郭艷++史芳芳
摘要 以丹尼斯鳳梨的腋芽為外植體,通過應用組織培養(yǎng)技術進行植株再生體系的建立,結果表明:丹尼斯鳳梨誘導愈傷組織效果最好的培養(yǎng)基是MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA,愈傷組織誘導率達52.9%;叢生芽適宜培養(yǎng)基為MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA,增值系數達2.6;誘導生根培養(yǎng)基為MS+1.0 mg/L IBA,生根率達93%。
關鍵詞 丹尼斯鳳梨;組織培養(yǎng);快速繁殖;再生體系
中圖分類號 S682.39 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739(2015)12-0158-01
丹尼斯鳳梨是觀賞鳳梨的一個優(yōu)良品種,為多年生常綠草本植物,株形優(yōu)美,花形獨特,色彩鮮艷多變,花期長達4~8個月,適于室內裝飾和擺設,加上其抗寒耐租擺,已成為我國花卉市場最受歡迎的觀賞性花卉之一[1-4]。觀賞鳳梨的繁殖方式有播種、分株或扦插、組培等[5],由于分株繁殖不僅速度慢,獲得的種苗數量小,而且苗木整齊度差,因此十二師農業(yè)科學研究所結合當地市場需求,應用組織培養(yǎng)技術對丹尼斯鳳梨組織培養(yǎng)快速繁殖各個階段的關鍵技術進行研究總結,成功地建立了丹尼斯鳳梨的再生體系,以期為丹尼斯鳳梨的大規(guī)模生產提供技術指導。
1 材料與方法
1.1 試驗材料
供試丹尼斯鳳梨(Guzmania‘Denise)采購于新疆烏魯木齊市明珠花卉市場。
1.2 試驗方法
1.2.1 外植體的選擇與處理。選取健壯無病蟲害的丹尼斯鳳梨成品苗,取萌發(fā)的腋芽作為外植體的取材材料。先經流水沖洗30 min,再用70%酒精浸泡15 s,0.1%升汞浸泡10 min,無菌水沖洗3~5次后置于超凈工作臺上,剝除外部葉片至10 mm左右,用0.1%升汞浸泡5 min,無菌水沖洗4~5次,即可接種[1-3,6]。
1.2.2 不同時期培養(yǎng)基條件。下述培養(yǎng)基pH值為5.8,瓊脂為4.5 g/L,于120 ℃、1.1 MPa下滅菌20 min。①愈傷組織誘導培養(yǎng)基見表1,試驗每組接10瓶,每瓶接種3個材料;②芽增殖培養(yǎng)基為MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA;③生根培養(yǎng)基為MS+1.0 mg/L IBA。
1.2.3 培養(yǎng)條件。愈傷組織誘導置于(25±2)℃條件下暗培養(yǎng)1周,然后移到光照強度、溫度分別為40 μmol/m2·s、(25±2)℃的條件下進行培養(yǎng),光照時間為每天12 h[1-3]。小苗分化和生根培養(yǎng)溫度25~28 ℃,每日光照12 h,光照強度1 500 lx左右。
2 結果與分析
2.1 不同培養(yǎng)基對愈傷組織誘導的影響
由表1可知,丹尼斯鳳梨誘導愈傷組織效果最好的培養(yǎng)基為MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA,愈傷組織誘導率達52.9%,對愈傷組織的誘導有較大的促進作用。
2.2 愈傷組織的增殖
將產生的愈傷組織均勻接種到增殖培養(yǎng)基MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA上進行光照培養(yǎng),30 d后觀察統(tǒng)計增值系數達2.6,以后每30~40 d,將叢生芽分塊切割,接種于新鮮的芽增殖培養(yǎng)基進行繼代增殖。
2.3 生根培養(yǎng)
將長約2 cm的叢生芽單個切下,轉入生根培養(yǎng)基培養(yǎng),1個月左右即可生根,生根率達93%,50 d左右小苗可高達3~4 cm、有3~4條根,此時可進行移栽[1-3]。
3 結論
本試驗以丹尼斯鳳梨腋芽為外植體進行愈傷組織的誘導、增殖培養(yǎng)及生根培養(yǎng),結果表明:丹尼斯鳳梨誘導愈傷組織效果最好的培養(yǎng)基是MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA,愈傷組織誘導率達到52.9%;叢生芽適宜培養(yǎng)基為MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA,增值系數達到2.6;誘導生根培養(yǎng)基為MS+1.0 mg/L IBA,生根率達到93%。成功實現了丹尼斯鳳梨植株再生體系的建立,可滿足后期規(guī)?;a[7-9]。
4 參考文獻
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