復(fù)方茶湯降血脂功效研究

譚蓉， 張聰， 楊秀芳*， 孔俊豪

（1.中華全國(guó)供銷合作總社杭州茶葉研究院，浙江杭州 310016；2.浙江省茶資源跨界應(yīng)用技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，浙江杭州 310016）

由于飲食結(jié)構(gòu)不均衡等原因，我國(guó)高血脂癥（Hyperlipidemia）的發(fā)病率逐年升高，同時(shí)伴隨著動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病等多種并發(fā)癥，對(duì)公眾健康造成嚴(yán)重威脅。黑茶屬后發(fā)酵茶，是六大茶類之一，對(duì)高血脂癥等諸多心血管疾病有著其他茶類所不具有的藥理作用[1-3]。六堡茶是著名黑茶品種，原產(chǎn)于廣西，歷史悠久，因其獨(dú)特口味及降脂保健功效而深受市場(chǎng)歡迎[4-10]。

茶黃素 （Theaflavins， TFs）和兒茶素（Catechins，Cs）亦能夠調(diào)節(jié)血脂[11-12]。絞股藍(lán)[Gynostemma Pentaphgllum （Thunb）Makino]則是治療高血脂癥的名貴中草藥，主要成分為絞股藍(lán)皂苷（Gypenosides， GPs）[13-14]。本研究以茶黃素、兒茶素、絞股藍(lán)皂苷和六堡茶提取物為原料自擬復(fù)方茶湯[15]，對(duì)高脂血癥大鼠模型進(jìn)行干預(yù)，檢測(cè)分析大鼠各生化指標(biāo)水平，以期為開發(fā)降血脂功能性食品提供技術(shù)參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

茶黃素（純度≥20%）：浙江派諾生物技術(shù)有限公司；兒茶素（純度≥30%）：浙江東方茶業(yè)科技有限公司；絞股藍(lán)皂苷（純度≥35%）：自制；六堡茶水提物：中華全國(guó)供銷合作總社杭州茶葉研究院六堡茶研究中心。總膽固醇（TC）試劑盒、甘油三酯（TG）試劑盒、高密度脂蛋白（HDL-C）試劑盒、低密度脂蛋白（LDL-C）試劑盒、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）試劑盒、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）試劑盒：寧波美康生物科技有限公司。高脂飼料：購(gòu)自浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

清潔級(jí)雄性SD 大鼠60 只，體重200±20 g，購(gòu)自浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心 （動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào)：0008677，許可證號(hào)：SCXK （浙）2008-0033）。于室溫23±2℃、相對(duì)濕度50%～70%環(huán)境中飼養(yǎng)，自由飲食飲水。

1.2 試驗(yàn)儀器

ACCUTE TBA-40FR 全自動(dòng)生化分析儀：東芝三廠醫(yī)療株式會(huì)社；FASCO-3010D 全自動(dòng)血流變儀、EHK 血沉壓積儀：重慶維多科技有限公司；DDL-5 低速冷凍多管離心機(jī)：上海安亭科學(xué)儀器廠。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 分組與給藥

將大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d后，稱重，禁食12 h后眼眶靜脈叢采血，測(cè)定血清中TC 含量，根據(jù)TC水平隨機(jī)分為6組，每組10 只，即正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽性對(duì)照組（依折麥布1.0 mg/kg）、復(fù)方茶湯低劑量組（18.38 mg/kg）、復(fù)方茶湯中劑量組（36.75 mg/kg）、復(fù)方茶湯高劑量組（55.13 mg/kg）。所有大鼠均給予高脂高糖飼料，自由采食飲水。自造模第l天起，除正常對(duì)照組和模型對(duì)照組灌服蒸餾水外，其余各給藥組分別灌胃給予相應(yīng)劑量的藥物，每日1次，灌胃容積為1 mL/100 g 體重，連續(xù)6周。給藥6周后大鼠禁食12 h，眼眶靜脈叢取血，一份加入肝素制備抗凝血，另一份離心取血清。

1.3.2 指標(biāo)檢測(cè)

體重測(cè)定：試驗(yàn)期間每3 d 稱重一次，并根據(jù)體重調(diào)整給藥量。

血液生化學(xué)指標(biāo)檢測(cè)：給藥6周后，全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)大鼠血清血脂生化指標(biāo)（TC、TG、LDL-C、HDL-C），肝功能生化指標(biāo)（AST、ALT）。

血液流變學(xué)指標(biāo)：給藥6周后，肝素抗凝管接取4 mL 全血，立即輕搖試管，防止血液凝固。采血后立即測(cè)定血流變各項(xiàng)指標(biāo)，采用FASCO-3010D 全自動(dòng)血流變儀檢測(cè)6個(gè)不同切變率（200 s-1，150 s-1，50 s-1，30 s-1，3 s-1，1 s-1）下的全血粘度（ηb），血漿粘度（ηp）；采用 EHK 血沉壓積儀測(cè)紅細(xì)胞壓積（HCT）、血沉；計(jì)算求各切變率（200 s-1，150 s-1， 50 s-1）下的全血還原粘度（BRV），卡松粘度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)（AI）、紅細(xì)胞變形指數(shù)（TK）、紅細(xì)胞剛性指數(shù)（RI）、紅細(xì)胞電泳時(shí)間（EI）數(shù)值等。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 18.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行ANOVA 單因素方差分析，計(jì)量資料數(shù)據(jù)以±S表示

2 結(jié)果與分析

2.1 復(fù)方茶湯對(duì)高血脂癥大鼠體重的影響

與正常對(duì)照組相比，在造模39 d后，模型對(duì)照組大鼠體重顯著增加。與模型對(duì)照組相比，給藥42 d 后低劑量（18.38 mg/kg）組、中劑量（36.75 mg/kg）組大鼠體重顯著降低；給藥39 d后高劑量（55.13 mg/kg）組大鼠體重顯著降低；說明復(fù)方茶湯能夠抑制高血脂癥大鼠體重上升，攝入高劑量的復(fù)方茶湯甚至能使高血脂癥大鼠體重低于正常水平，見圖1。

2.2 復(fù)方茶湯對(duì)高血脂癥大鼠血脂的影響

與正常對(duì)照組相比，在高脂造模6周后，模型對(duì)照組大鼠血清TC、LDL-C 含量顯著升高 （P＜0.01）。與模型對(duì)照組相比，復(fù)方茶湯低劑量（18.38 mg/kg）組、中劑量（36.75 mg/kg）組大鼠血清TC 含量顯著降低（P＜0.01）；試驗(yàn)茶湯的三個(gè)劑量組大鼠血清 TG、LDL-C 含量顯著降低 （P＜0.05），HDL-C 含量升高（P＜0.01）；說明復(fù)方茶湯能有效緩解大鼠高血脂癥狀，使其血脂指標(biāo)恢復(fù)正常水平，見表1。

圖1 復(fù)方茶湯對(duì)高血脂癥大鼠體重的影響Fig.1 Effect of compound tea beverage on body weight of hyperlipidemic rats

表1 復(fù)方茶湯對(duì)高血脂癥大鼠血脂指標(biāo)的影響（單位：mmol/L）Table 1 Effects of compound tea beverage on serum lipid level of hyperlipidemic rat(Unit:mmol/L）

2.3 復(fù)方茶湯對(duì)高血脂癥大鼠肝功能指標(biāo)的影響

與正常對(duì)照組相比，模型對(duì)照組大鼠血清AST 活性顯著升高；表明高脂高糖飼料對(duì)大鼠肝功能造成了一定損傷并影響其機(jī)能。與模型對(duì)照組相比，試驗(yàn)茶湯低劑量（18.38 mg/kg）組、高劑量（55.13 mg/kg）組大鼠血清AST 活性顯著降低（P＜0.05），表明復(fù)方茶湯能夠修復(fù)高脂高糖飲食造成的肝功能損傷，使其恢復(fù)至正常水平，見表2。

表2 復(fù)方茶湯對(duì)高血脂癥大鼠肝功能指標(biāo)的影響（單位：U/L）Table 2 Effects of compound tea beverage on liver function index of hyperlipidemic rat(Unit:U/L）

2.4 復(fù)方茶湯對(duì)高脂血癥大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)的影響

表3 復(fù)方茶湯對(duì)高脂血癥模型大鼠ηb 的影響（單位：mpa.s）Table 3 Effect of compound tea beverage on ηb level in hyperlipidemic rat(Unit:mpa.s ）

表4 復(fù)方茶湯對(duì)高脂血癥模型大鼠BRV、ηp、卡松粘度的影響Table 4 Effect of compound tea beverage on BRV,ηp and ηc level in hyperlipidemic rat

表5 復(fù)方茶湯對(duì)AI、TK、RI、EI、紅細(xì)胞壓積、血沉的影響Table 5 Effect of compound tea beverage on AI、TK、RI、EI，hematocrit and ESR level in hyperlipidemic rat

如表3、4所示，與正常對(duì)照組相比，模型對(duì)照組大鼠各項(xiàng)血流變指標(biāo)均無明顯改變。與模型對(duì)照組相比，試驗(yàn)中劑量組大鼠低切變率下（1 s-1）全血粘度、50 s-1切變率下全血還原粘度、卡松粘度均顯著降低，表明攝入中劑量的復(fù)方茶湯能夠改善高血脂癥大鼠的血液粘度。如表5所示，與正常對(duì)照組相比，模型對(duì)照組大鼠血沉指數(shù)上升。與模型對(duì)照組相比，試驗(yàn)低劑量組大鼠紅細(xì)胞變形指數(shù)、紅細(xì)胞剛性指數(shù)顯著上升，表明攝入低劑量的復(fù)方茶湯也能一定程度上改善高血脂癥大鼠的血液流變性。

3 討論

采用高脂高糖喂養(yǎng)建立高脂血癥動(dòng)物模型，模型大鼠血清TC、LDL-C 含量顯著升高，說明高脂血癥模型造模成功；同時(shí)發(fā)現(xiàn)其血清AST 活性和肝臟指數(shù)明顯升高，顯示出該模型發(fā)生了一定程度的肝損傷，推測(cè)可能為脂肪肝病理改變。因此，本研究中采用高脂高糖喂養(yǎng)建立的高脂血癥動(dòng)物模型，伴隨一定程度肝損傷。

血脂是血漿中性脂肪（甘油三酯和膽固醇）和類脂（磷脂、糖脂、固醇、類固醇）的總稱。甘油三酯直接參與機(jī)體能量代謝，膽固醇能夠合成細(xì)胞漿膜、類固醇激素和膽汁酸；機(jī)體內(nèi)的膽固醇來源于食物攝取及生物合成。食物中的膽固醇（包括游離型和酯化型）被消化液中的膽固醇酯酶水解為游離膽固醇后被吸收，隨后在小腸粘膜中被膽固醇?；D(zhuǎn)移酶（ACAT）催化并重新酯化，形成膽固醇酯，最后與載脂蛋白結(jié)合形成乳糜微粒，經(jīng)由淋巴系統(tǒng)進(jìn)入血循環(huán)[16]。因此現(xiàn)代醫(yī)學(xué)將TC、TG、LDL-C、HDL-C 作為評(píng)價(jià)血脂的指標(biāo)[17]。試驗(yàn)中，復(fù)方茶湯的三個(gè)劑量均能降低大鼠血清TG、LDL-C 水平，升高HDL-C 水平；低、中劑量能降低血清TC 含量。試驗(yàn)表明復(fù)方茶湯具有明顯的降血脂藥效作用，其中低劑量降脂作用較優(yōu)。

肝臟是人體合成內(nèi)源性甘油三酯及膽固醇的主要場(chǎng)所，同時(shí)也是脂肪酸進(jìn)行β氧化最活躍的部位[18]。 谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）和谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）存在于肝細(xì)胞的細(xì)胞核及線粒體中，當(dāng)肝細(xì)胞受損時(shí)，肝細(xì)胞內(nèi)的ALT、AST 釋放入血，故血清ALT、AST 活性升高。因此，血清這兩種酶的活性升高成為肝功能受損的特異性指標(biāo)。試驗(yàn)中復(fù)方茶湯的低、高劑量能降低大鼠血清AST 活性，說明其具有一定的保肝作用。

血液流變學(xué)的異常與高脂血癥的發(fā)生與發(fā)展有密切的關(guān)系[19]。血液是懸浮液系統(tǒng)，血液粘度是血流量的倒數(shù)，表征血液流動(dòng)的阻力，是反映血粘滯程度的重要指標(biāo)。全血粘度包括高切變率（粘度200 s-1、粘度 150 s-1）、中切變率（粘度 50 s-1、粘度30 s-1）、低切變率（粘度 3 s-1、粘度 1 s-1）下的血液表觀粘度值。卡松粘度是血液在無限大切變率下的表觀粘度值。高切變率下的全血粘度與卡松粘度相關(guān)，反映紅細(xì)胞的變形性的大??；低切變率下的全血粘度與卡松屈服應(yīng)力相關(guān)性顯著，反映紅細(xì)胞的聚集性，血沉及血沉方程K 值也可反映紅細(xì)胞聚集性的高低。紅細(xì)胞壓積又稱紅細(xì)胞比積，紅細(xì)胞壓積增加，常導(dǎo)致全血粘度增加，呈現(xiàn)血液高粘滯綜合癥。由于血液粘度受紅細(xì)胞壓積的影響，全血還原粘度是為了消除紅細(xì)胞壓積的影響，比較不同血樣的粘度。血漿粘度的特點(diǎn)是不隨著切變率的變化而變化，血漿粘度升高，全血粘度增高。試驗(yàn)中復(fù)方茶湯的中劑量能降低大鼠低切變率下（1 s-1）全血粘度、50 s-1切變率下全血還原粘度、卡松粘度等，說明復(fù)方茶湯具有一定的改善血液粘度的作用，有助于改善高血脂癥狀，但該作用還需進(jìn)一步應(yīng)用高粘血癥動(dòng)物模型來深入研究。

綜上所述，本研究中復(fù)方茶湯能夠顯著降低高脂血癥大鼠血清 TC、TG、LDL-C 含量，升高HDL-C 含量；降低AST 活性；減輕大鼠體重。因此，該復(fù)方茶湯具有一定的調(diào)節(jié)血脂和保肝作用，其中低劑量降脂保肝作用較優(yōu)。日常生活中，除注意膳食平衡，加強(qiáng)體育鍛煉外，飲用該復(fù)方茶飲，對(duì)調(diào)節(jié)血脂具有一定功效。

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