COX-2與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移對宮頸癌預(yù)后影響的研究

辛華棟 張莉華 武艷霞 焦茹 吳士茜 袁艷龍

1邯鄲市第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河北邯鄲056001

邯鄲市中心醫(yī)院2婦二科，3口腔外科，4體檢中心，5病理科，河北邯鄲056001

COX-2與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移對宮頸癌預(yù)后影響的研究

辛華棟1張莉華2#武艷霞2焦茹3吳士茜4袁艷龍5

1邯鄲市第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河北邯鄲056001

邯鄲市中心醫(yī)院2婦二科，3口腔外科，4體檢中心，5病理科，河北邯鄲056001

目的研究環(huán)氧合酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移對宮頸癌預(yù)后的影響。方法采用免疫組化SP法，檢測95例宮頸癌患者中COX-2的表達(dá)情況，并采用生存分析法評估COX-2表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移對宮頸癌預(yù)后的影響。結(jié)果COX-2在95例宮頸癌中的陽性表達(dá)率為65.26%（62/95），COX-2的陽性表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、宮旁或脈管浸潤呈正相關(guān)（r=0.220，P=0.032；r=0.215，P=0.037）。生存分析顯示，COX-2陽性表達(dá)（P=0.005）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（P=0.000）與宮頸癌患者的預(yù)后密切相關(guān)。結(jié)論COX-2及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是宮頸癌患者預(yù)后的獨(dú)立影響因素，對判斷預(yù)后及指導(dǎo)治療具有重要的臨床價值。

宮頸癌；環(huán)氧合酶-2；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；預(yù)后

Oncol prog,2015,13(4)

環(huán)氧合酶（cyclooxygenase，COX）是前列腺素合成過程中的限速酶，其亞型之一——COX-2在多種惡性腫瘤組織中的表達(dá)異常增高。另外，COX-2與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的關(guān)系亦越來越受到關(guān)注[1]，但國內(nèi)外對COX-2與宮頸癌預(yù)后相關(guān)性的報道卻較為罕見。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是宮頸癌主要的轉(zhuǎn)移途徑之一，與腫瘤的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及患者術(shù)后復(fù)發(fā)密切相關(guān)。本研究旨在探討COX-2及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移對宮頸癌患者預(yù)后的影響。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選取2008年6月至2009年10月住院治療的宮頸癌患者95例，所有病例均經(jīng)確診且臨床資料完整，無并發(fā)其他惡性腫瘤及心腦血管疾病?；颊吣挲g為27～80歲，中位年齡42歲。按照2009年國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（Federation International of Gynecology and Obstetrics，F(xiàn)IGO）宮頸癌臨床分期標(biāo)準(zhǔn)診斷為Ⅰ期的患者有22例，Ⅱ期43例，Ⅲ～Ⅳ期30例。按照病理分型診斷為高、中、低分化者分別為16例、49例及30例。其中鱗癌77例，腺癌11例，腺棘細(xì)胞癌5例，小細(xì)胞未分化癌1例，透明細(xì)胞癌1例。所有病理結(jié)果均經(jīng)兩位資深病理科醫(yī)生確診。

1.2 研究方法

采用免疫組化SP法進(jìn)行檢測。羊抗人COX-2多克隆抗體、即用型羊SPkate檢測試劑盒、DAB顯色試劑盒、SP試劑盒均購自北京中山生物技術(shù)有限公司。參照陽性細(xì)胞百分比及陽性細(xì)胞染色強(qiáng)弱進(jìn)行免疫組化評分（immunohistochem ical scores，IHS）[2]：IHS=a×b（a，代表陽性細(xì)胞百分比：a=0，無陽性細(xì)胞；a=1，陽性細(xì)胞為1%～10%；a= 2，陽性細(xì)胞為11%～50%；a=3，陽性細(xì)胞為51%～80%；a=4，陽性細(xì)胞≥81%。b，代表陽性細(xì)胞染色強(qiáng)弱：b=0，陰性；b=1，弱陽性；b=2，中度陽性；b=3，強(qiáng)陽性）。IHS為0分計為陰性；≥1分計為陽性。以已知的COX-2表達(dá)陽性的肺癌切片作為對照。

1.3 隨訪

通過電話、門診復(fù)查、書信等方式對患者進(jìn)行隨訪，從確診之日起至2014年10月結(jié)束隨訪，隨訪時間為8.6～76個月。95例宮頸癌患者失訪3例，死亡26例，其中9例死于局部復(fù)發(fā)，8例死于遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，7例死于局部復(fù)發(fā)并發(fā)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，1例死于心肌梗死，1例死于腦出血。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 21.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行分析。計數(shù)資料比較采用χ2檢驗；雙變量相關(guān)分析采用Pearson相關(guān)檢驗；繪制生存曲線采用Kaplan-Meier法；兩組間生存狀況的比較采用Log-rank檢驗。

2 結(jié)果

2.1 COX-2在宮頸癌中的表達(dá)

COX-2陽性表達(dá)為胞質(zhì)內(nèi)可見棕黃色或棕褐色的顆粒。在95例原發(fā)宮頸癌患者中，COX-2表達(dá)陽性的患者為62例（65.26%）。在有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者中的陽性表達(dá)率分別為78.4%（29/37）及56.9%（33/58），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=4.598，P= 0.032）。在有無宮旁或脈管浸潤患者中的陽性表達(dá)率分別為81.5%（22/27）及58.8%（40/68），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=4.377，P=0.036）。COX-2的陽性表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、宮旁或脈管浸潤呈正相關(guān)（r=0.220，P=0.032；r=0.215，P=0.037）。（圖1）

2.2 宮頸癌預(yù)后的單因素分析

COX-2表達(dá)陽性和陰性患者的生存狀況見圖2，COX-2陰性的宮頸癌患者5年生存率顯著優(yōu)于COX-2陽性的患者（P=0.005）；有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的生存狀況見圖3，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌患者5年生存率顯著優(yōu)于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者（P= 0.000）。

3 討論

圖3 COX-2在宮頸癌中的表達(dá)

COX-2是花生四烯酸合成前列腺素的重要限速酶，在大多數(shù)組織中不表達(dá)或低表達(dá)，但在炎性介質(zhì)、生長因子、促癌因素、內(nèi)毒素、癌基因等作用下短時間內(nèi)表達(dá)迅速增加，被稱為誘導(dǎo)型即刻反應(yīng)基因。COX-2通過促進(jìn)細(xì)胞增殖、抑制細(xì)胞凋亡、誘導(dǎo)新生腫瘤血管形成、介導(dǎo)細(xì)胞間黏附異常、降解細(xì)胞外基質(zhì)、參與腫瘤免疫逃逸等機(jī)制增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞浸潤及轉(zhuǎn)移等惡性潛能[3]，并影響患者的預(yù)后[4]。Saba等[5]對頭頸部腫瘤的研究結(jié)果顯示，COX-2的表達(dá)與總生存時間有關(guān)，COX-2高表達(dá)患者5年生存時間顯著低于COX-2低表達(dá)者。在一項宮頸癌的多因素分析研究中顯示[6]，COX-2、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、宮旁浸潤或脈管瘤栓與預(yù)后顯著相關(guān)；COX-2陽性組的宮頸癌患者3年生存時間明顯短于陰性組患者。該結(jié)果與本研究的結(jié)果一致。本研究中COX-2陰性組的宮頸癌患者5年生存率顯著優(yōu)于COX-2陽性組，提示COX-2的表達(dá)與宮頸癌患者的預(yù)后密切相關(guān)。COX-2作為一項預(yù)后指標(biāo)，對評估病情、指導(dǎo)治療及監(jiān)測預(yù)后發(fā)揮了積極的作用。本研究為COX-2分子靶向治療提供了實驗依據(jù)，已有學(xué)者對此進(jìn)行了初步探討[7]。

圖2 COX-2表達(dá)陰性和陽性宮頸癌患者的生存曲線

圖3 有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移宮頸癌患者的生存曲線

大量的文獻(xiàn)表明[3-5]，腫瘤的局部浸潤及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與患者的5年生存率密切相關(guān)。本研究的結(jié)果顯示，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移明顯影響宮頸癌患者的的預(yù)后。張莉華等[6]和劉平等[8]進(jìn)行宮頸癌Cox比例風(fēng)險模型分析，結(jié)果支持以上觀點(diǎn)，認(rèn)為淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是宮頸癌的獨(dú)立預(yù)后因素。在惡性腫瘤組織中，因新生血管及淋巴管生長迅速、密集而紊亂，以及多種細(xì)胞因子及酶類表達(dá)異常，使細(xì)胞間接觸抑制減弱、基底膜溶解或破壞而致新生淋巴管及血管管壁結(jié)構(gòu)不完整，細(xì)胞間隙擴(kuò)大，不能阻止癌細(xì)胞的侵入，從而促使癌細(xì)胞通過脈管系統(tǒng)向周圍淋巴結(jié)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。在腫瘤組織切片中可見到未成熟的淋巴管內(nèi)成簇的腫瘤細(xì)胞。本研究中有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌患者5年生存率顯著低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者，再次證明了宮頸癌經(jīng)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及脈管浸潤的惡性生物學(xué)行為。

本研究顯示，COX-2在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組及有宮旁或脈管浸潤組中的陽性表達(dá)率顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。COX-2分別與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及宮旁或脈管浸潤進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果均呈正相關(guān)（P＜0.05），由此推測COX-2、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、宮旁或脈管浸潤在宮頸癌中可能通過某些機(jī)制協(xié)同發(fā)揮作用。在對卵巢癌、非小細(xì)胞肺癌及大腸癌的研究中亦顯示COX-2與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[9-11]。血管內(nèi)皮生長因子-C（vascular endothelial grow th factor C，VEGF-C）是重要的促淋巴管生長因子，VEGF-C mRNA是影響盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的獨(dú)立因素[12]。COX-2和VEGF-C的表達(dá)與多種腫瘤的發(fā)生呈正相關(guān)，也是和預(yù)后相關(guān)的獨(dú)立因素[13-14]。本研究的結(jié)果表明，COX-2通過多種分子機(jī)制上調(diào)VEGF-C的表達(dá)，誘導(dǎo)實體瘤瘤內(nèi)或腫瘤周圍的淋巴管生成和擴(kuò)張，促進(jìn)惡性腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。另有研究顯示，COX-2通過多種分子途徑誘導(dǎo)促血管生成因子表達(dá)上調(diào)，促使血管內(nèi)皮細(xì)胞移位，并抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的浸潤和轉(zhuǎn)移[15]。本研究得出結(jié)論，COX-2、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及宮旁或脈管浸潤在分子水平通過多因素、多途徑、多步驟協(xié)同的機(jī)制發(fā)揮著復(fù)雜的作用，進(jìn)一步增強(qiáng)了腫瘤細(xì)胞的侵襲性，對宮頸癌的預(yù)后具有重要的臨床意義。

綜上所述，COX-2的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、宮旁或脈管浸潤呈正相關(guān)，是宮頸癌的獨(dú)立預(yù)后因素。在美國國家綜合癌癥網(wǎng)絡(luò)（National Comprehensive Cancer Network，NCCN）指南的臨床分期中，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移雖然對腫瘤分期無影響，但卻是影響宮頸癌預(yù)后最顯著的因素。在治療前應(yīng)進(jìn)行MRI等輔助檢查，全面評估患者的病情及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況，并制訂周密的治療方案，手術(shù)宜徹底、規(guī)范地切除宮旁組織及淋巴結(jié)，確定個體化的放療劑量及照射野，這些均有利于提高宮頸癌患者的生存率。COX-2與宮頸癌的浸潤、轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān)，可作為宮頸癌預(yù)后的監(jiān)測指標(biāo)之一，并可用于指導(dǎo)臨床治療。COX-2抑制劑作為宮頸癌治療的新靶點(diǎn)，具有一定的應(yīng)用前景，但還需要更多的體外試驗及臨床試驗進(jìn)一步論證其應(yīng)用價值。

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Effectsof COX-2 and lymph-nodemetastasison prognosisof cervical cancer

XIN Hua-dong1ZHANG Li-hua2#WU Yan-xia2JIAO Ru3WU Shi-qian4YUAN Yan-long51Departmentof Neurology of Handan Municipal FirstHospital,Handan 056001,Hebei,China2Second Departmentof Gynecology,3Departmentof OralSurgery,4MedicalExam ination Center,5Departmentof Pathology of Handan MunicipalCentralHospital,Handan 056001,Hebei,China

Objective To study the effects of COX-2 and lymph-nodemetastasis on the prognosis of cervical cancer.MethodThe expression of COX-2 was identified by immunohistochemically S-PMethodin the paraffin sections,and survival analysis was applied to evaluated the effect of COX-2 expression and lymph-node metastasis on the prognosis of cervical cancer,while Kaplan-Meier plots provided.ResultThe positive expression rate of COX-2 was 65.26%(62/95)in 95 patients w ith cervical cancer,which was positively associated w ith lymph-nodemetastasis and latero-uterus or vessel infiltration(r=0.220,P=0.032;r=0.215,P=0.037,respectively).Survival analysis indicated that positive expression of COX-2 and lymph-nodemetastasis were both closely related w ith the prognosis of cervical cancer(P=0.005;P=0.000,respectively).ConclusionCOX-2 and lymph-node metastasis are independent prognosis factors in cervical cancer,whichmay serve as predictorsw ith clinical importance.

cervical cancer；COX-2；lymph-nodemetastasis；prognosis

R737.3

A

10.11877/j.issn.1672-1535.2015.13.04.19

#通信作者（corresponding author），e-mail：drabing@163.com

2015-03-12）