驗(yàn)?zāi)軌虍a(chǎn)生最佳的試驗(yàn)組合。

    表1 正交試驗(yàn)結(jié)果與極差分析

    表2 正交試驗(yàn)方差分析

    注:*表示差異顯著(P<0.05)

    3結(jié)論

    本實(shí)驗(yàn)酸熱法提取苜蓿葉蛋白。利用蛋白質(zhì)在酸作用下能變性沉淀的特性,將pH值調(diào)節(jié)至一定的酸性條件,以產(chǎn)生較好的絮凝效果,以提取苜蓿葉蛋白。本研究利用正交實(shí)驗(yàn)確定了酸熱法提取苜蓿葉蛋白的最佳工藝條件為:提取溫度為60℃、pH值為4.0、提取時(shí)間為12 min,在此工藝條件下,粗蛋白提取率為45.32%。

    參考文獻(xiàn)

    [1] 李富娟.南方地區(qū)不同苜蓿(Medicago sativa L.)品種粗蛋白含量的變異及其遺傳力的研究[D].重慶:西南大學(xué),2006.

    [2] 韓春梅,張新全,楊春華,等.苜蓿葉蛋白的開(kāi)發(fā)利用現(xiàn)狀[J].草業(yè)科學(xué),2005,22(9):23-27.

    [3] 朱偉然.苜蓿葉蛋白的主要作用及生產(chǎn)工藝[J].河南畜牧獸醫(yī),2006,27(9):38-39.

    [4] SRIVASIAVA R R. Effects of growth stage on the extractability and composition of leaf protein concentrate of some weeds [J].Indian Journal of Agricultural Research,1988,22(2):92-96.

    [5] 田麗萍,劉廣青.苜蓿利用及深加工技術(shù)研究進(jìn)展[J].草食家畜,2004,6(2):39-41.

    [6] BARANIAK B,KARAS M. Antioxidative properties of chloroplast concentrates obtained by various methods from Lucerne juice[J].Journal of Animal and Feed Sciences,2000,9(2):397-405.

    [7] 晨曦.葉蛋白的生產(chǎn)和利用[J].資源節(jié)約和綜合利用,1996,01:46-49.

    [8] 邱業(yè)先,羅澤民.植物葉蛋白的研究及其工業(yè)化生產(chǎn)[J].世界農(nóng)業(yè),1998,12:20-22.

    [9] 楊春波,謝正軍,金征宇.從壓塊苜蓿草中提取蛋白質(zhì)的工藝研究[J].食品與機(jī)械,2006, 22(6): 23-25.

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    [11] 吳萬(wàn)靈,韓魯佳,王唯涌.苜蓿葉蛋白提取工藝參數(shù)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2006,11(5):65-69.

    [12] 薛林,劉青廣,唐慧,等.苜蓿葉蛋白提取工藝的優(yōu)化研究[J].石河子大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2005 (23) :152-154.

    [13] 成明華,關(guān)東勝,吳衛(wèi)華.苜蓿葉蛋白粉葉綠素的提取工藝[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),1998,04:93-97.

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    [16] 張水華.食品分析[M].北京:中國(guó)輕工業(yè)出版社,2007:159-160.

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