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    藤黃果提取物對雄性大鼠脂代謝的影響及降脂機(jī)理

    2015-12-13 05:41:39劉冠星韓寧寧馬海田
    食品科學(xué) 2015年9期
    關(guān)鍵詞:藤黃脂聯(lián)素提取物

    劉冠星,韓寧寧,馬海田

    (南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 農(nóng)業(yè)部動(dòng)物生理生化重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇 南京 210095)

    藤黃果提取物對雄性大鼠脂代謝的影響及降脂機(jī)理

    劉冠星,韓寧寧,馬海田*

    (南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 農(nóng)業(yè)部動(dòng)物生理生化重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇 南京 210095)

    以雄性大鼠為研究對象,探討日糧中添加不同劑量的藤黃果提取物對大鼠脂代謝常規(guī)生化指標(biāo)及相關(guān)基因表達(dá)的影響。結(jié)果表明:日糧中添加不同劑量的藤黃果提取物均可顯著降低大鼠血清中甘油三酯的含量(P<0.05),高劑量藤黃果提取物則可顯著降低肝臟組織中甘油三酯的含量(P<0.05);不同劑量藤黃果提取物處理對血清和肝臟組織中總膽固醇含量均無顯著影響(P>0.05)。脂肪代謝相關(guān)基因分析結(jié)果表明:高劑量藤黃果提取物處理可顯著抑制SREBP1c(P<0.01)和ACL(P<0.05)基因表達(dá)水平,同時(shí)顯著提高ACO和ATGL基因表達(dá)水平(P<0.05);MCD和PPARα基因表達(dá)水平在中劑量(P<0.05)和高劑量(P<0.01)藤黃果提取物處理組顯著高于對照組;高劑量藤黃果提取物處理可顯著促進(jìn)AMPKα1和AdipoR-1基因表達(dá)水平(P<0.05),但對脂聯(lián)素基因表達(dá)水平?jīng)]有影響。以上結(jié)果提示,藤黃果提取物處理可通過激活A(yù)dipo-AMPK信號通路,進(jìn)而抑制脂肪酸合成途徑中的關(guān)鍵因子、增強(qiáng)脂肪酸氧化途徑中的關(guān)鍵因子基因的表達(dá),最終降低雄性大鼠體內(nèi)脂肪的沉積。

    藤黃果提取物;羥基檸檬酸;脂代謝;5’-腺苷-磷酸激活的蛋白激酶

    在現(xiàn)代社會(huì),肥胖的發(fā)生率越來越高,無論在發(fā)達(dá)國家還是發(fā)展中國家,都已成為重要的健康問題[1-3]。肥胖是很多疾病的重要誘因,例如:關(guān)節(jié)炎、糖尿病、心腦血管疾病及高血壓甚至癌癥[2-4]。肥胖表現(xiàn)為長期的食物攝入與能量支出的失衡。因此,抗肥胖的食物或食品添加劑如果能夠有效地減少脂肪堆積,就可以避免肥胖,進(jìn)而對肥胖引起的疾病起到一定的預(yù)防效果[4]。

    藤黃有與眾不同的酸味,南亞的許多國家作為調(diào)料一直使用了幾個(gè)世紀(jì)[5]。常用作研究的為Garcinia cambogia,又稱馬拉巴爾羅望子(Malabar tamarind),是一種小型或中型的藤黃科果樹,其果實(shí)已被用于提升肉類及海鮮的風(fēng)味,調(diào)制飲料,還曾經(jīng)用于魚類的保鮮。(-)-羥基檸檬酸((-)-hydroxycitric acid,(-)-HCA)是藤黃果提取物中的主要成分。人體實(shí)驗(yàn)大量研究發(fā)現(xiàn),(-)-HCA可以通過抑制脂肪的合成、抑制食欲等機(jī)制,從而達(dá)到減輕體質(zhì)量的功效,且目前已經(jīng)有商品化的健康食品投入市場[6-7]。雖然藤黃果提取物及其主要成分(-)-HCA因具有獨(dú)特的生物學(xué)功能而引起生物學(xué)家的廣泛關(guān)注,但其調(diào)控機(jī)體脂肪代謝的生物化學(xué)機(jī)制還不是很清楚。因此,本實(shí)驗(yàn)以雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠為研究對象,探討長期飼喂藤黃果提取物對SD大鼠體質(zhì)量、脂代謝常規(guī)生化指標(biāo)及相關(guān)基因表達(dá)的影響,以期為其作為降脂調(diào)節(jié)劑在人類醫(yī)學(xué)和畜牧生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料、試劑與儀器

    藤黃果提取物 鄭州安譽(yù)科技有限公司。

    (-)-羥基檸檬酸(純度56%~58%) 上海微譜化工技術(shù)服務(wù)有限公司;總膽固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、游離脂肪酸(free fatty acid,F(xiàn)FA)、血糖檢測試劑盒 南京建成生物工程研究所;反轉(zhuǎn)錄所用試劑 美國Vazyme Biotech公司。

    UV-2100型分光光度計(jì) 上海尤尼柯儀器有限公司;MIKRO-22R型高速冷凍離心機(jī) 德國Andreas Hettich GmbH公司;核酸濃度測定儀 德國Eppendorf公司;TPERSONRAL型PCR儀 美國Biometra公司。

    1.2 動(dòng)物及處理

    雄性SD大鼠(動(dòng)物合格證號0013070,動(dòng)物使用許可證號SCXK(蘇)2009-0002),220 g左右,購自江蘇大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

    60 只SD大鼠飼養(yǎng)期間,自由采食飲水,自然光照。適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后,隨機(jī)分為4 組:普通飲食組(NC組,n=15)、藤黃果提取物低劑量組(NC+L組,n=15)、藤黃果提取物中劑量組(NC+M組,n=15)和藤黃果提取物高劑量組(NC+H組,n=15)。飼料由江蘇協(xié)同生物工程有限責(zé)任公司加工配制,各實(shí)驗(yàn)組飼料中含藤黃果提取物分別為0、25、50、75 g/kg,內(nèi)含有效成分(-)-HCA 56%~58%,實(shí)驗(yàn)飼養(yǎng)8 周后,采集血液和肝臟、睪丸周圍脂肪等組織,待測。

    1.3 生長性能的檢測

    記錄實(shí)驗(yàn)期大鼠體質(zhì)量增加情況,稱量肝臟、睪脂的質(zhì)量。計(jì)算肝臟指數(shù)和睪脂指數(shù)。

    1.4 血清及肝臟生化指標(biāo)測定

    采用試劑盒法檢測血清及肝臟組織中TG、TC、FFA和血糖水平,所用試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

    1.5 脂代謝相關(guān)基因檢測

    1.5.1 總RNA提取

    取SD大鼠肝臟組織樣品,用Trizol試劑提取總RNA,紫外分光光度計(jì)和變性瓊脂糖凝膠電泳測定總RNA濃度與純度(OD260nm/OD280nm=1.8~2.0)。

    1.5.2 反轉(zhuǎn)錄

    表1 基因引物序列Table 1 Primer sequences for target genes

    反轉(zhuǎn)錄采用20 μL體系:12 μmol/L隨機(jī)引物、0.5 mmol/L dNTP、20 U/μL RNA酶抑制劑、10 U/μL反轉(zhuǎn)錄酶、4 μL 5×RT Buffer(250 mmol/L Tris-HCl(pH 8.3)、50 mmol/L MgCl2、250 mmol/L KCl、50 mmol/L二硫蘇糖醇(dithiothreitol,DTT)、2.5 mmol/L亞精胺)。反轉(zhuǎn)錄流程為:RNA模板,dNTP和隨機(jī)引物混合,70 ℃變性5 min,立即冷卻,加入其余試劑37 ℃反應(yīng)60 min,95 ℃滅活5 min。所得產(chǎn)物放于-20 ℃保存?zhèn)溆?。脂代謝相關(guān)基因引物序列使用Primer 5.0軟件設(shè)計(jì),由Invitrogen生物技術(shù)有限公司合成。引物序列及相關(guān)參數(shù)如表1所示。

    1.5.3 實(shí)時(shí)定量-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real time quantitypolymerase chain reaction,RTQ-PCR)

    實(shí)時(shí)定量PCR使用20 μL反應(yīng)體系:2 μL cDNA模板、10 μL AceQTMqP CR SYBR?Green Master Mix、目的基因引物2 μL、滅菌蒸餾水加入使體系體積至20 μL。PCR反應(yīng)條件如下: 95 ℃ 10 s、60 ℃ 5 s、72 ℃ 30 s、40 個(gè)循環(huán)。

    1.6 數(shù)據(jù)分析

    2 結(jié)果與分析

    2.1 藤黃果提取物對大鼠體質(zhì)量增加及肝臟、睪脂指數(shù)的影響

    圖1 藤黃果提取物對大鼠體質(zhì)量增加及肝臟、睪脂指數(shù)的影響Fig.1 Effect of Garcinia cambogia extract on body weight gain and relative weights of liver and epididymal fat pad in rats

    由圖1A可知,不同劑量的藤黃果提取物對實(shí)驗(yàn)大鼠體質(zhì)量增加量的影響均無統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著性變化。但添加中劑量和高劑量的藤黃果提取物有降低大鼠體質(zhì)量增加的趨勢,其體質(zhì)量分別較普通飲食組降低了7%和2%。與普通飲食組相比,添加不同劑量的藤黃果提取物均可顯著降低雄性大鼠肝臟指數(shù)(P<0.01)(圖1B);睪脂指數(shù)雖無顯著性變化(P>0.05),但添加高劑量的藤黃果提取物使睪脂指數(shù)較普通飲食組降低了14%(圖1C)。

    2.2 藤黃果提取物對大鼠血清脂代謝相關(guān)生化指標(biāo)的影響

    圖2 藤黃果提取物對大鼠血清脂代謝相關(guān)指標(biāo)的影響Fig.2 Effect of Garcinia cambogia extract on lipid metabolic parameters in serum of rats

    如圖2所示,日糧中添加低、中劑量的藤黃果提取物均可顯著降低大鼠血清中TG的含量(P<0.05),添加高劑量的藤黃果提取物則可極顯著降低血清中TG的含量(P<0.01)。與普通飲食組相比,添加中、高劑量的藤黃果提取物可顯著降低血清中血糖的含量(P<0.05),添加高劑量的藤黃果提取物可顯著降低血清FFA的含量(P<0.05);但與普通飲食組相比,添加不同劑量的藤黃果提取物對血清中TC的含量均無顯著影響(P>0.05)。

    2.3 藤黃果提取物對大鼠肝臟TG和TC水平的影響

    圖3 藤黃果提取物對大鼠肝臟中TG和TC濃度的影響Fig.3 Effect of Garcinia cambogia extract on lipid metabolic parameters in liver of rats

    如圖3所示,日糧中添加不同劑量的藤黃果提取物對大鼠肝臟中TC含量無顯著影響(P>0.05)。但添加高劑量的藤黃果提取物顯著降低肝臟組織中TG的含量(P<0.05)。

    2.4 藤黃果提取物對大鼠肝臟脂代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響

    2.4.1 藤黃果提取物對大鼠肝臟脂肪合成代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響

    圖4 藤黃果提取物對大鼠肝臟脂肪合成代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響Fig.4 Effect of Garcinia cambogia extract on lipid anabolism related genes mRNA expression in the hepatic tissue of rats

    如圖4所示,與普通飲食組相比,日糧中添加高劑量的藤黃果提取物可降低大鼠肝臟組織中固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1(sterol regulatory element-binding proteins-1,SREBP-1)基因的表達(dá)(P<0.01)和ATP-檸檬酸裂解酶(ATP citr ate lyase,ACL)(P<0.05)基因的表達(dá)水平。添加不同劑量的藤黃果提取物對肝臟組織中乙酰輔酶A羧化酶(acetyl CoA carboxylase,ACC)和脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,F(xiàn)AS)基因表達(dá)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著影響(P>0.05),但高劑量藤黃果提取物處理組大鼠肝臟組織中ACC及FAS基因表達(dá)水平分別較普通飲食組下降了55%和49%。

    2.4.2 藤黃果提取物對大鼠肝臟脂肪分解代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響

    圖5 藤黃果提取物對大鼠肝臟脂肪分解代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響Fig.5 Effect of Garcinia cambogia extract on lipolysis metabolism related genes mRNA expressio n in the hepatic tissue of rats

    由圖5可知,乙酰輔酶A氧化酶(acyl-CoA oxidase,ACO)、脂肪三酰甘油脂肪酶(adipose triglyceride lipase,ATGL)基因表達(dá)水平在高劑量藤黃果提取物處理組均顯著高于普通飲食組(P<0.05);丙二酰輔酶脫羧酶(malonyl CoA decarboxylase,MCD)和過氧化物酶體增殖物激活受體α( peroxisome proliferators-activativated receptor-α,PPARα)基因表達(dá)水平在中劑量藤黃果提取物處理組均顯著高于普通飲食組(P<0.05),而在高劑量藤黃果提取物處理組則極顯著高于普通飲食組(P<0.01)。

    2.5 藤黃果提取物對大鼠AMPKα1和AMPKα2基因表達(dá)的影響

    圖6藤黃果提取物對大鼠AMPKα1MPK1和AMPKα2MPK2基因表達(dá)的影響Fig.6 Effect of Garcinia cambogia extract on AMPKα1 and AMPKα2 mRNA expression in the hepatic tissue of rats

    如圖6所示,5’-腺苷-磷酸激活的蛋白激酶α1(adenosine 5’-monophosphate(AMP)-activated protein kinase,AMPKα1)基因表達(dá)水平在高劑量藤黃果提取物處理組顯著高于普通飲食組(P<0.05),但添加不同劑量的藤黃果提取物對5’-腺苷-磷酸激活的蛋白激酶α2(adenosine 5’-monophosphate (AMP)-activated protein kinase,AMPKα2)基因表達(dá)則無顯著影響(P>0.05)。

    2.6 藤黃果提取物對脂聯(lián)素及其受體基因表達(dá)的影響

    圖7 藤黃果提取物對大鼠脂聯(lián)素及其受體基因表達(dá)的影響Fig.7 Effect of Garcinia cambogia extract on Adiponectin and AdipoR mRNA expression in the hepatic tissue of rats

    如圖7所示,不同劑量藤黃果提取物處理對脂聯(lián)素基因表達(dá)水平無顯著影響(P>0.05)。脂聯(lián)素受體-1(adiponectin receptor-1,AdipoR-1)基因表達(dá)水平在中、高劑量藤黃果提取物處理組均顯著高于普通飲食組(P<0.05或P<0.01),但不同劑量的藤黃果提取物處理對脂聯(lián)素受體-2(adiponectin receptor-2,AdipoR-2)基因表達(dá)水平則無顯著影響(P>0.05)。

    3 討 論

    本研究結(jié)果表明,添加不同劑量的藤黃果提取物對大鼠體質(zhì)量增加量和睪脂指數(shù)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著影響,但添加高劑量的藤黃果提取物有降低大鼠體質(zhì)量增加量和睪脂指數(shù)的趨勢,且與普通飲食組相比體質(zhì)量增加量和睪脂指數(shù)分別下降了2%和14%。在大鼠及人類的相關(guān)研究中,藤黃果提取物中的有效成分(-)-HCA可以降低體質(zhì)量增加量,并減少脂肪堆積[5,8-9],這與本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果基本相符。本研究結(jié)果表明,添加不同劑量的藤黃果提取物處理均可極顯著地降低大鼠肝臟指數(shù),這與Kim[9]、Onakpoya[10]等的研究結(jié)果相符合,其機(jī)制可能與(-)-HCA可以減少內(nèi)臟脂肪堆積、并且增強(qiáng)機(jī)體的新陳代謝有關(guān)。從血清和肝臟組織中相關(guān)生化指標(biāo)可以看出,添加不同劑量的藤黃果提取物均可顯著性地降低血清中TG的含量,而添加高劑量的藤黃果提取物可顯著性地降低肝 臟組織中TG的含量, 并且降低血清中FFA和血糖水平。提示藤黃果提取物對于雄性大鼠有一定的降糖、降脂作用。許多研究都顯示藤黃果提取物(或其主要成分(-)-HCA)對于控制肥胖及其他代謝有一定影響,例如控制脂肪堆積、血脂異常等[4,9,11-13],這與本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果相符。

    動(dòng)物脂肪代謝與脂肪的合成、分解過程息息相關(guān)。ACL是一種線粒體外酶,該酶參與線粒體外脂肪酸的合成[14]。本研究結(jié)果表明,添加高劑量的藤黃果提取物可抑制ACL基因的表達(dá)水平。早在1970年,Lowenstein[15]就已經(jīng)確定了(-)-HCA是此種酶的競爭性抑制劑。在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)或是體外實(shí)驗(yàn)中都已證明(-)-HCA可以引起乙酰輔酶A含量的降低,因而可以限制各個(gè)組織中脂肪酸和膽固醇的生物合成[15-16]。ACC是催化脂肪酸合成的限速酶,其可催化胞液中乙酰CoA羧化為丙二酸單酰CoA。FAS繼而催化丙二酸單酰CoA和乙酰CoA縮合、還原等一系列反應(yīng),最終生成脂肪酸[17]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,添加不同劑量的藤黃果提取物對肝臟組織中ACC和FAS基因表達(dá)水平均無顯影響,結(jié)合ACL基因表達(dá)情況分析,其原因可能是因(-)-HCA抑制ACL基因表達(dá)導(dǎo)致在細(xì)胞液中用于生成脂肪酸前體的乙酰CoA含量的減少所致。SREBP-1是重要的核轉(zhuǎn)錄因子之一,能與脂質(zhì)合酶基因的啟動(dòng)子/增強(qiáng)子的固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合而激活靶基因轉(zhuǎn)錄,從而特異性調(diào)控膽固醇和脂肪酸合成[18]。本實(shí)驗(yàn)中研究表明,日糧中添加高劑量的藤黃果提取物處理可極顯著地抑制SREBP1c基因表達(dá)。提示:日糧中添加藤黃果提取物可通過調(diào)節(jié)SREBP-1基因的表達(dá)而影響肝臟組織中脂肪酸的合成,從而導(dǎo)致TG含量的減少。

    ATGL是脂肪分解的關(guān)鍵酶,與TG的分解代謝過程密切相關(guān)。ATGL可以顯著的提升甘油三酯酯酶的活性并且催化脂類分解的第一步限速反應(yīng)[19]。本實(shí)驗(yàn)中添加高劑量的藤黃果提取物處理可導(dǎo)致肝臟組織中ATGL表達(dá)量增強(qiáng),說明藤黃果提取物可以加強(qiáng)肝臟組織中甘油三酸的分解,這與藤黃果提取物處理可導(dǎo)致肝臟組織中甘油三酸含量下降的結(jié)果相一致。PPARs屬于細(xì)胞核受體超家族,是配體依賴的轉(zhuǎn)錄因子,其調(diào)節(jié)脂類及脂蛋白代謝,影響脂肪酸的攝取和分解[20-22]。PPARα是PPARs家族成員之一,它的下游基因如ACO和肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶-1(carnitine palmitoyl transterase-1,CPT-1)等參與脂類分解[20]。本次實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),添加藤黃果提取物的可以導(dǎo)致PPARα和ACO基因表達(dá)水平的提高,說明藤黃果提取物處理可促進(jìn)大鼠肝臟脂肪酸的分解代謝。MCD可以降低丙二酰CoA水平,進(jìn)而解除對CPT-1的抑制,促進(jìn)脂肪酸氧化[22-24]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,添加藤黃果提取物可促進(jìn)MCD的基因表達(dá),該結(jié)果進(jìn)一步說明藤黃果提取物可加速脂肪酸的氧化,進(jìn)而減少脂肪的沉積。

    AMPK在調(diào)節(jié)動(dòng)物機(jī)體脂肪酸的合成、膽固醇的合成、促進(jìn)脂肪酸的氧化等方面均有重要的作用。脂肪代謝過程中的關(guān)鍵因子SREBP-1、ACC、MCD、ATGL等均是AMPK下游的靶蛋白因子。已有研究報(bào)道,活化的AMPK通過磷酸化乙酰輔酶A羧化酶抑制其活性,并促進(jìn)丙二酰輔酶脫羧酶MCD表達(dá)及活化,從而降低丙二酰CoA水平,解除對CPT-1的抑制,促進(jìn)脂肪酸氧化[23-24]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,高劑量的藤黃果提取物處理可顯著提高大鼠肝臟組織中AMPKα1的基因表達(dá)水平。脂聯(lián)素是一種主要由脂肪組織分泌的脂肪細(xì)胞因子,它所介導(dǎo)的信號通路中,脂聯(lián)素首先要與脂聯(lián)素受體結(jié)合,進(jìn)而傳遞信號激活下游信號通路,其中AMPK是脂聯(lián)素信號調(diào)節(jié)的重要關(guān)鍵因子[25]。本研究結(jié)果表明,藤黃果提取物處理雖然對脂聯(lián)素基因表達(dá)沒有顯著影響,但中、高劑量的藤黃果提取物處理可顯著升高肝臟組織中AdipoR-1的表達(dá)量。該研究結(jié)果提示,藤黃果提取物對大鼠脂肪代謝的調(diào)節(jié)作用與Adipo-AMPK信號通路密切相關(guān)。

    綜合以上結(jié)果分析,日糧中添加藤黃果提取物可能通過激活A(yù)dipo-AMPK信號通路,進(jìn)而抑制脂肪酸合成途徑中的關(guān)鍵因子、增強(qiáng)脂肪酸氧化途徑中的關(guān)鍵因子基因的表達(dá),最終降低雄性大鼠體內(nèi)脂肪的沉積。

    [1] SUGERMAN H J, WOLFE L G, SICA D A, et al. Diabetes and hypertension in severe obesity and effects of gastric bypass-induced weight loss[J]. Annals of Surgery, 2003, 237(6): 751-758.

    [2] STRACZKOWSKI M, KOWALSKA I, STEPIEN A, et al. Insulin resistance in the first-degree relatives of persons with type 2 diabetes[J]. Med Science Monitor, 2003, 9(5): CR186-CR190.

    [3] SEIDELL J C. Obesity in Europe[J]. Obesity in Europe-Research Gate, 1995, 3(Suppl 2): 89-93.

    [4] SAITO M, UENO M, OGINO S, et al. High dose of Garcinia cambogia is effective in suppressing fat accumulation in developing male Zucker obese rats, but highly toxic to the testis[J]. Food an d Chemical Toxicology, 2005, 43(3): 411-419.

    [5] PREUSS H G, BAGCHI D, BAGCHI M, et al. Effects of a natural extract of (-)-hydroxycitric acid (HCA-SX) and a combination of HCA-SX plus niacin-bound chromium and Gymnema sylvestre extract on weight loss[J]. Diabetes Obesity Metabolism, 2004, 6(3): 171-180.

    [6] LIM K, RYU S, NHO H S, et al. (-)-Hydroxycitric acid ingestion increases fat utilization during exercise in untrained women[J]. Journal of Nutritional Science and Vitaminology, 2003, 49(3): 163-167.

    [7] KRIKETOS A D, THOMPSON H R, GREENE H, et al. (-)-Hydroxycitric acid does not affect energy expenditure and substrate oxidation in adult males in a post-absorptive state[J]. International Journal of Obessity Related Metabolic Disorders, 1999, 23(8): 867-873.

    [8] HAYAMIZU K, ISHII Y, KANEKO I, et al. Effects of garcinia cambogia (hydroxycitric acid) on visceral fat accumulation: a doubleblind, randomized, placebo-controlled trial[J]. Current Therapeutic Research-Clinical and Experimental, 2003, 64(8): 551-567.

    [9] KIM Y J, KIM K Y, KIM M S, et al. A mixture of the aqueous extract of Garcinia cambogia, soy peptide and L-carnitine reduces the accumulation of visceral fat mass in rats rendered obese by a high fat diet[J]. Genes & Nutrition, 2008, 2(4): 353-358.

    [10] ONAKPOYA I, HUNG S K, PERRY R, et al. The use of garcinia extract (hydroxycitric acid) as a weight loss supplement: a systematic review and meta-analysis of randomised clinical trials[J]. Journal of Obesity, 2011, 2011: 509038. doi:10.1155/2011/509038.

    [11] ROY S, SHAH H, RINK C, et al. Transcriptome of primary adipocytes from obese women in response to a novel hydroxycitric acid-based dietary supplement[J]. DNA and Cell Biology, 2007, 26(9): 627-639.

    [12] ROY S, RINK C, KHANNA S, et al. Body weight and abdominal fat gene expression profi le in response to a novel hydroxycitric acid-based dietary supplement[J]. Gene Expression, 2004, 11(5/6): 251-262.

    [13] KOVACS E M, WESTERTERP-PLANTENGA M S. Effects of (-)-hydroxycitrate on net fat synthesis as de novo lipogenesis[J]. Physiology & Behavior, 2006, 88(4/5): 371-381.

    [14] 劉家儀, 李楊瑞, 楊麗濤. ATP-檸檬酸裂解酶研究進(jìn)展[J]. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào), 2014, 45(2): 204-208.

    [15] LOWENSTEIN J M. Effect of (-)-hydroxycitrate on fatty acid synthesis by rat liver in vivo[J]. Journal of Biological Chemistry, 1971, 246(3): 629-632.

    [16] SULLIVAN A C, TRISCARI J, HAMILTON J G, et al. Effect of (-)-hydroxycitrate upon the accumulation of lipid in the rat.Ⅰ. lipogenesis[J]. Lipids, 1974, 9(2): 121-128.

    [17] CHEN N, BEZZINA R, HINCH E, et al. Green tea, black tea, and epigallocatechin modify body composition, improve glucose tolerance, and differentially alter metabolic gene expression in rats fed a high-fat diet[J]. Nutrition Research, 2009, 29(11): 784-793.

    [18] 樊丹君, 許國強(qiáng). 固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白與脂質(zhì)代謝的研究進(jìn)展[J].國際內(nèi)科學(xué)雜志, 2007, 34(3): 152-154.

    [19] ZIMMERMANN R, STRAUSS J G, HAEMMERLE G, et al. Fat mobilization in adipose tissue is promoted by adipose triglyceride lipase[J]. Science, 2004, 306: 1383-1386.

    [20] DESVERGNE B, WAHLI W. Peroxisome proliferator-activated receptors: nuclear control of metabolism[J]. Endocrine Reviews, 1999, 20(5): 649-688.

    [21] CHINETTI G, FRUCHART J C, STAELS B. Peroxisome proliferatoractivated receptors (PPARs): nuclear receptors at the crossroads between lipid metabolism and inflammation[J]. Inflammation Research, 2000, 49(10): 497-505.

    [22] DUVAL C, CHINETTI G, TROTTEIN F, et al. The role of PPARs in atherosclerosis[J]. Trends in Molecular Medicine, 2002, 8(9): 422-430.

    [23] SAHA A K, SCHWARSIN A J, RODUIT R, et al. Activation of malonyl-CoA decarboxylase in rat skeletal muscle by contraction and the AMP-activated protein kinase activator 5-aminoimidazole-4-carboxamide-1-beta-D-ribofuranoside[J]. Journal of Biological Chemistry, 2000, 275(32): 24279-24283.

    [24] RANEY M A, YEE A J, TODD M K, et al. AMPK activation is not critical in the regulation of muscle FA uptake and oxidation during low-intensity muscle contraction[J]. American Journal of Physiology-Endocrinology and Metabolism, 2005, 288(3): E592-598.

    [25] 郭曉紅, 吳立玲, 李麗. 脂聯(lián)素調(diào)節(jié)糖脂代謝相關(guān)信號通路的研究進(jìn)展[J]. 生理科學(xué)進(jìn)展, 2010, 41(6): 471-474.

    Effect and Mechanism of Garcinia cambogia Extract on Lipid Metabolism in Male Rats

    LIU Guanxing, HAN Ningning, MA Haitian*
    (Key Laboratory of Animal Physiology and Biochemistry, Ministry of Agriculture, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China)

    The aim of this study was to investigate the effect of Garcinia cambogia extract on lipid metabolism parameters and lipogenic gene mRNA expression in male rats. The results showed that dietary supplementation of Garcinia cambogia extract could significantly decrease serum triglyceride content in rats (P < 0.05). High dose of Garcinia cambogia extract could significantly reduce triglyceride content in the liver of rats (P < 0.05). No significantly difference was observed in total cholesterol content in serum and liver tissue between Garcinia cambogia extract treatment groups and the control group (P > 0.05). The expression of genes associated with lipid metabolism showed that high-dose Garcinia cambogia extract treatment could significantly inhibit the mRNA expression levels of SREBP1c (P < 0.01) and ACL (P < 0.05),while it could significantly increase the mRNA expression levels of ACO and ATGL (P < 0.05). PPARα and MCD mRNA expression levels were higher in the middle- (P < 0.05) and high-dose Garcinia cambogia extract treatment groups (P < 0.01) than that in the control group. High-dose Garcinia cambogia extract treatment could significantly promote the AMPKα1 and AdipoR-1 mRNA expression levels (P < 0.05), while having no effect on the adiponectin mRNA expression level (P > 0.05). In conclusion, Garcinia cambogia extract can reduce the accumulation of body fat in rats due to the activation of Adipo-AMPK signaling pathway, which can inhibit gene expression related to fatty acid synthesis and increase gene expression related to fatty acid oxidation in the liver of rats.

    Garcinia cambogia extract; hydroxycitric acid; lipid metabolism; adenosine 5’-monophosphate (AMP)-activated protein kinase

    Q493.2

    A

    1002-6630(2015)09-0202-07

    10.7506/spkx1002-6630-201509038

    2014-10-14

    劉冠星(1988—),女,碩士研究生,研究方向?yàn)閯?dòng)物機(jī)能生物化學(xué)。E-mail:2012107015@njau.edu.cn

    *通信作者:馬海田(1974—),男,教授,博士,研究方向?yàn)闋I養(yǎng)生物化學(xué)。E-mail:mahaitian@njau.edu.cn

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