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    兩種構(gòu)建小鼠脊髓擊打損傷模型儀器的比較和探討

    2015-12-19 07:10:42王春芳李鵬飛閆肖卿景志杰
    關(guān)鍵詞:砝碼脊髓儀器

    田 峰 王春芳 李鵬飛 李 宵 閆肖卿 景志杰

    (山西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心;實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與人類疾病動(dòng)物模型山西省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,太原030001)

    脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中一種嚴(yán)重的高致死致殘性創(chuàng)傷疾病,可由多種原因產(chǎn)生作用力于椎體內(nèi)的脊髓,致使脊髓受損后出現(xiàn)水腫、微血管出血以及神經(jīng)元壞死等[1]。世界衛(wèi)生組織2013年報(bào)告顯示,每年發(fā)生脊髓損傷人次多達(dá)50萬(wàn)[2]。近些年來(lái),脊髓損傷的研究已經(jīng)成為醫(yī)療領(lǐng)域中的一個(gè)熱門課題。因此,建立一種穩(wěn)定、可靠、重復(fù)性強(qiáng),并能夠最大程度的接近臨床損傷情況的SCI模型,為脊髓損傷研究提供標(biāo)準(zhǔn)化動(dòng)物模型,成為了許多實(shí)驗(yàn)室的亟待解決的問(wèn)題。

    實(shí)驗(yàn)室制作SCI模型一般分為三大類,分別是擠壓或挫傷模型、完全橫斷和局部離斷模型、缺血和化學(xué)損傷模型。每一類SCI模型都有各自的適用范圍,為了更接近人類臨床脊髓損傷后的情況,多數(shù)實(shí)驗(yàn)室會(huì)選用擠壓/挫傷模型[3]。自1911年 Allen[4]首次運(yùn)用重物自由落體原理實(shí)施垂直打擊脊髓來(lái)制作SCI模型以來(lái),由此而產(chǎn)生的重物打擊脊髓儀器也不斷的被改進(jìn)。利用上述原理,本課題組將一臺(tái)腦立體定位儀改裝成了自制Allen脊髓擊打儀。前期的實(shí)驗(yàn)顯示,通過(guò)這臺(tái)儀器,本課題組成功建立了小鼠的脊髓損傷模型,能夠通過(guò)該儀器將從胎鼠提取的神經(jīng)干細(xì)胞注射入脊髓損傷小鼠的被打擊局部,從而嘗試對(duì)小鼠進(jìn)行了神經(jīng)干細(xì)胞移植治療,并取得了一定的療效[5]。

    為了進(jìn)一步使小鼠脊髓損傷模型更加標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化,并能與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化脊髓損傷模型接軌,便于在以后的實(shí)驗(yàn)中對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞移植的效果進(jìn)行量化的分析,本課題組引進(jìn)了由 The State University New Jersey設(shè)計(jì)制作的 Impactor M-Ⅲ脊髓撞擊器。本文將通過(guò)比較上述的兩種脊髓打擊儀器制作的SCI模型,討論兩種儀器在使用上的優(yōu)缺點(diǎn)。

    材料和方法

    1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

    清潔級(jí)昆明小鼠(由山西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供),40只,體重20-25g,BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分[6]為21分,雌雄不限,許可證號(hào)為:【SCXK(晉)2009-0001】。室溫條件下飼養(yǎng),12h開(kāi)/關(guān)日光燈交替照明,自由攝食和進(jìn)水,每?jī)商旄鼡Q一次墊料。術(shù)前3h停止進(jìn)食和進(jìn)水,于山西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心屏障環(huán)境動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施進(jìn)行手術(shù)操作【SYXK(晉)2009-0004】。

    2.實(shí)驗(yàn)儀器

    2.1自制Allen脊髓擊打儀

    自制Allen脊髓擊打儀是根據(jù)Allen發(fā)明的重物墜落法原理,在現(xiàn)有的腦立體定位儀(深圳沃瑞德,68001型)的基礎(chǔ)上改造的一個(gè)準(zhǔn)確、穩(wěn)定的脊髓擊打儀器。

    改良過(guò)程:首先將原腦立體定位儀底部用來(lái)固定動(dòng)物的裝置拆除;再將原有的三維操縱臂的單頭連接器改為一端可以連接一個(gè)中空的重物打擊桿,另一端連接微量注射器的雙頭連接器;然后將三維操縱臂與雙頭連接器組合安裝在定位儀上。同時(shí),為重物打擊桿制作了專用的重物砝碼(外直徑為1cm,重量分別為5g、10g、20g三個(gè)重量砝碼)和壓迫砝碼(一個(gè)類似錐形的倒置砝碼;上部與重量砝碼接觸,直徑為1cm;下部與動(dòng)物脊髓接觸,直徑為0.15cm)(圖1)。

    操作時(shí),先將壓迫砝碼置于重物打擊桿中,與實(shí)驗(yàn)小鼠的脊髓暴露面接觸并輕度抬起;再將重量砝碼與長(zhǎng)線相連,通過(guò)重量砝碼自由落體的作用撞擊壓迫砝碼,使得壓迫砝碼對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠的脊髓造成設(shè)定重量的擊打損傷。

    2.2Impactor M-Ⅲ脊髓撞擊器

    Impactor M-Ⅲ脊髓撞擊器(W.M.Keck Ceter for Collaborative Neuroscience Rutgers,The State University New Jersey.USA)是設(shè)計(jì)用來(lái)為大小鼠施加可重復(fù)的標(biāo)準(zhǔn)脊椎撞擊的儀器。Impactor M-Ⅲ為SCI模型制作了固定重量的撞擊錘(大鼠:10g,脊髓接觸面直徑2.5mm;小鼠:5g,脊髓接觸面直徑1.2mm),可調(diào)控高度為0-99.99mm,可連續(xù)手動(dòng)調(diào)節(jié),并為減小誤差設(shè)計(jì)了釋放撞錘的電動(dòng)控制按鍵。同時(shí),Impactor M-Ⅲ脊髓撞擊器能夠與電腦進(jìn)行數(shù)據(jù)連接,通過(guò)電腦采集數(shù)據(jù),可制作出撞錘從設(shè)定高度(3.00mm,6.25mm,9.00mm,12.50mm,25.00mm,50.00mm,75.00mm)落到裸露脊髓表面的運(yùn)動(dòng)曲線,并能夠精確測(cè)量出撞錘在運(yùn)動(dòng)過(guò)程中各個(gè)節(jié)點(diǎn)的相關(guān)數(shù)據(jù)(圖2)。

    圖1 自制Allen脊髓擊打儀Fig.1 Homemade Allen’s spinal cord

    圖2 Impactor M-Ⅲ脊髓撞擊器Fig.2Impactor M-Ⅲ spinal cord contusion system

    3.小鼠脊髓擊打模型的建立

    3.1 動(dòng)物分組

    將實(shí)驗(yàn)選取的40只小鼠隨機(jī)分為兩組,每組20只。一組用自制Allen脊髓擊打儀進(jìn)行脊髓打擊(A組,n=20),另一組用Impactor M-Ⅲ脊髓撞擊器進(jìn)行脊髓打擊(B組,n=20)。再將A、B兩組小鼠各分為兩部分A1、A2和B1、B2,A1、B1用于術(shù)后BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分(n=10),A2、B2用于組織形態(tài)學(xué)觀察(n=10)。

    3.2 模型建立步驟

    采用10%的水合氯醛腹腔注射麻醉,將小鼠的四肢固定于手術(shù)用托盤。常規(guī)消毒后,用手觸及小鼠最后一對(duì)肋骨下緣定位,并用剪刀延小鼠正中被毛從定位處向頭部方向切開(kāi)一個(gè)1.5cm左右的縱向切口。逐層分離皮下組織,顯露棘突,直至暴露出T9-T11椎體。用鼠齒鑷夾住T9椎體,再用小紋式鉗咬除T9-T11的上部椎板(定位:T10為中心,T9棘突方向?yàn)樾毕蛭膊?,T11棘突方向?yàn)樾毕蝾^部),直至顯露出一個(gè)長(zhǎng)約8mm的脊髓面。分別采用兩種脊髓擊打儀器對(duì)暴露的脊髓面進(jìn)行擊打?qū)嶒?yàn),建立SCI模型,實(shí)驗(yàn)高度為12.5mm,砝碼重量為5g。以小鼠尾部痙攣狀搖擺,雙下肢及軀體回縮撲動(dòng)、雙下肢癱瘓作為造模成功標(biāo)志。

    術(shù)后將小鼠單獨(dú)分籠飼養(yǎng),每12h按摩小鼠膀胱,幫助其排尿,直至恢復(fù)自主排尿。在相應(yīng)時(shí)間節(jié)點(diǎn)對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分,記錄評(píng)分結(jié)果。并且在3d、7d、14d、21d提取損傷小鼠的脊髓進(jìn)行HE染色,觀察組織學(xué)形態(tài)。

    4.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    所得數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件和EXCEL軟件處理,實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,組間比較采用t檢驗(yàn),P<0.05時(shí)表明認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    結(jié) 果

    1.BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分

    術(shù)后三周內(nèi),對(duì)分籠飼養(yǎng)的A1、B1兩組受試實(shí)驗(yàn)小鼠在6個(gè)不同的時(shí)間點(diǎn):1d、3d、5d、7d、14d、21d采用BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分法進(jìn)行評(píng)分。

    術(shù)前受試的20只小鼠在BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分上并無(wú)差異,均保持在21分;術(shù)后1d、3d、5d以及進(jìn)入穩(wěn)定期的21d,兩組BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分相近(P>0.05),表明兩組恢復(fù)程度差異性不大;而在7d、14d,B1組評(píng)分明顯高于A1組(P<0.05),表明在這兩個(gè)時(shí)間節(jié)點(diǎn)B1組恢復(fù)程度高于A1組(表1,圖3)。

    表1 不同時(shí)間點(diǎn)各組BBB評(píng)分比較()Table 1 Comparision of BBB scores in eash group at different times()

    表1 不同時(shí)間點(diǎn)各組BBB評(píng)分比較()Table 1 Comparision of BBB scores in eash group at different times()

    注:*該組與相鄰組同一時(shí)間點(diǎn)比較,P<0.05.Note:*P<0.05,compared with the adjacent group at the same time.

    組別Groups術(shù)后評(píng)分Postoperative scores 1d 3d 5d 7d 14d 21d A1組 21.00±0.00 0.10±0.32 0.40±0.52 1.00±1.05 3.40±1.43* 7.40±1.58*術(shù)前評(píng)分Preoperative scores 14.70±2.91 13.4±3.13 B1組 21.00±0.00 0.20±0.42 0.40±0.70 1.90±1.37 5.10±1.37* 9.30±1.34*

    圖3 .各時(shí)間點(diǎn)BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分折線圖Fig 3.The line chart of every time BBB scores

    圖4 Impactor M-Ⅲ脊髓撞擊器與電腦連接得到的撞錘下落曲線及數(shù)據(jù)Fig.4Impactor M-Ⅲ spinal cord contusion system and the computer to connect the rammer fall curve and data

    2.Impactor M-Ⅲ脊髓撞擊器電腦數(shù)據(jù)

    以上10幅坐標(biāo)圖(圖3)是B1組10只小鼠由Impactor M-Ⅲ脊髓撞擊器進(jìn)行擊打?qū)嶒?yàn)時(shí),電腦同步收集的相關(guān)數(shù)據(jù)。

    圖中以重錘所在高度為縱坐標(biāo),時(shí)間點(diǎn)為橫坐標(biāo)建立坐標(biāo)圖。每幅坐標(biāo)圖中均有7條曲線,分別代表撞擊錘運(yùn)動(dòng)高度變化(Impactor Ht)、實(shí)驗(yàn)小鼠脊髓所在高度(Vertebral Ht)、撞擊錘第一次接觸脊髓時(shí)間(Contact)、脊髓形變時(shí)最低高度(Lowest CS Height)、脊髓表面高度(Cord surface)、撞擊錘速度(Velocity)、ImpVel Tang Line,并標(biāo)有撞擊錘下落最高高度(Heighest Height)。從坐標(biāo)圖中可以直觀的看出,Impactor M-Ⅲ脊髓撞擊器能夠精確的同步記錄打擊撞擊錘的運(yùn)動(dòng)軌跡及重錘相關(guān)數(shù)據(jù)。通過(guò)精確的限定實(shí)驗(yàn)高度和其他相關(guān)條件,可以使實(shí)驗(yàn)相關(guān)數(shù)據(jù)量化,穩(wěn)定性大大增強(qiáng)。

    3.傷口對(duì)比

    以下三張圖片為擊打手術(shù)前小鼠脊髓外觀情況和使用兩種脊髓打擊器制作的脊髓損傷模型后小鼠的脊髓組織外觀情況(圖5)。從圖中可以看出,使用自制Allen脊髓擊打儀得到的模型傷口處脊髓被膜無(wú)破損、無(wú)外部出血,脊髓內(nèi)部充血較明顯;而使用Impactor M-Ⅲ脊髓撞擊器得到的模型脊髓被膜有細(xì)小傷口并伴有出血。

    圖5 兩種儀器擊打后脊髓組織情況(擊打前:脊髓被膜形態(tài)完整,正中有血管走行;A:脊髓被膜無(wú)破損,脊髓內(nèi)可見(jiàn)充血;B:脊髓被膜處有出血現(xiàn)象)Fig.5The structure of the spinal cord injury(Before injury:The intact dura;A:The blood under the intact dura can be seen after the injury;B:Spinal cord have bleeding phenomenon)

    4.組織學(xué)改變

    制作脊髓損傷后,脊髓組織內(nèi)的結(jié)構(gòu)形態(tài)、細(xì)胞狀況均發(fā)生變化??梢?jiàn)脊髓內(nèi)出現(xiàn)大量血紅細(xì)胞,并伴有膠質(zhì)細(xì)胞增生、大量空泡產(chǎn)生等現(xiàn)象(圖6)。

    圖6 脊髓擊打后HE染色(圖中脊髓形態(tài)完整,灰白質(zhì)界限清晰、結(jié)構(gòu)致密,神經(jīng)纖維排列整齊,打擊處可見(jiàn)大量紅細(xì)胞,組織結(jié)構(gòu)紊亂)Fig.6The result of HE staining of spinal cord injury(The spinal cordStructural integrity,boundary clearly in gray and white substance,Compact structure,Neat nerve fibers.A large number of red blood cells have been seen in wound and the structure disorder)

    兩種儀器制作的模型在HE染色后,從得到的圖片上可以看出染色結(jié)果差異不大。均可見(jiàn)3d時(shí),可見(jiàn)明顯的出血、充血現(xiàn)象,神經(jīng)細(xì)胞核碎裂,炎性細(xì)胞可見(jiàn),炎性滲出;7d時(shí),有較多的膠質(zhì)細(xì)胞增生出現(xiàn),血管和間質(zhì)纖維輕度增生,組織疏松;14d時(shí),組織結(jié)構(gòu)表疏松,灰白質(zhì)界限模糊,膠原纖維增多伴淀粉樣變性,并有大量空泡變性;21d時(shí),有核細(xì)胞數(shù)量增多,均勻分布,有膠原穿插,結(jié)構(gòu)稍顯緊密(圖7)。

    討 論

    隨著現(xiàn)代社會(huì)各種交通運(yùn)輸工具數(shù)量增多、建筑業(yè)的飛速發(fā)展,復(fù)雜環(huán)境和狀況對(duì)人類造成了傷害的幾率日益增加,相關(guān)的脊髓損傷患者數(shù)量也呈每年上升的趨勢(shì)。如何更加深入地研究和探索脊髓損傷后各項(xiàng)病理生理狀況及治療,成為了近幾年醫(yī)療領(lǐng)域的熱門課題。因而,在實(shí)驗(yàn)室中,如何建立一個(gè)穩(wěn)定、準(zhǔn)確、標(biāo)準(zhǔn)化強(qiáng)、操作性強(qiáng)、重復(fù)性好并且最大程度接近臨床脊髓損傷情況的動(dòng)物模型就顯得至關(guān)重要。

    實(shí)驗(yàn)表明,自制Allen脊髓打擊器和Impactor M-Ⅲ脊髓撞擊器都能夠成功建立的兩組動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)P停⑶覂山M模型均能很好反應(yīng)脊髓損傷后小鼠的運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)過(guò)程。并且,通過(guò)BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分發(fā)現(xiàn)兩種儀器所造模型恢復(fù)期間存在一定的差異,但在組織形態(tài)切片上差異顯示不大,可能由于兩臺(tái)儀器構(gòu)造及操作的不同造成。

    圖7 各時(shí)間點(diǎn)脊髓損傷處HE染色(A1、B1:3d,神經(jīng)細(xì)胞核碎裂,有明顯充血出血,炎性滲出,炎細(xì)胞可見(jiàn);A2、B2:7d,脊髓膠質(zhì)細(xì)胞增生,血管和間質(zhì)纖維輕度增生,組織疏松;A3、B3:14d,灰白質(zhì)界限模糊,膠原纖維增多伴淀粉樣變性,有空泡產(chǎn)生;A4、B4:21d,有核細(xì)胞增多,膠原穿插其中,結(jié)構(gòu)稍顯緊密)Fig.7Therusult of HE staining in different times(A1、B1:3d,karyorrhexis of neurone,hyperaemia,inflammatory exudation;A2、B2:7d,gliocyte proliferation,tissue loose;A3、B3:14d,boundary blurring in gray and white substance,glial scar as well as cavity were formed;A4、B4:21d,numerous nucleated cells,Collagen interwoven)

    1.高度、重量、控制差異

    自制Allen脊髓打擊器具有一個(gè)重物打擊桿,實(shí)驗(yàn)者手動(dòng)控制用長(zhǎng)線連接的砝碼,經(jīng)過(guò)打擊桿中空的桿徑下落撞擊壓迫砝碼。在這一過(guò)程中,砝碼離脊髓面的高度由實(shí)驗(yàn)者量取線長(zhǎng)來(lái)確定,不能做到十分的精確,并且砝碼與桿內(nèi)壁會(huì)產(chǎn)生摩擦,出現(xiàn)誤差;實(shí)驗(yàn)者手動(dòng)控制砝碼的下落,這個(gè)過(guò)程砝碼高度也會(huì)有一定的誤差;壓迫砝碼是壓在裸露脊髓表面并輕微抬起,重量不計(jì),這樣會(huì)使砝碼重量略微增大,存在一定的誤差[7]。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果中也可以看出,A組的損傷程度較B組略重,在7d、14d恢復(fù)高峰期相對(duì)恢復(fù)較慢。

    Impactor M-Ⅲ脊髓撞擊器的砝碼高度是由機(jī)械控制,可以在0-99.99mm范圍內(nèi)連續(xù)調(diào)節(jié),垂直運(yùn)動(dòng)距離準(zhǔn)確度0.001mm,分辨率0.01mm;從得到的坐標(biāo)圖也可以看出,撞擊錘下落最高高度(Heighest Height)的誤差被控制在5%以內(nèi)。采用電動(dòng)按鈕機(jī)械控制砝碼的下落,也可減少摩擦帶來(lái)的誤差。但是Impactor M-Ⅲ的配套撞擊錘重量為大鼠10g、小鼠5g、撞擊錘為固定機(jī)械裝置,不能更換其重量,限制了實(shí)驗(yàn)中對(duì)重量改變的要求。

    2.傷口定位差異

    自制Allen脊髓打擊器在操作時(shí),是先將壓迫砝碼精確定位于脊髓暴露面并輕輕接觸,然后輕微抬起壓迫砝碼。這樣可以使脊髓在被擊打時(shí)受力均勻,并且可以避免脊髓因撞錘下沖而移位,不易造成脊髓偏擊,但脊髓內(nèi)出血現(xiàn)象較重。

    Impactor M-Ⅲ脊髓撞擊器操作時(shí),是先將撞擊錘定位于脊髓暴露面,精確定位后在手動(dòng)調(diào)節(jié)機(jī)械臂,使撞錘上升到需要高度,按下電控按鈕,撞錘自由下落。這樣的方法容易使脊髓在被打擊時(shí)因形變移位導(dǎo)致砸偏而受力不均。如果高度定位較高,撞錘下落后會(huì)對(duì)脊髓產(chǎn)生沖擊傷,易刺穿脊髓表膜,造成出血較多。

    所以從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出,自制Allen脊髓打擊器制作的模型打擊程度較Impactor M-Ⅲ脊髓撞擊器制作的模型損傷程度重,但不易出現(xiàn)砸偏現(xiàn)象。

    3.其他差異

    在建立脊髓擊打模型的基礎(chǔ)上,自制Allen脊髓打擊器和Impactor M-Ⅲ脊髓撞擊器都增加了一些其他功能的設(shè)備,用來(lái)進(jìn)一步進(jìn)行損傷的后續(xù)實(shí)驗(yàn)。自制Allen脊髓打擊器可以在雙頭連接器上可以加持一個(gè)微量注射器,利用三維空間定位的原理,為損傷脊髓后的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物注射干細(xì)胞使用。而Impactor M-Ⅲ脊髓撞擊器可以與電腦相連接,實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)的實(shí)時(shí)收集和分析。不僅能夠根據(jù)撞擊錘的下降情況繪制撞擊錘運(yùn)動(dòng)高度變化(Impactor Ht),而且還可以根據(jù)坐標(biāo)圖中其他數(shù)據(jù)量化模型制作標(biāo)準(zhǔn),如:根據(jù)脊髓所在高度(Vertebral Ht)與脊髓形變時(shí)最低高度(Lowest CS Height)計(jì)算出脊髓形變對(duì)小鼠存活時(shí)間的影響;根據(jù)撞擊錘速度(Velocity)來(lái)判斷摩擦力的變化,并且誤差能控制在5%以內(nèi)。為穩(wěn)定分析實(shí)驗(yàn)撞擊數(shù)據(jù)提供技術(shù)支持,并且使實(shí)驗(yàn)相關(guān)的各種數(shù)據(jù)得到了量化,使實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性大大增強(qiáng)。

    許多實(shí)驗(yàn)室選用自制Allen脊髓打擊器,多因?yàn)樽灾艫llen脊髓打擊器造價(jià)較低,能夠大大降低實(shí)驗(yàn)成本。但是,使用和改裝方式不一致,使得得到的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)無(wú)法用統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)來(lái)衡量;而Impactor M-Ⅲ脊髓撞擊器有著廣泛的使用群體,截止目前,國(guó)外有超過(guò)100個(gè)實(shí)驗(yàn)室在使用,并且有超過(guò)50%的關(guān)于脊髓損傷研究文獻(xiàn)采用此種打擊器,但在國(guó)內(nèi)應(yīng)用較少。因此,使用該儀器可以很好的實(shí)現(xiàn)制作脊髓損傷模型標(biāo)準(zhǔn)化,與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化接軌。但是Impactor M-Ⅲ脊髓撞擊器存在著價(jià)格昂貴、購(gòu)買相對(duì)困難等問(wèn)題。隨著脊髓損傷研究的廣泛展開(kāi)和不斷深入,使用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化的模型制備儀器必將成為以后大勢(shì)所趨。

    綜上所述,本實(shí)驗(yàn)采用了兩種不同的脊髓打擊儀器,分別建立兩組小鼠脊髓擊打模型。通過(guò)比較脊髓打擊實(shí)驗(yàn)時(shí)兩種儀器的操作情況和脊髓打擊后兩組小鼠在恢復(fù)上的不同,對(duì)兩種儀器在脊髓擊打?qū)嶒?yàn)中出現(xiàn)的各種優(yōu)缺點(diǎn)進(jìn)行了說(shuō)明。通過(guò)比較可以看出,兩種儀器都可以穩(wěn)定、準(zhǔn)確的建立動(dòng)物脊髓損傷模型。實(shí)驗(yàn)者可以根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)的具體情況和要求或所在實(shí)驗(yàn)室的要求來(lái)選擇使用不同的擊打儀器,從而得到可重復(fù)的脊髓損傷模型。但I(xiàn)mpactor M-Ⅲ脊髓撞擊器的使用,會(huì)為數(shù)據(jù)化脊髓損傷模型提供可參考的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),為提高動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)P偷某晒β侍峁┍U稀?/p>

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