腰椎間盤組織髓核內(nèi)IL—1、IL—6的表達(dá)及臨床價值分析

穆國斌　徐國興

[摘 要] 目的：探討IL-1、IL-6對腰間盤突出的臨床診斷價值。方法：腰間盤突出患者作為觀察組，外傷致腰椎骨折患者作為對照組，評估神經(jīng)根性疼痛VAS分值，檢測2組患者椎間盤組織中的IL-1及IL-6的表達(dá)水平，并檢測其相關(guān)性。結(jié)果：與對照組比較，觀察組髓核組織的IL-1、IL-6含量均顯著增高（P<0.05），同時觀察組內(nèi)IL-1、IL-6含量按照膨出型、突出型、游離型順序依次增高，各型間比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；不同髓核突出類型患者椎間盤組織中IL-1及IL-6的表達(dá)水平與神經(jīng)根性疼痛VAS 評分呈顯著正相關(guān)性。結(jié)論：IL-1、IL-6在腰間盤突出患者椎間盤組織中具有較高表達(dá)水平，可將其作為LDH臨床診斷依據(jù)。

[關(guān)鍵詞] 腰間盤突出；IL-1；IL-6；診斷價值

中圖分類號：R683.2 文獻(xiàn)標(biāo)識碼： B 文章編號：2095-5200（2015）05-089-03

腰椎間盤突出癥（lumbar disc herniation，LDH）主要與椎間盤壓力、椎間盤細(xì)胞或細(xì)胞外基質(zhì)代謝異常、內(nèi)分泌異常、免疫因素、外傷以及炎性介質(zhì)等諸多方面具不同程度關(guān)聯(lián)[1]。而新近有學(xué)者研究證實[2]，某些炎性侵入性細(xì)胞或突出椎間盤其髓核組織所自發(fā)產(chǎn)生多種細(xì)胞因子以及神經(jīng)肽類物質(zhì)均可導(dǎo)致非特異性炎癥反應(yīng)，同時這一過程也是誘發(fā)患者出現(xiàn)腰腿痛重要原因。另有幾項研究初步表明[3-5]，白細(xì)胞介素-1（interleukin-1，IL-1）與白細(xì)胞介素-6（interleukin-6，IL-6）在頸椎及腰椎椎間盤退變組織中存在大量表達(dá)。鑒于此，我院針對近年內(nèi)收治LDH患者連同對照患者開展研究，旨在通過檢測其椎間盤組織中IL-1及IL-6表達(dá)水平情況及其與神經(jīng)根性疼痛相關(guān)性，進(jìn)而探討其對LDH臨床診斷價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇于2013年6月～2014年7月期間我院收治并接受手術(shù)治療47例LDH患者作為觀察組，另選擇同期在我院接受手術(shù)治療外傷致腰椎骨折患者47例為對照組。2組患者均排除合并有椎管手術(shù)病史者、合并有與本研究實驗相關(guān)免疫系統(tǒng)疾病者、合并有急慢性感染病史者，另外，對照組患者在受傷前均不患有LDH，腰椎正側(cè)位醫(yī)學(xué)影像檢查未發(fā)現(xiàn)具腰椎間盤突出表現(xiàn)，同時術(shù)中也并未在腰椎骨折部位觀察到有間盤突出等肉眼可見病理表現(xiàn)。觀察組47例LDH患者包括男29例，女18例；年齡26～58歲，平均（43.8±8.3）歲；病程2～11年，平均（5.2±1.7）年；椎間盤突出節(jié)段包括：L3-44例，L3-426例，L3-417例；根據(jù)椎間盤突出程度可分為3組：膨出型13例，突出型20例，游離型14例。對照組47例腰椎骨折患者包括男28例，女19例；年齡25～59歲，平均（43.6±7.9）歲；受傷椎間盤節(jié)段包括：L3-45例，L3-424例，L3-418例。組間比較2組患者性別、年齡以及腰椎患病節(jié)段等基線資料均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有在該層面上可比性。

1.2 方法

所有患者入院后即停用消炎止痛藥物，并確保停藥時間距手術(shù)時間至少不低于3d。在手術(shù)前夜采用視覺模擬評分法（VAS）先對患者神經(jīng)根性疼痛程度進(jìn)行評估。手術(shù)過程中指定同一名具有豐富經(jīng)驗醫(yī)師進(jìn)行取材操作，根據(jù)椎間盤突出程度進(jìn)行椎間盤髓核組織處理，具體取材部位分別為：膨出型取突入椎管與神經(jīng)根接觸部分，突出型取突破纖維環(huán)及后縱韌帶與神經(jīng)根接觸部分，游離型取游離到椎管內(nèi)部分以及肉眼即可觀察到存在退變部分。采用磷酸鹽緩沖液（0.1M，pH=7）對取得髓核組織進(jìn)行反復(fù)沖洗，將沾染血液洗凈為止，吸干殘留表面液體并行超聲粉粹處理，粉粹后按100mg組織配1mL磷酸鹽緩沖液制成均漿，均漿離心處理，離心轉(zhuǎn)速5000r/min，離心時間10min，完成離心處理后取其上清液轉(zhuǎn)移至試管內(nèi)，儲存到-20℃冰箱內(nèi)保存待檢。測定時先對樣本進(jìn)行復(fù)溫處理，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）對樣本IL-1及IL-6含量進(jìn)行測定，測定試劑盒均采用美國ADL公司產(chǎn)品。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

軟件SPSS19.0處理本研究數(shù)據(jù)，其中，計量資料采用均數(shù)（x±s）標(biāo)準(zhǔn)差表示，檢驗方法采用t檢驗；IL-1、IL-6與神經(jīng)根性疼痛程度VAS評分分值相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析法，以P<0.05為比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組患者髓核組織IL-1及IL-6含量測定結(jié)果

與對照組比較，觀察組中膨出型、突出型、游離型三型患者髓核組織IL-1、IL-6含量均顯著增高（P<0.05），且觀察組按照膨出型、突出型、游離型依次增高，且各型間比較均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.2 不同髓核突出類型IL-1、IL-6表達(dá)與疼痛評分相關(guān)性

不同髓核突出類型患者椎間盤組織中IL-1及IL-6表達(dá)水平與神經(jīng)根性疼痛VAS 評分呈顯著正相關(guān)性。見表2。

3 討論

目前，普遍認(rèn)為[6-7]LDH主要是由于患者腰椎間盤發(fā)生退行性改變，導(dǎo)致椎間盤突出并對神經(jīng)根產(chǎn)生壓迫引起臨床癥狀，同時發(fā)現(xiàn)不少LDH患者其椎間盤突出程度以及對神經(jīng)根所形成壓迫程度實則與患者臨床癥狀并非完全一致，而往往在手術(shù)中觀察到神經(jīng)根水腫，這與炎性改變非常相似。因此近年研究中，將炎性細(xì)胞因子歸結(jié)成為了導(dǎo)致椎間盤退變關(guān)鍵性原因[8]。

IL-1為一種單核因子，IL-1可以發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)比較廣泛[9]，其在局部乃至全身均可發(fā)揮作用，包括增強(qiáng)免疫應(yīng)答與促進(jìn)傷口愈合，參與炎癥反應(yīng)。Doita等[10]曾對突出椎間盤樣品開展有關(guān)免疫組化分析研究，發(fā)現(xiàn)在突出椎間盤肉芽組織單核細(xì)胞上觀察到IL-1表達(dá)，繼而認(rèn)為IL-1可能主要是由單核-巨噬細(xì)胞所生成。TakahashiH等[11]研究發(fā)現(xiàn)，在不同類型突出椎間盤當(dāng)中，其細(xì)胞因子分泌細(xì)胞有多不同，在脫出型與游離型椎間盤樣本中，細(xì)胞一般為單核組織細(xì)胞、成纖維細(xì)胞以及內(nèi)皮細(xì)胞等，而在膨出型椎間盤樣本中則多是由軟骨樣細(xì)胞所生成。葉君健等[12]發(fā)現(xiàn)椎間盤發(fā)生退行性改變， IL-1水平隨之升高，椎間盤其基質(zhì)合成以及相關(guān)分解代謝生理活動均將出現(xiàn)紊亂，之后基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）相關(guān)基因表達(dá)將明顯增加，椎間盤出現(xiàn)基質(zhì)分解代謝活動強(qiáng)度超過合成代謝強(qiáng)度病理性改變。IL-1還可誘導(dǎo)痛覺增敏以及神經(jīng)根損害，在Cunha等[13]動物實驗中，他們通過對小鼠前腳掌注入IL-1（包括IL-1α與IL-1β）后，很快就觀察到小鼠出現(xiàn)較為明顯痛覺增敏情況。有研究者采用基因擴(kuò)增技術(shù)（PCR）觀察到[14]，在炎性細(xì)胞因子存在情況下，突出腰椎間盤基質(zhì)細(xì)胞中出現(xiàn)誘導(dǎo)型環(huán)氧合酶（COX2）mRNA表達(dá)，而COX2是一種對PGE2合成具有重要調(diào)節(jié)作用關(guān)鍵酶，PGE2生成量因此顯著增加， IL-1通過對上調(diào)PGE2合成而進(jìn)一步加重炎性反應(yīng)效應(yīng)。

IL-6為一種多效應(yīng)細(xì)胞因子， Kang等[15] LDH患者髓核標(biāo)本IL-6表現(xiàn)有非常高表達(dá)水平，超過200000ρg/mL，而在對照組中則幾乎未檢測到有IL-6存在。我國學(xué)者李新友等[16]則對不同類型突出椎間盤組織IL-6表達(dá)水平進(jìn)行檢測與觀察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其每種類型突出椎間盤組織IL-6表達(dá)水平也是存在有較大差異，其中尤其以游離型顯著增高。正常椎間盤組織自身具有抗原性，但又很有可能被免疫系統(tǒng)識別為“異物”，IL-6可通過調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞功能促進(jìn)椎間盤自身免疫反應(yīng)，因此IL-6極有可能通過免疫反應(yīng)這一環(huán)節(jié)間接加重LDH患者神經(jīng)根損傷程度。

本研究結(jié)果提示IL-1、IL-6在LDH患者椎間盤組織中具有較高表達(dá)水平，可將其作為LDH臨床診斷重要依據(jù)。

參 考 文 獻(xiàn)

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