無償獻血前梅毒抗體膠體金法快速篩查的探討

胡貴賓，釋艷華

(襄陽市中心血站，湖北襄陽441021)

·輸血與檢驗·

無償獻血前梅毒抗體膠體金法快速篩查的探討

胡貴賓，釋艷華

(襄陽市中心血站，湖北襄陽441021)

目的對膠體金法快速檢測獻血者梅毒螺旋體抗體進行適用性評價。方法使用ELISA-TP檢測襄陽市中心血站2015年1月-5月的無償獻血者23666例血液標(biāo)本，陽性標(biāo)本再分組進行梅毒螺旋體膠體金法快速檢測。結(jié)果ELISA-TP陽性率為0.418%，其中單試劑陽性標(biāo)本40例，膠體金法無一例檢出；ELISA-TP雙試劑陽性且S/CO 0.8～5.0的弱陽性標(biāo)本14例，膠體金法的檢出率為14.29%；ELISA-TP雙試劑陽性且S/CO＞5.0的標(biāo)本45例，膠體金法的檢出率為95.56%；平均檢出率為45.45%。結(jié)論膠體金法用于采血前初篩，對降低梅毒實驗室淘汰率有顯著意義；但梅毒初篩結(jié)果的告知沒有適當(dāng)?shù)膱鏊?，因此，獻血前梅毒初篩應(yīng)謹(jǐn)慎開展。

膠體金法；無償獻血；梅毒抗體

膠體金快速診斷試紙法具有簡便快捷、不需要特殊儀器等優(yōu)點[1]，目前被很多血站應(yīng)用于采血現(xiàn)場獻血前對獻血者的初篩[2，3]，初篩項目主要是HBsAg。本文擬通過TP膠體金試紙對TP陽性樣本的檢出情況及現(xiàn)場操作情況，初步評價其在襄陽地區(qū)獻血者初篩的意義。

1 材料與方法

1．1標(biāo)本來源所有血液標(biāo)本均來自襄陽市中心血站2015年1月-5月的無償獻血者所獻血液。

1．2試劑梅毒螺旋體抗體膠體金診斷試劑(英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司，批號2014023304)；梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫診斷試劑盒(北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司，批號N20130712、N20131219；英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司，批號2013097523、2013127531)。

1．3儀器Xantus全自動加樣系統(tǒng)，F(xiàn)ame全自動酶免后處理分析儀，Uranus全自動加樣及酶免處理系統(tǒng)，DD-5M低溫高速離心機，移液器(法國吉爾森公司)等。

1．4方法

1.4.1 采用ELISA-TP診斷試劑盒檢測2015年1月-5月的無償獻血者23666例血液標(biāo)本中的抗-TP，初試OD≥0.8×Cutoff的標(biāo)本視為可疑標(biāo)本，萬泰和新創(chuàng)試劑盒檢測均可疑的標(biāo)本采用兩種試劑分別單孔復(fù)試，任一孔陽性視為陽性標(biāo)本；萬泰或新創(chuàng)試劑盒檢測可疑的標(biāo)本采用單種試劑雙孔復(fù)試，任一孔陽性視為陽性標(biāo)本。

1.4.2 實驗分組將樣本用ELISA試劑檢測后的陽性標(biāo)本依據(jù)其陽性類型和S/CO值分為A、B、C三組。A組為ELISA單試劑陽性，S/CO≥0.8；B組為ELISA雙試劑陽性，S/CO 0.8～5.0；C組為ELISA雙試劑陽性，S/CO＞5.0。

1.4.3 采用TP膠體金試劑，檢測本實驗室酶聯(lián)免疫法抗-TP結(jié)果為陽性的血漿標(biāo)本。按說明書要求，加樣量為60～80μl，反應(yīng)溫度為22℃。結(jié)果判定：測試卡在檢測區(qū)和對照區(qū)位置出現(xiàn)兩條紫紅色條帶判定為陽性；測試卡只在對照區(qū)位置出現(xiàn)一條紫紅色條帶判定為陰性；對照區(qū)未出現(xiàn)紫紅色條帶判定為失效，結(jié)果判定時間為15min。

2 結(jié)果

2.1 2015年1月-5月23666例無償獻血者血液標(biāo)本中的抗-TP陽性標(biāo)本為99例，陽性率為0.418%。

2.2 A組膠體金法和酶聯(lián)免疫法陽性符合率為0，B組陽性符合率為14.29%，C組陽性符合率為95.56%，三組平均符合率為45.45%。詳見表1。

表1 膠體金法與ELISA法檢測99例血清TP抗體結(jié)果比較

3 討論

從表1可知，對99例ELISA-TP檢測陽性標(biāo)本分組進行膠體金法檢測，ELISA單試劑陽性的40份標(biāo)本，膠體金法無一例檢出。ELISA雙試劑陽性且S/CO 0.8～5.0的弱陽性標(biāo)本，膠體金法的檢出率僅為14.29%，且其中一部分標(biāo)本在15min判讀時，陽性條帶相對較弱。ELISA雙試劑陽性且S/ CO＞5.0的強陽性標(biāo)本，膠體金法的檢出率為95.56%。

ELISA法是目前血站系統(tǒng)最常用的梅毒血清學(xué)檢測方法，它采用雙抗原夾心酶聯(lián)免疫吸咐實驗原理，用基因工程方法生產(chǎn)的TP抗原TP47和TmpA包被微孔板，檢測血清中的梅毒螺旋體特異性抗體，具有靈敏度高，特異性強，準(zhǔn)確度高的特點[4-6]。膠體金法采用膠體金免疫檢測技術(shù)和層析原理，定性檢測血漿樣本中的梅毒螺旋體抗體，不需要特殊設(shè)備，方便單人份檢測，具有快速，簡便的特點[7，8]，已被很多血站用于街頭采血初篩。但是膠體金法靈敏度差，弱陽性多，容易出現(xiàn)漏檢；溶血及脂血的影響也會出現(xiàn)假陰性[9]。且本實驗是在有相對穩(wěn)定環(huán)境的實驗室進行，可以提供良好的反應(yīng)條件，準(zhǔn)確判讀弱陽性結(jié)果，但是如果在室外采血車或采血屋操作，由于溫度、濕度、光線、反應(yīng)時間等各方面的條件都不可控，就會出現(xiàn)極弱陽性的標(biāo)本顯不出條帶，較弱的陽性條帶就會誤判為陰性而漏檢。

實驗結(jié)果顯示，膠體金法檢測抗-TP陽性標(biāo)本的平均符合率僅為45.45%，襄陽地區(qū)梅毒實驗室檢測淘汰率為0.418%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于成都、廣西沿海萍鄉(xiāng)地區(qū)[10]。如果用于街頭采血初篩，將無法明顯降低梅毒實驗室淘汰率，反而增加了血液檢測成本和工作量。

由于受街頭獻血環(huán)境的限制，對獻血者結(jié)果解釋沒有專門場所，給梅毒這個敏感結(jié)果的告知帶來麻煩。因此，無償獻血前進行梅毒抗體膠體金法快速篩查，應(yīng)謹(jǐn)慎開展。

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R446.62，R759.1，R193.3

A

1674-1129(2015)06-0828-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2015.06.055

2015-08-17；

2015-10-13)

釋艷華，E-mail：200745785@qq.com。