• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    電動微分離技術(shù)的研究進展

    2015-11-03 07:22:57陳長功等
    分析化學(xué) 2015年10期
    關(guān)鍵詞:綜述

    陳長功等

    摘 要 電動微分離技術(shù)是一門近年來快速發(fā)展的技術(shù),主要包括毛細(xì)管電泳(Capillary electrophoresis, CE)和毛細(xì)管電色譜(Capillary electrochromatography, CEC)。該技術(shù)憑借高效、快速、環(huán)境友好等特點獲得了廣泛的關(guān)注。早期電動微分離技術(shù)存在重現(xiàn)性差、定量受限及聯(lián)用檢測器類型有限等缺點,發(fā)展緩慢。針對這些問題,多種形式的儀器結(jié)構(gòu)改造及新型檢測器的研發(fā)成為電動微分離技術(shù)的研究趨勢。本文主要就近年來電動微分離技術(shù)在儀器結(jié)構(gòu)改造及檢測器研發(fā)方面進行了系統(tǒng)綜述,希望能夠為電動微分離技術(shù)的使用提供一定的指導(dǎo)。

    關(guān)鍵詞 電動微分離技術(shù); 定量毛細(xì)管電泳; 加壓毛細(xì)管電色譜; 綜述

    1 引 言

    近年來,隨著社會的發(fā)展和進步,食品藥品質(zhì)量控制及環(huán)境監(jiān)控的要求不斷提高,對微流試劑和低毒試劑技術(shù)來替代傳統(tǒng)的需要消耗大量試劑的分析技術(shù)的需求更加迫切[1,2]。同時,隨著生命科學(xué)在全球的興起,樣品的貴重化和微量化也顯得尤為突出,現(xiàn)有的很多分析手段已經(jīng)無法滿足科技工作者對痕量樣品的高效、快速的分析要求,需要具有更高分辨率、更快分離速度和更高靈敏度的分析技術(shù)及儀器[3]。因此,發(fā)展更加高效環(huán)保的微分離技術(shù)便成為大趨勢[4]。電動微分離技術(shù),如毛細(xì)管電泳(Capillary electrophoresis, CE)和毛細(xì)管電色譜(Capillary electrochromatography, CEC)技術(shù)等,引起了人們越來越多的關(guān)注[5~7]。這類技術(shù)具有高效、快速及環(huán)境友好等優(yōu)勢,但由于傳統(tǒng)電動微分離技術(shù)存在重現(xiàn)性差、定量受限及聯(lián)用檢測器類型有限等缺點,它們的應(yīng)用領(lǐng)域及應(yīng)用范圍受到了很大的限制。近年來,為了提高和拓展這類電動微分離技術(shù)的性能及應(yīng)用范圍,科研工作者投入了大量的精力對儀器結(jié)構(gòu)進行了改造并開發(fā)了多種新型檢測器。

    本文將針對近年來電動微分離技術(shù)在儀器結(jié)構(gòu)改造及檢測器開發(fā)進行系統(tǒng)綜述,期望能夠為電動微分離技術(shù)的使用及發(fā)展提供指導(dǎo)。

    2 儀器結(jié)構(gòu)改進

    傳統(tǒng)的電動微分離儀器主要由進樣裝置、微流溶劑輸送裝置、微流控制裝置、高壓電源、毛細(xì)管柱、檢測器等組成,各個部件均需要通過不斷地優(yōu)化和改進,才能使得電動微分離技術(shù)呈現(xiàn)出高柱效、高分辨率、高選擇性及快速分離的優(yōu)勢。近年來,為了進一步提高微電動分離技術(shù)的穩(wěn)定性、精密度、靈敏度和實用性,新型高精度定量進樣裝置、自動進樣裝置、微流控制方式以及毛細(xì)管柱控溫系統(tǒng)的研發(fā)都獲得了長足進展。

    2.1 全自動高精度定量毛細(xì)管電泳

    CE僅依靠電滲流(Electroosmotic flow, EOF)的驅(qū)動來進行離子型物質(zhì)的分離,中性物質(zhì)無法得到分離。而且傳統(tǒng)的“蘸取式”進樣方法無法進行定量分析。閆超等[8]研制了全自動高精度定量毛細(xì)管電泳儀(Quantitative capillary electrophoresis, qCE),結(jié)構(gòu)如圖1。該設(shè)備既能和UV聯(lián)用,也能與LIF等檢測器聯(lián)用, 并具有如下優(yōu)點:(1) 自動進樣器通過10 nL的定量閥實現(xiàn)系統(tǒng)的準(zhǔn)確定量,與液流分配系統(tǒng)的協(xié)作運行實現(xiàn)了該系統(tǒng)從取樣、進樣、沖洗管路以及毛細(xì)管預(yù)處理等過程的全面自動化。自動進樣過程也極大地提高了分析時間的重現(xiàn)性。(2) 自主研制的柱溫箱,可實現(xiàn)4℃~40℃范圍的控溫。有效降低了焦耳熱的影響,改善該系統(tǒng)的定量重復(fù)性和分離效率。(3) 成功引入電隔離槽裝置,將定量閥隔離于電場之外,提高了系統(tǒng)的安全性、可靠性和穩(wěn)定性。并用該系統(tǒng)進行了胞嘧啶、脫氧尿苷、腺苷、尿嘧啶、尿苷及肌苷這6種核苷及堿基類物質(zhì)的分析,保留時間的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)<0.6%,峰面積的RSD在0.5%~3%之間,表明該系統(tǒng)改善了傳統(tǒng)電泳的痼疾,定性和定量分析重復(fù)性可達到FDA的要求,分析結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

    2.2 加壓毛細(xì)管電色譜

    毛細(xì)管電色譜(CEC)是依靠電滲流(Electroosmotic flow, EOF) 的推動力和兩相間分配系數(shù)的不同分離極性和中性物質(zhì),但在分析過程中容易發(fā)生干柱和氣泡現(xiàn)象。為了克服傳統(tǒng)CEC的缺陷,引入了液相色譜溶劑輸送模塊,提出了加壓毛細(xì)管電色譜(Pressurized capillary electrochromatography, pCEC)的概念。pCEC采用了壓力流和電滲流的雙驅(qū)動,柱效介于HPLC和CEC之間[9]。Yan 等推出了TriSepTM-2000系統(tǒng),實現(xiàn)了pCEC與紫外檢測器的聯(lián)用,它通過兩個微流泵來輸送溶液并且經(jīng)過混合閥混合,在毛細(xì)管色譜柱進樣端提供一定的壓力,二元微流泵系統(tǒng)可由程序來控制其中兩種流動相的混合比例,完成溶劑的梯度洗脫。整個系統(tǒng)由于有壓力和電壓兩個參數(shù)共同作用來調(diào)節(jié)分離,拓寬了它的分離能力和應(yīng)用范圍,使其能被用在分析復(fù)雜樣品的領(lǐng)域。

    最近,該研究組又推出了一款新型Trisep-2100 pCEC 系統(tǒng)(圖2),其對高效微流電色譜體系進行了柱溫箱、四通的優(yōu)化及納升級旋轉(zhuǎn)進樣閥的使用,進一步提升了pCEC進樣的準(zhǔn)確度。采用該系統(tǒng)進行了植物油中沒食子酸丙酯、叔丁基對苯二酚、丁基羥基茴香醚、二叔丁基對甲酚4種抗氧劑的測定[10],8 min實現(xiàn)分離,樣品的加標(biāo)回收率在93.5%~108.0%之間,RSD為0.3%~1.3%,結(jié)果穩(wěn)定可靠。

    3 聯(lián)用檢測器的研究進展

    近年來,各類電動微分離技術(shù)憑借高效、快速、溶劑及樣品消耗少等優(yōu)勢獲得了廣泛的關(guān)注和發(fā)展,但是其本身固有的一些不足,如毛細(xì)管色譜柱內(nèi)徑窄小、檢測靈敏度低、樣品檢測種類受限等,使得研制開發(fā)新型高效的各類檢測器成為必然的發(fā)展趨勢。據(jù)統(tǒng)計,目前已發(fā)展的電動微分離儀器聯(lián)用檢測器主要包括:紫外-可見吸收檢測器(UV/Vis)、激光誘導(dǎo)熒光檢測器(LIF)、電化學(xué)檢測器(ECD)、化學(xué)發(fā)光檢測器(CL)、與核磁共振儀(NMR)聯(lián)用、與質(zhì)譜儀(MS)聯(lián)用、微型蒸發(fā)光檢測器(μELSD)等。下面將分類進行介紹:

    3.1 紫外-可見吸收檢測器 (Ultraviolet/ visible absorption detector, UV/Vis)

    UV/Vis吸收檢測器結(jié)構(gòu)簡單,靈敏度高、噪音低、線性范圍寬,具有很好的適用性,是電動微分離技術(shù)最常用的一種檢測器。但UV/Vis只適合具有紫外或可見光吸收基團的物質(zhì),對紫外吸收差的化合物靈敏度低,檢出限一般為106 mol/L。UV/Vis檢測器滿足不了痕量分析的要求。為了提高電動微分離技術(shù)的檢測靈敏度,可以采用優(yōu)化檢測波長、直接激光誘導(dǎo)熒光柱上檢測、紫外光催化觸發(fā)化學(xué)反應(yīng)檢測[11,12]等手段。

    3.2 激光誘導(dǎo)熒光檢測器(Laser induced fluorescence detector, LIF)

    LIF檢測器最早于上世紀(jì)70年代提出,是目前檢測靈敏度最高的一種檢測器,在超痕量檢測和快速分離中具有顯著優(yōu)勢。1995年,Yan等[13]首次將CEC與LIF聯(lián)用,使用257 nm的氬離子激光源,快速分離測定了16種痕量多環(huán)芳烴,柱效高達6×105塔板數(shù)/m。Rebscher 等[14]考察了“柱上”與“在柱”兩種不同方式,前者在檢出限和區(qū)帶寬度效果要優(yōu)于后者。雖然經(jīng)歷了半個多世紀(jì)的發(fā)展,激光波長的選擇和檢測窗口校準(zhǔn)等方面的仍有很大的局限,這在一定程度上限制了LIF檢測器的應(yīng)用范圍。為了解決這個問題,閆超等[15]又研制了一種可變波長的新型LIF檢測器(圖3),有4個波長(375, 473, 561和638 nm)可供選擇。利用半導(dǎo)體光纖激光器,設(shè)計了一種激光準(zhǔn)直及位置可視化校準(zhǔn)裝置,實現(xiàn)了激光源位置、二向色鏡和濾光片組的方便更換,提高了新型LIF檢測器的重復(fù)性和安全性,大大拓展了其應(yīng)用范圍。結(jié)合這種新型可變波長LIF檢測器,采用pCEC系統(tǒng),成功實現(xiàn)了花生醬樣品中4種黃曲霉毒素的分離檢測,驗證了這種可變波長LIF檢測器的實用性及可靠性[16]。

    與紫外檢測器相比,LIF檢測器的適用范圍較窄; 影響分析靈敏度的因素較多,例如熒光淬滅、背景熒光等。

    3.3 電化學(xué)檢測器 (Electrochemical detector, ECD)

    ECD檢測器的原理是化合物被氧化或還原能產(chǎn)生正比于待測化合物濃度的電流,一般在特殊情況下使用,主要用于測定化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定的離子,通常只有容易氧化或還原的電活性物質(zhì)才可被檢測,有高含量的氯化物、硫酸鹽共存時,其它離子的檢測也不受干擾,選擇性非常高。而且還是一類靈敏度較高的檢測器。檢出限可達pg~ng 級,適合復(fù)雜體系(如體液、神經(jīng)遞質(zhì)、組織勻漿等)的電活性物質(zhì)的檢測。安培檢測器 (Amperometric detector, AD) 是基于在電極表面上發(fā)生氧化或還原反應(yīng)產(chǎn)生電流響應(yīng)與其電活性物質(zhì)濃度成比例而建立的, AD 是與CEC聯(lián)用中最常使用的檢測器。根據(jù)有無隔離電場,分為離柱和在柱檢測兩種方式。Abdelhader等[17]首次進行了 CEC-AD 聯(lián)用實驗。Liu 等[18]構(gòu)建了柱端式 pCEC-ED 系統(tǒng),研制了自對準(zhǔn)式電化學(xué)檢測池,能自動實現(xiàn)電極和毛細(xì)管出口的對準(zhǔn)操作,極大地提高了實驗效率和重現(xiàn)性。Liu等[19]開發(fā)了一種 pCEC 在柱末端與 AD 相連接,在7 min內(nèi)可以快速高效的分離辣椒中添加的4種蘇丹紅染料。通過對系統(tǒng)進行改進,分離出雞蛋和牛奶等樣品中的5種酚類雌激素、氯酚、苯酚[20,21]。Li 等[22]進行了聯(lián)吡啶釕電化學(xué)電極聯(lián)用,在 pH 3.5~7.0范圍內(nèi),可使脯氨酸、腐胺、精胺、亞精胺達到基線分離,檢出限均低于2.0 μmol/L。Lin 等[23]開發(fā)了 pCEC 與化學(xué)發(fā)光檢測器柱上聯(lián)用,通過在堿性溶液中魯米諾與過氧化氫在電極上形成的Cu2+-氨基酸絡(luò)合物的增強效應(yīng)來進行氨基酸的分離,可使L-組氨酸、L-蘇氨酸、L-絡(luò)氨酸達到基線分離。Thanh 等[24]進行了 CEC-柱上非接觸電導(dǎo)檢測器聯(lián)用進行非 UV 吸收樣品的檢測和定性工作,可在10 min內(nèi)分離12種氨基酸。

    安培檢測器的靈敏度高,檢出限可達10~1012 g; 線性范圍較寬,一般為104~105。但是其選擇性受到限制,通常只對電活性物質(zhì)有響應(yīng);對流動相的溫度、速度、pH 值等因素的變化比較敏感,其中溶解的氧會干擾測定;使用中,電極需經(jīng)常清洗和更換。

    3.4 化學(xué)發(fā)光檢測器(Chemiluminescence detector, CL)

    CL檢測器的光學(xué)系統(tǒng)由反應(yīng)池、檢測器和讀數(shù)裝置3部分組成,結(jié)果簡單,無需外加光源和分光系統(tǒng),背景噪聲低,避免了雜散光和光源不穩(wěn)定性的影響,因而具有很高的檢測靈敏度(10~10-10 mol/L)?;瘜W(xué)發(fā)光檢測器具有“化學(xué)窄帶”效應(yīng),即在樣品充分?jǐn)U散到本底溶液前就已產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光信號,適合于小體積在線快速檢測,不會造成明顯的區(qū)帶展寬。但CL選擇性較差,為了得到理想的分離效果和靈敏度及獲得穩(wěn)定的分析體系,需首先考察待測物和CL 試劑的混合模式以及檢測體積,其次是用于分離的緩沖液與CL 試劑 pH 值的兼容性及混合流體的穩(wěn)定性。一般首選柱后混合模式,因其能確保分離后組分在檢測區(qū)域仍能保持較好的分離環(huán)境。柱后流體混合接口裝置可分為合并流式、同軸流式、和貯液池式等。根據(jù)檢測區(qū)與分離電壓提供區(qū)是否隔離,接口裝置又可分為在柱式、離柱式和柱端式等。Lin 等[25]設(shè)計了離柱同軸流式的 μHPLC/pCEC-CL 系統(tǒng),通過分離魯米諾和 N-4-氨基丁基-N-乙基異魯米諾,結(jié)果表明, 由于“化學(xué)窄帶”效應(yīng),離柱同軸流式 CL 檢測接口對組分區(qū)帶展寬的影響可以忽略。此外,與在柱或離柱式檢測接口相比,柱端式檢測池具有結(jié)構(gòu)簡單、便于操作等優(yōu)點,尤其柱后無需引入 CL 試劑,解決了因柱后 CL 試劑流速不穩(wěn)而導(dǎo)致體系穩(wěn)定性和重現(xiàn)性下降等問題。但是,柱端式檢測池發(fā)光反應(yīng)時間不足10 s,光背景高,檢測結(jié)果的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性差;可被利用的發(fā)光試劑較少。

    3.5 與核磁共振儀(Nuclear magnetic resonance detector, NMR)聯(lián)用

    NMR是化合物結(jié)構(gòu)鑒定的強有力的工具。Pusecker 等[26]設(shè)計了一套 CEC-NMR 系統(tǒng),利用該系統(tǒng)測定了連續(xù)流和停流模式下含有對乙酰氨基酚尿液的 1D 1H NMR 和2D 1H-1H TOCSY 數(shù)據(jù)。Klaus 等[27]設(shè)計了可與CE、CEC等聯(lián)用的接口裝置,采用連續(xù)流和停流兩種模式,尤其是停留模式可以有效避免信號峰的重疊,提高分辨率,實現(xiàn)了異構(gòu)體、同系物組分的分離與鑒定。Petra 等[28]設(shè)計了一種僅施加電壓于分離柱的縮短分析時間的聯(lián)用裝置。

    3.6 與質(zhì)譜儀(Mass spectrometry,MS)聯(lián)用

    MS是一種選擇性高、應(yīng)用面廣的檢測器,具有靈敏度高、準(zhǔn)確性高等特點,而且有較強的定性能力。根據(jù)離子化操作模式的不同,離子源可分為大氣壓化學(xué)離子源(Atmospheric pressure chemical ionization, APCI)、連續(xù)流動快速原子轟擊源(Continuous flow fast atom bombardment, CFFAB)、電噴霧離子源(Electrospray ionization, ESI)等。

    將 CEC柱效高、樣品試劑用量少等特點與 MS 能提供精確分子量和結(jié)構(gòu)信息、靈敏度高以及專屬性強等功能相結(jié)合,接口技術(shù)是關(guān)鍵,目前有在線聯(lián)用和離線聯(lián)用兩種模式。CEC-MS離線聯(lián)用的關(guān)鍵是對已分離樣品的有效收集,并不涉及真正意義上的聯(lián)用接口技術(shù)。與離線聯(lián)用相比,CEC-MS在線聯(lián)用具有樣品損失少、自動化程度高、分析速度快等優(yōu)點,其應(yīng)用要比離線聯(lián)用廣泛。CEC-MS 在線聯(lián)用需要設(shè)計合適的接口,能夠?qū)⒁逊蛛x的樣品全部轉(zhuǎn)移到質(zhì)譜儀中,同時實現(xiàn)樣品快速高效的離子化。下面對 CEC-MS聯(lián)用進行介紹。

    CFFAB-MS提供了一種液相分離與 FAB-MS 相連的方式。在首個 CEC和CFFAB-MS相連的離子源中,同軸 CFFAB 探針適合納流分離[29~31]。CEC-CFFAB-MS 接口的主要優(yōu)勢是能夠以高靈敏度和低檢出限分離和檢測不同極性分子的 \[M+H\]+或 \[M-H\] 離子,劣勢是化學(xué)背景較高,特別是在m/z<400的情況下。

    與 ESI 相比,APCI 離子化效率高,樣品分子在ESI 中的絕對離子化效率只有0.01%~0.1%,而 APCI 離子化的起始離子化效率幾乎是100%。但是,現(xiàn)實中由于制備 CEC-APCI-MS 相連的毛細(xì)管重現(xiàn)性差,造成 CEC-APCI-MS 接口應(yīng)用較少。Norton 等[32]設(shè)計了在線聯(lián)用的 CEC-ESI-MS 和 CEC-APCI-MS,并用于甜菜堿型和兩性離子表面活性劑的分析。與ESI相比,APCI 的檢出限更低,相差3個數(shù)量級。Cheng 等[33]利用CEC-APCI-MS裝置,通過簡單進樣和在線富集測定海產(chǎn)品中16種多環(huán)芳烴,檢出限均低于50 ng/g。CEC-ESI-MS 接口有3種:(1)無鞘流接口;(2)同軸鞘流接口;(3)液接接口。無鞘流接口中不使用鞘流液,通過噴霧毛細(xì)管的尖端鍍金屬來形成電接觸。直接電極接口也是一種特殊類型的無鞘流接口,將金導(dǎo)線放置在毛細(xì)管出口處來實現(xiàn)電接觸,這種類型的接口克服了鞘流接口的區(qū)帶稀釋問題[34,35]。由于難以改變離子化程度來增加 ESI-MS 的靈敏度和尖端鍍金處的不穩(wěn)定型,非鞘流接口通常用于低流速離子源或納噴源。鞘流接口技術(shù)[36]優(yōu)點在于通過提高樣品流速使得噴霧更加穩(wěn)定,有利于形成穩(wěn)定的電流回路,同時可改變 CEC 運行緩沖液的組成,使其滿足 ESI 源的檢測要求,但靈敏度和重現(xiàn)性比較差。另外鞘液的引入會稀釋樣品,使檢測靈敏度下降。Masaru等[37]應(yīng)用同軸 CEC-ESI-MS分析了肝細(xì)胞癌中帶電和電中性物質(zhì),檢出33個峰,鑒定了18種化合物。液接接口利用三通建立電接觸并為緩沖液提供額外的液流,毛細(xì)管色譜柱和噴針處于三通中相對的位置。D′Orazio等[38]運用液接納流 ESI 接口搭建了 CEC-ESI-MS 平臺用于分析殺蟲劑和藥物異構(gòu)體。他們又設(shè)計了一種 T 形聚合物的 CEC 與 MS 的壓力微流接口[39],該接口價格低,尺寸小,易于使用。Simpson 等[40]構(gòu)建了CEC 與離子阱 TOF-MS 相連的兩步激光 MS 接口,塔板數(shù)平均可達到每米94000,萘的檢出限為500 nmol/L。

    閆超等[41]設(shè)計了pCEC-ESI-MS聯(lián)用系統(tǒng)包括二元梯度微流液相泵、六通進樣閥、四通分流閥、±18 kV高壓電源,以及毛細(xì)管流通池支架。樣品被注入到一個外部的進樣環(huán),然后隨流動相流經(jīng)四通閥,經(jīng)四通閥分流后,樣品隨流動相進入毛細(xì)管柱。毛細(xì)管柱的入口端連接到四通閥的一個接口,可以施加正電壓或負(fù)電壓,而柱末端通過零死體積的不銹鋼兩通連接到質(zhì)譜的電噴霧源,并通過該不銹鋼兩通接地。為了避免高電壓對液相泵的影響,兩個泵頭也通過導(dǎo)線接地。結(jié)構(gòu)見圖4。Wu 等[42]運用該裝置進行了肺癌尿液代謝組學(xué)研究,pCEC獨特的分離機制使得該系統(tǒng)獲得了很高的分離效率,并鑒定了一些特殊的代謝產(chǎn)物,如可將谷氨酰胺結(jié)合物的質(zhì)譜碎片峰和共流出峰區(qū)分開。結(jié)果表明,pCEC-ESI-MS方法將會在未來的代謝組學(xué)研究中發(fā)揮重要作用。

    3.7 蒸發(fā)光散射檢測器(Evaporative light-scattering detector, ELSD)

    ELSD檢測器是一種通用型質(zhì)量檢測器,主要基于將色譜柱洗脫液霧化形成氣溶膠,然后在加熱的漂移管中將溶劑蒸發(fā),剩余不揮發(fā)性溶質(zhì)顆粒在光散射檢測池中得到檢測。ELSD具有很高的通用性,不受檢測物質(zhì)本身結(jié)構(gòu)的限制,適用于絕大多數(shù)不揮發(fā)和半揮發(fā)物質(zhì)的分析檢測,尤其適用于氨基酸、糖類、脂類等化合物的分析。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn),ELSD檢測器對峰展寬的影響很小,因此非常適用于微分離技術(shù)。周文莉等[43]自主開發(fā)研制了一種微型ELSD檢測器(μELSD)(圖5),對常規(guī)ELSD的霧化、蒸發(fā)及檢測部分進行了整體微型化設(shè)計,可以實現(xiàn)與電動微分離技術(shù)的聯(lián)用,分離檢測了3種常見甜味劑,體現(xiàn)了分析時間短、溶劑消耗量少、樣品需求量小的優(yōu)點。利用pCEC-μELSD聯(lián)用技術(shù)測定了川貝枇杷糖漿中桔梗皂苷D、貝母辛、齊墩果酸、西貝素、貝母甲素和貝母乙素6種有效成分的含量,線性范圍達4個數(shù)量級,檢出限達 pg 級,該裝置簡便、快速、可靠,方法精密度、重復(fù)性和穩(wěn)定性良好。高紅秀等[44]利用此pCEC-μELSD聯(lián)用系統(tǒng),測定了中藥提取物注射用血塞通(凍干)中的5種皂苷類化合物,并對其流動相體系、梯度洗脫條件、霧化載氣流速、蒸發(fā)溫度及施加電壓等參數(shù)進行了優(yōu)化,考察了系統(tǒng)的實用性和穩(wěn)定性。

    ELSD檢測器是通用的質(zhì)量檢測器,響應(yīng)值與化合物粒子的大小、形狀和質(zhì)量有關(guān);溶劑的揮發(fā)消除了前溶劑峰的干擾,可進行梯度洗脫,基線平穩(wěn),分析時間短;與紫外檢測器相比,檢測范圍寬。其缺點是流動相須采用易揮發(fā)的溶劑;使用揮發(fā)性的緩沖溶液的濃度不宜過高。

    4 展 望

    隨著基因組學(xué)、代謝組學(xué)、蛋白組學(xué)的飛速發(fā)展,樣品日益復(fù)雜化和微量化,對分析儀器提出了更高的要求。高效的微流電動分離儀器,如qCE和pCEC,以其優(yōu)越的性能可以實現(xiàn)快速、穩(wěn)定、高效的分離,滿足當(dāng)前復(fù)雜和微量化樣品的分析需求;其次是各種檢測儀的配備,是適應(yīng)不同類型樣品分離的關(guān)鍵。如LIF適用于痕量樣品,ELSD具有通用性,而質(zhì)譜儀可以給出分子量和結(jié)構(gòu)信息,具有極強的定性能力。總之,高效的微流電動分離儀器和各種不同檢測儀的聯(lián)用將為科技工作者提供一種全新的手段,也為未來生物醫(yī)藥、生命科學(xué)、食品安全和環(huán)境保護等領(lǐng)域的發(fā)展提供有力的保障。

    References

    1 Miguel D I G. Trends Anal. Chem., 2010, 29(7): 577

    2 Javier M, Salvador G, Miguel D I G. Trends Anal. Chem., 2010, 29(7): 578-591

    3 Hai Y X, You Z H. Trends Anal. Chem., 2010, 29(7): 629-635

    4 Yan C. Contemporary Microscale Separation Technology. New York: HNB Publishing, 2013

    5 Acevska J, Stefkov G, Petkovska R. Anal. Bioanal. Chem., 2012, 403(4): 1117-1129

    6 Aturki Z, D′Orazio G, Rocco A, Fanali S. Electrophoresis, 2011, 32(9): 2602-2608

    7 Zhao J, Hu D J, Lao K, Yang Z M, Li S P. Electrophoresis, 2014, 35(1): 205-224

    8 YAN Chao, YAO Dong, XU Yuan, LING Bang-Zan. China Patent, CN 201420538174, 2014

    閻 超, 姚 冬, 徐 媛, 凌邦瓚. 中國專利, CN201420538174, 2014

    9 Dorothee W, Karin C, Volker S. Electrophoresis, 2001, 22(12): 2600-2605

    10 WANG Xiao-Xi, WANG Yan, LI Jing, RU Xin YAN Chao. Science and Technology of Food Industry, 2015, 36(9): 273-277

    王曉曦, 王 彥, 李 靜, 茹 鑫, 閆 超. 食品工業(yè)科技, 2015, 36(9): 273-277

    11 Emily F H, Andreas J Z, Miroslav M, Paul R H. Electrophoresis, 2001, 22(7): 1273-1281

    12 Chena X J, Zhao J, Meng Q, Li S P, Wang Y T. J. Chromatogr. A, 2009, 1216(43): 7329-7335

    13 Yan C, Dadoo R, Zhao H. Anal. Chem., 1995, 67(13): 2026-2029

    14 Rebscher H, PyellU. J. Chromatogr. A, 1996, 737(2): 171-180

    15 YAN Chao, RU Xin, WAN Qing-Yun, WANG Yu-Hong, YAO Fan, YAO Dong. China Patent CN104483297A, 2014

    閻 超, 茹 鑫, 萬青云, 王玉紅, 姚 凡, 姚 冬. 中國專利, CN104483297A, 2014

    16 WAN Qing-Yun, RU Xin, WANG Xiao-Xi, WANG Yan, YAN Chao. Chinese J. Anal. Chem., 2015, 43(7): 1063-1068

    萬青云, 茹 鑫, 王曉曦, 王 彥, 閆 超. 分析化學(xué), 2015, 43(7) : 1063-1068

    17 Abdelkader H, John H T L. Electrophoresis, 2000, 21(7): 1395-1404

    18 Liu S F, Wu X P, Xie Z H, Lin X C, Guo L Q, Yan C, Chen G N. Electrophoresis, 2005, 26(12)2342-2350

    19 Liu S F, Zhang X, Lin X C Wu X P, Fu F F, Xie Z H. Electrophoresis, 2007, 28(11): 1696-1703

    20 Wu M W, YuanX W, Wu X H, Lin X C, Xie Z H. Electrophoresis, 2010, 31(6): 1011-1018

    21 Lu L X, Chen Y K, Yu X W, Wu X H, Tang F X, Wu X P. Electrophoresis, 2013, 34(14): 2049-2057

    22 Li H J, Liu X Q, Niu W X, Zhu S Y, Fan L S, Shi L H, Xu G B. Electrophoresis, 2008, 29(22): 4475-4481

    23 Lin Z, Xie Z H, Lu H X, Lin X C, Wu X P, Chen G N. Anal. Chem., 2006, 78(15): 5322-5328

    24 Thanh D M, Hung V P, Peter C H. Anal. Chim. Acta., 2009, 653(2): 228-233

    25 Lin Z, Lin J, Wu X P, Lin X C, Xie Z H. Electrophoresis, 2008, 29(2): 401-409

    26 Pusecker K, Schewitz J, Gfrorer P, Tseng L H, Albert K. Anal. Commun., 1998, 35(7): 213-215

    27 Klaus P, Jens S, Petra G, Li H T, Klaus A, Ernst B. Anal. Chem., 1998, 70(15): 3280-3285

    28 Petra G, Li-H T, Erdmann R, Klaus A, Ernst B. Anal. Chem., 2001, 73(14): 3234-3239

    29 Deterding L J, Moseley M A, Tomer K B, Jorgenson J W. Anal. Chem., 1989, 61(22): 2504-2511

    30 Moseley M A, Deterding L J, Tomer K B, Jorgenson J W. J. Chromatogr. A , 1989, 480: 197- 209

    31 Moseley M A, Deterding L J, Tomer K B, Jorgenson J W. Anal. Chem., 1991, 63(141): 467-1473

    32 Norton D, Zheng J, Danielson N D, Shamsi S A. Anal. Chem., 2005, 77(21): 6874-6886.

    33 Cheng Y J, Huang S H, Chiu J Y, Liu W L, Huang H Y. J. Chromatogr. A , 2013, 1313(SI): 132-138

    34 Lord G A, Gordon D B, Myers P, King B W. J. Chromatogr. A, 1997, 768(1): 9-16

    35 J. Fred Banks. Electrophoresis, 1997, 18(12-13)2: 255-2266

    36 Gargi C, Csaba H, Fred B. J. Chromatogr. A, 1998, 828(1-2): 469-480

    37 Masaru K, Yuko O, Masashi S, Masakuni D, Toshimasa T. J. Chromatogr. A, 2009, 1216(47): 8277-8282

    38 D′Orazio G, Fanali S. J. Chromatogr. A, 2010, 1217(25): 4079-4086

    39 D′Orazio G, Fanali S. J. Chromatogr. A, 2013, 1317(SI) : 67-76

    40 Simpson D C, Yates A J, Knox J H, Smith L. Int. J. Mass Spectrom., 2014, 363: 8-15

    41 YAN Chao, CHEN Chang-Gong, WANG Yan, GU Xue, WU Qian, YU Xin-Wei, PAN Zhe-Min, HOU Yu-Jie. China Patent, ZL20425422.9, 2014

    閆 超, 陳長功, 王彥, 谷 雪, 吳 謙, 余欣尉, 潘喆敏, 侯玉潔. 中國專利, ZL 2 0425422.9, 2014

    42 Wu Q, Yu X W, Wang Y, Gu X, Ma X Q, Lv W, Chen Z, Yan C. Electrophoresis, 2014, 35(17): 2470-2478

    43 ZHOU Wen-li, KAN Wen-bin, WANG Yu-hong, ZHANG Lin, WANG Yan, YAN Chao. Journal of Instrumental Analysis, 2015, 34(3): 321 -327

    周文莉, 闞文彬, 王玉紅, 張 琳, 王 彥, 閻 超. 分析測試學(xué)報, 2015, 34(3): 321-327

    44 GAO Hong-Xiu, ZHOU Wen-Li, WANG Yu-Hong, LI Peng, GU Xue, WANG Yan, LI Jing, YAN Chao. Chinese J. Anal. Chem., 2014, 42(5): 766-772

    高紅秀, 周文莉, 王玉紅, 李 鵬, 谷 雪, 王 彥, 閆 超. 分析化學(xué), 2014, 42(5): 766-772

    猜你喜歡
    綜述
    2021年國內(nèi)批評話語分析研究綜述
    認(rèn)知需要研究綜述
    氫能有軌電車應(yīng)用綜述
    高速磁浮車載運行控制系統(tǒng)綜述
    5G應(yīng)用及發(fā)展綜述
    電子制作(2019年10期)2019-06-17 11:45:16
    SEBS改性瀝青綜述
    石油瀝青(2018年6期)2018-12-29 12:07:04
    NBA新賽季綜述
    NBA特刊(2018年21期)2018-11-24 02:47:52
    深度學(xué)習(xí)認(rèn)知計算綜述
    JOURNAL OF FUNCTIONAL POLYMERS
    Progress of DNA-based Methods for Species Identification
    亚洲一码二码三码区别大吗| 99在线视频只有这里精品首页| 久久中文字幕人妻熟女| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 欧美精品亚洲一区二区| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 美女国产高潮福利片在线看| 波多野结衣高清无吗| 黄色成人免费大全| netflix在线观看网站| 精品国产乱子伦一区二区三区| 最新美女视频免费是黄的| 国产高清videossex| 很黄的视频免费| 国产极品粉嫩免费观看在线| 这个男人来自地球电影免费观看| 最近最新中文字幕大全免费视频| 色综合站精品国产| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 国产精品一区二区三区四区久久 | 亚洲九九香蕉| 国产亚洲精品久久久久5区| 视频区欧美日本亚洲| 国产黄a三级三级三级人| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 一进一出好大好爽视频| 日韩欧美三级三区| 亚洲国产看品久久| 成人三级黄色视频| 99国产极品粉嫩在线观看| 国产高清视频在线播放一区| 亚洲精品在线美女| 午夜激情av网站| 亚洲av五月六月丁香网| 国产精品1区2区在线观看.| 天天一区二区日本电影三级| 欧美乱码精品一区二区三区| 一级毛片精品| 亚洲精品av麻豆狂野| 99国产精品99久久久久| 亚洲 欧美一区二区三区| 中文字幕最新亚洲高清| 成熟少妇高潮喷水视频| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| e午夜精品久久久久久久| 午夜老司机福利片| 制服诱惑二区| 成人手机av| 午夜福利在线观看吧| 啪啪无遮挡十八禁网站| av超薄肉色丝袜交足视频| 日韩av在线大香蕉| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 亚洲五月婷婷丁香| 免费观看人在逋| 亚洲无线在线观看| 欧美激情极品国产一区二区三区| 亚洲国产欧洲综合997久久, | 国产精品 欧美亚洲| 高清在线国产一区| 级片在线观看| 91老司机精品| 中文字幕av电影在线播放| 国产成人精品久久二区二区免费| 中文字幕高清在线视频| 淫妇啪啪啪对白视频| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 高清在线国产一区| xxx96com| svipshipincom国产片| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 成人18禁在线播放| 男女那种视频在线观看| 国产高清videossex| 制服人妻中文乱码| 亚洲 欧美一区二区三区| 在线国产一区二区在线| 精品卡一卡二卡四卡免费| 国产熟女xx| 日韩精品中文字幕看吧| 国产精品一区二区精品视频观看| 午夜两性在线视频| 999精品在线视频| 午夜福利高清视频| 2021天堂中文幕一二区在线观 | 麻豆国产av国片精品| av福利片在线| 亚洲人成伊人成综合网2020| 久久草成人影院| 黄片播放在线免费| 99久久精品国产亚洲精品| 免费看日本二区| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 国产片内射在线| 午夜久久久久精精品| 欧美最黄视频在线播放免费| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 久久 成人 亚洲| 国产精品乱码一区二三区的特点| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 久热爱精品视频在线9| 妹子高潮喷水视频| 亚洲 国产 在线| 99re在线观看精品视频| 亚洲精品色激情综合| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 91av网站免费观看| a级毛片在线看网站| 俺也久久电影网| 精品一区二区三区四区五区乱码| 狂野欧美激情性xxxx| 亚洲天堂国产精品一区在线| 免费观看精品视频网站| 精品高清国产在线一区| 国产成人精品久久二区二区免费| 欧美乱码精品一区二区三区| 色老头精品视频在线观看| 精品国产亚洲在线| 国产精品综合久久久久久久免费| 最好的美女福利视频网| 色综合亚洲欧美另类图片| 亚洲男人天堂网一区| 视频区欧美日本亚洲| 丝袜美腿诱惑在线| 日韩av在线大香蕉| 国产亚洲av嫩草精品影院| 亚洲成a人片在线一区二区| 亚洲国产精品久久男人天堂| 欧美中文综合在线视频| 午夜久久久久精精品| 亚洲中文日韩欧美视频| 手机成人av网站| 亚洲精品中文字幕在线视频| 午夜福利在线在线| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | 国产成人欧美| 亚洲第一av免费看| 国产黄a三级三级三级人| 国产亚洲精品久久久久5区| 亚洲五月天丁香| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 免费在线观看亚洲国产| 亚洲男人的天堂狠狠| 怎么达到女性高潮| 91在线观看av| 免费无遮挡裸体视频| 久久精品91蜜桃| 日韩欧美 国产精品| 亚洲精品一区av在线观看| av欧美777| 波多野结衣高清作品| 精品国产乱码久久久久久男人| 久久精品国产亚洲av高清一级| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 99国产精品99久久久久| 亚洲精品粉嫩美女一区| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 欧美激情高清一区二区三区| 18美女黄网站色大片免费观看| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 制服人妻中文乱码| 亚洲av成人一区二区三| 国产精品国产高清国产av| 亚洲电影在线观看av| 午夜影院日韩av| 88av欧美| 黄频高清免费视频| 久久性视频一级片| 99热6这里只有精品| 婷婷丁香在线五月| 久久久久久久久免费视频了| 91九色精品人成在线观看| 久久国产精品影院| av中文乱码字幕在线| 国产av一区二区精品久久| 亚洲精品色激情综合| 久久久国产精品麻豆| 国产精品 国内视频| 午夜激情福利司机影院| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 人人妻人人看人人澡| 欧美精品亚洲一区二区| 国产成人欧美| 精华霜和精华液先用哪个| 色综合亚洲欧美另类图片| 国产精品爽爽va在线观看网站 | tocl精华| 精品欧美一区二区三区在线| 免费在线观看日本一区| www日本在线高清视频| 亚洲电影在线观看av| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 草草在线视频免费看| 美女高潮到喷水免费观看| 又大又爽又粗| 精品欧美一区二区三区在线| 怎么达到女性高潮| 亚洲成人免费电影在线观看| 国产精品综合久久久久久久免费| 亚洲 国产 在线| 嫩草影视91久久| 欧美日韩黄片免| 一进一出抽搐gif免费好疼| 久热这里只有精品99| 久久精品国产亚洲av高清一级| 午夜激情福利司机影院| 观看免费一级毛片| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 欧美亚洲日本最大视频资源| 日韩欧美一区视频在线观看| 亚洲人成77777在线视频| 男人操女人黄网站| 国产精品 欧美亚洲| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 欧美乱码精品一区二区三区| 动漫黄色视频在线观看| 在线观看一区二区三区| 久久久水蜜桃国产精品网| cao死你这个sao货| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 中文字幕久久专区| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 日韩欧美一区二区三区在线观看| а√天堂www在线а√下载| 人人妻人人澡人人看| 日韩欧美国产在线观看| 亚洲最大成人中文| 男女午夜视频在线观看| 亚洲中文av在线| 嫁个100分男人电影在线观看| 亚洲av电影不卡..在线观看| 久久久久久久久中文| 丝袜在线中文字幕| 国产精品,欧美在线| 久久亚洲真实| 桃色一区二区三区在线观看| 成人欧美大片| 欧美成人午夜精品| 午夜a级毛片| 欧美日韩乱码在线| 操出白浆在线播放| 观看免费一级毛片| 国产视频一区二区在线看| 美女午夜性视频免费| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 亚洲人成电影免费在线| 91老司机精品| 自线自在国产av| 在线天堂中文资源库| 禁无遮挡网站| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 国产精品野战在线观看| 国产午夜福利久久久久久| 欧美黑人精品巨大| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 88av欧美| 免费看十八禁软件| 人妻久久中文字幕网| 在线观看舔阴道视频| 动漫黄色视频在线观看| 久久天堂一区二区三区四区| 满18在线观看网站| 热99re8久久精品国产| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 熟女电影av网| 欧美黑人精品巨大| 欧美zozozo另类| 制服人妻中文乱码| 久久国产亚洲av麻豆专区| 妹子高潮喷水视频| 一二三四社区在线视频社区8| 亚洲五月天丁香| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 啦啦啦韩国在线观看视频| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 亚洲激情在线av| 一级片免费观看大全| 亚洲人成电影免费在线| 九色国产91popny在线| 久久香蕉精品热| 少妇被粗大的猛进出69影院| 国产成人影院久久av| 欧美另类亚洲清纯唯美| 黑人操中国人逼视频| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 亚洲精华国产精华精| 亚洲av电影不卡..在线观看| 国产99久久九九免费精品| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 亚洲av成人av| 最近在线观看免费完整版| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| av免费在线观看网站| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 亚洲七黄色美女视频| 亚洲avbb在线观看| 久热爱精品视频在线9| 亚洲av美国av| 国产欧美日韩一区二区精品| 在线播放国产精品三级| 亚洲三区欧美一区| 国产一卡二卡三卡精品| 日韩高清综合在线| xxx96com| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 久久亚洲精品不卡| 嫩草影院精品99| 欧美黄色淫秽网站| 日韩国内少妇激情av| 亚洲美女黄片视频| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 成年人黄色毛片网站| 国产精品野战在线观看| 又黄又爽又免费观看的视频| av中文乱码字幕在线| 亚洲人成77777在线视频| 国产97色在线日韩免费| 欧美激情久久久久久爽电影| 午夜免费成人在线视频| av在线天堂中文字幕| 可以在线观看的亚洲视频| 麻豆一二三区av精品| 日本免费一区二区三区高清不卡| 久久久水蜜桃国产精品网| 日韩有码中文字幕| 国产成+人综合+亚洲专区| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 午夜亚洲福利在线播放| 亚洲av电影不卡..在线观看| 国产亚洲av高清不卡| 免费高清视频大片| 免费在线观看亚洲国产| 又黄又爽又免费观看的视频| 亚洲精品色激情综合| 桃色一区二区三区在线观看| 曰老女人黄片| 天堂√8在线中文| 午夜精品在线福利| 国产亚洲精品av在线| 欧美激情 高清一区二区三区| 欧美色欧美亚洲另类二区| 一级a爱视频在线免费观看| 国产一区二区激情短视频| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 美国免费a级毛片| 手机成人av网站| 搡老熟女国产l中国老女人| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 国产欧美日韩精品亚洲av| 亚洲黑人精品在线| 伦理电影免费视频| 亚洲精品在线美女| 亚洲中文av在线| 成人亚洲精品av一区二区| 国产精品99久久99久久久不卡| 国产欧美日韩一区二区三| 国产精华一区二区三区| 欧美一级a爱片免费观看看 | 又黄又粗又硬又大视频| 美女午夜性视频免费| 狠狠狠狠99中文字幕| 在线av久久热| 岛国在线观看网站| 免费电影在线观看免费观看| 男人的好看免费观看在线视频 | 怎么达到女性高潮| 欧美+亚洲+日韩+国产| 国产高清有码在线观看视频 | 久久久久国内视频| 久久久久久久久免费视频了| 国产高清视频在线播放一区| 视频区欧美日本亚洲| 99久久国产精品久久久| 搞女人的毛片| 99热只有精品国产| x7x7x7水蜜桃| 婷婷亚洲欧美| 亚洲久久久国产精品| 国产97色在线日韩免费| 久久香蕉精品热| 视频区欧美日本亚洲| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 黄色 视频免费看| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 成年女人毛片免费观看观看9| 一边摸一边做爽爽视频免费| АⅤ资源中文在线天堂| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 中文亚洲av片在线观看爽| 亚洲中文av在线| 国产精品久久电影中文字幕| 亚洲国产高清在线一区二区三 | 一本一本综合久久| 国产亚洲精品一区二区www| 免费av毛片视频| www.www免费av| 亚洲男人的天堂狠狠| 动漫黄色视频在线观看| 90打野战视频偷拍视频| 狂野欧美激情性xxxx| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 国产精品一区二区三区四区久久 | 一级毛片精品| 99re在线观看精品视频| 国产色视频综合| 搡老熟女国产l中国老女人| 久久亚洲精品不卡| 日本一区二区免费在线视频| 不卡av一区二区三区| 日韩欧美三级三区| 国产v大片淫在线免费观看| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 天天添夜夜摸| 欧美久久黑人一区二区| 久久久国产欧美日韩av| 嫁个100分男人电影在线观看| netflix在线观看网站| 色综合亚洲欧美另类图片| 两人在一起打扑克的视频| 亚洲成人免费电影在线观看| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 特大巨黑吊av在线直播 | 久久精品成人免费网站| 真人做人爱边吃奶动态| 在线永久观看黄色视频| 亚洲成a人片在线一区二区| 老汉色∧v一级毛片| 一夜夜www| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产欧美日韩一区二区三| 麻豆成人午夜福利视频| 国产精品国产高清国产av| 欧美激情极品国产一区二区三区| 亚洲精品国产一区二区精华液| 日韩欧美国产一区二区入口| 亚洲五月天丁香| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 国产三级黄色录像| 观看免费一级毛片| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 国产成人精品久久二区二区免费| 一级毛片高清免费大全| 国产精品免费一区二区三区在线| 国产亚洲欧美98| 国产一级毛片七仙女欲春2 | 国产成+人综合+亚洲专区| 午夜福利在线在线| 精品欧美国产一区二区三| 国产精品99久久99久久久不卡| 俄罗斯特黄特色一大片| 看免费av毛片| 色综合亚洲欧美另类图片| 午夜福利成人在线免费观看| 嫩草影视91久久| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 十八禁人妻一区二区| 日韩精品中文字幕看吧| 88av欧美| 在线av久久热| 午夜激情av网站| 午夜免费观看网址| 在线观看免费日韩欧美大片| 精品久久久久久久久久久久久 | 国产日本99.免费观看| 青草久久国产| 国产精品亚洲av一区麻豆| 亚洲精品在线美女| 久久亚洲真实| 中文字幕精品免费在线观看视频| 国产亚洲欧美在线一区二区| 欧美久久黑人一区二区| 少妇被粗大的猛进出69影院| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 久久香蕉精品热| 免费搜索国产男女视频| 99国产精品一区二区三区| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 午夜免费鲁丝| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 免费在线观看影片大全网站| a级毛片在线看网站| 不卡av一区二区三区| 久久久精品欧美日韩精品| 可以在线观看毛片的网站| 欧美黄色片欧美黄色片| 久久伊人香网站| 在线视频色国产色| 给我免费播放毛片高清在线观看| 中文字幕av电影在线播放| 日本精品一区二区三区蜜桃| 成年女人毛片免费观看观看9| 精品电影一区二区在线| 国产欧美日韩一区二区精品| 国产精品98久久久久久宅男小说| 久久中文字幕一级| 色综合婷婷激情| 波多野结衣高清作品| 久久人妻av系列| 黄色女人牲交| 精品久久久久久成人av| 色在线成人网| 亚洲成a人片在线一区二区| 亚洲 国产 在线| 国产真实乱freesex| 妹子高潮喷水视频| 午夜免费激情av| 国产精品免费视频内射| cao死你这个sao货| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 国产精品永久免费网站| 美女午夜性视频免费| 亚洲av电影不卡..在线观看| 波多野结衣av一区二区av| 亚洲免费av在线视频| 日韩精品青青久久久久久| 在线观看日韩欧美| 一区二区三区高清视频在线| www.www免费av| 日本成人三级电影网站| 男女视频在线观看网站免费 | 欧美精品亚洲一区二区| 免费观看人在逋| 国产精品亚洲美女久久久| 91av网站免费观看| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| av在线天堂中文字幕| 热re99久久国产66热| 黄色视频,在线免费观看| 美国免费a级毛片| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 亚洲一区二区三区不卡视频| 成在线人永久免费视频| 精品卡一卡二卡四卡免费| 国产亚洲欧美在线一区二区| 亚洲 欧美一区二区三区| 国产视频内射| 欧美又色又爽又黄视频| 日韩有码中文字幕| 老熟妇仑乱视频hdxx| 欧美日韩福利视频一区二区| ponron亚洲| 精品无人区乱码1区二区| 2021天堂中文幕一二区在线观 | 精品一区二区三区视频在线观看免费| 高清毛片免费观看视频网站| 成人特级黄色片久久久久久久| www.www免费av| 久久精品91蜜桃| tocl精华| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 免费看a级黄色片| 欧美黄色淫秽网站| 美女午夜性视频免费| 亚洲精品国产一区二区精华液| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | www.www免费av| 在线观看66精品国产| 丝袜人妻中文字幕| 亚洲熟女毛片儿| 后天国语完整版免费观看| 久久久久久九九精品二区国产 | 在线看三级毛片| 亚洲成人精品中文字幕电影| 国产v大片淫在线免费观看| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 日本在线视频免费播放| 国产91精品成人一区二区三区| 两个人看的免费小视频| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 免费一级毛片在线播放高清视频| 欧美性猛交黑人性爽| 韩国av一区二区三区四区| 国产黄色小视频在线观看| 色老头精品视频在线观看| 母亲3免费完整高清在线观看| 欧美日韩精品网址| 亚洲五月婷婷丁香| 麻豆久久精品国产亚洲av| 一进一出抽搐动态| 嫩草影视91久久| 女人被狂操c到高潮| 一a级毛片在线观看| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 十八禁网站免费在线| 国产成人精品久久二区二区免费| 叶爱在线成人免费视频播放| 曰老女人黄片| 久久久久国内视频| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 中文字幕精品亚洲无线码一区 | 天天添夜夜摸| 色婷婷久久久亚洲欧美| 69av精品久久久久久| 国产亚洲av高清不卡| 一级作爱视频免费观看| 欧美又色又爽又黄视频| 91麻豆av在线| 国产一卡二卡三卡精品| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| АⅤ资源中文在线天堂| 久久久久免费精品人妻一区二区 | 久99久视频精品免费| 此物有八面人人有两片| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 一区二区日韩欧美中文字幕| 国产成人av激情在线播放| 午夜福利免费观看在线| 亚洲中文日韩欧美视频|