全血γ-干擾素釋放試驗(yàn)在診斷結(jié)核分枝桿菌感染中的應(yīng)用價(jià)值

孟蘇凱 吳振萍 鐘達(dá)

?

·論著·

全血γ-干擾素釋放試驗(yàn)在診斷結(jié)核分枝桿菌感染中的應(yīng)用價(jià)值

孟蘇凱 吳振萍 鐘達(dá)

目的 探討全血γ-干擾素釋放試驗(yàn)(interferon gamma release assay，IGRA)在診斷結(jié)核分枝桿菌(Mtb)感染中的應(yīng)用價(jià)值。方法 前瞻性納入2014年6月至2014年11月期間，天津市結(jié)核病控制中心門診就診的150例經(jīng)臨床確診為活動(dòng)性肺結(jié)核患者(活動(dòng)性肺結(jié)核組)和180例非結(jié)核呼吸系統(tǒng)疾病患者(非結(jié)核組)。每例患者均進(jìn)行IGRA-ELISA、PPD試驗(yàn)、金胺O熒光染色和結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)檢測。采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析處理，率的比較采用卡方檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果 IGRA-ELISA和PPD試驗(yàn)診斷活動(dòng)性肺結(jié)核組和非結(jié)核組的敏感度分別為90.7%(136/150)和74.7%(112/150)，特異度分別為85.0%(153/180)和48.3%(87/180)，經(jīng)卡方檢驗(yàn)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=13.420，P<0.01；χ2=54.540，P<0.01)。150例活動(dòng)性肺結(jié)核組中IGRA-ELISA陽性率為90.7%，遠(yuǎn)高于涂片陽性率12.0%(18/150)和培養(yǎng)陽性率24.0%(36/150)。菌陽和菌陰肺結(jié)核患者中IGRA-ELISA陽性率分別為95.8%(46/48)和88.2%(90/102)(χ2=0.397,P>0.05),二者之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 IGRA-ELISA對診斷結(jié)核分枝桿菌感染有較高的敏感度和特異度, 且操作簡單，可用于結(jié)核病尤其是涂陰肺結(jié)核和肺外結(jié)核的輔助診斷。

干擾素γ釋放試驗(yàn)； 結(jié)核, 肺/診斷; 酶聯(lián)免疫吸附測定

結(jié)核病是一種由Mtb感染引起的嚴(yán)重危害人類健康和生命的傳染病。近年來，隨著耐藥結(jié)核分枝桿菌菌株的大量出現(xiàn)，艾滋病合并結(jié)核感染增多及全球人口流動(dòng)性的增加，結(jié)核病的發(fā)病率不斷增加，已成為嚴(yán)重威脅人類生命健康的傳染性疾病。2010年第五次全國結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查結(jié)果顯示，15歲及以上人群活動(dòng)性肺結(jié)核的患病率為459/10萬，涂陽肺結(jié)核患病率為66/10萬，盡管活動(dòng)性肺結(jié)核的患病率有所下降，但由于人口數(shù)量的增加，導(dǎo)致全國活動(dòng)性肺結(jié)核患者例數(shù)較2000年相比反而有所增加，且無癥狀肺結(jié)核患者比例明顯增加[1]。因此，加強(qiáng)對結(jié)核感染者和結(jié)核病患者的早期、快速、準(zhǔn)確診斷，已成為結(jié)核病控制工作的重點(diǎn)。

近年來，一種新型的細(xì)胞免疫檢測技術(shù)IGRA 被證實(shí)在結(jié)核分枝桿菌感染檢測中有較高敏感度和特異度[2-3]。目前已經(jīng)有兩種商業(yè)化的IGRA試劑盒分別通過了美國和歐洲FDA的批準(zhǔn)得以在臨床上用于診斷結(jié)核潛伏感染(latent tuberculosis infection，LTBI)和輔助診斷活動(dòng)性肺結(jié)核(active tuberculosis,ATB)，臨床上應(yīng)用的IGRA技術(shù)主要有兩種：一種是酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)，主要測定在Mtb特異性抗原刺激下，外周血單個(gè)核細(xì)胞中能夠釋放γ-干擾素的效應(yīng)T細(xì)胞數(shù)量；另外一種是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)(簡稱為“IGRA-ELISA”),主要測定全血中致敏T細(xì)胞再次受到Mtb特異性抗原刺激后釋放的γ-干擾素水平[4]。本研究采用IGRA-ELISA法，進(jìn)一步研究IGRA技術(shù)在診斷結(jié)核分枝桿菌感染中的應(yīng)用價(jià)值。

對象和方法

一、研究對象來源和分組

選取2014年6月至2014年11月在天津市結(jié)核病控制中心肺內(nèi)科門診就診的150例活動(dòng)性肺結(jié)核患者和180例非結(jié)核呼吸系統(tǒng)疾病患者。所有受試者均排除免疫系統(tǒng)性疾病，無妊娠，無免疫抑制劑和免疫增強(qiáng)劑使用史,避免研究對象因免疫損傷導(dǎo)致IGRA檢測假陰性。

兩組研究對象均進(jìn)行全血IGRA-ELISA檢驗(yàn)、PPD皮膚試驗(yàn)、痰抗酸桿菌金胺O熒光染色和痰結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)檢測。

1.活動(dòng)性肺結(jié)核組：共納入150例，為我院肺內(nèi)科門診確診的活動(dòng)性肺結(jié)核患者，其中男110例，女40例，年齡19～89歲，平均(42.3±16.6) 歲，所有入選患者均為初診患者，活動(dòng)性肺結(jié)核的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考中華醫(yī)學(xué)會(huì)頒布的《結(jié)核病診療指南》[5]中規(guī)定的初、復(fù)治肺結(jié)核診斷標(biāo)準(zhǔn)。菌陰肺結(jié)核102例，菌陽肺結(jié)核48例，其中熒光染色法陽性者18例，結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)陽性者36例，熒光染色和結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)均為陽性者有6例。

2.非結(jié)核呼吸系統(tǒng)疾病組(簡稱“非結(jié)核組”)：共納入180例,均排除結(jié)核病。其中男38例，女142例，年齡14～74歲，平均 (38.4±13.6) 歲。入選標(biāo)準(zhǔn)為：胸部X線檢查結(jié)果陰性，痰熒光染色和分枝桿菌培養(yǎng)均為陰性，無結(jié)核病史和任何結(jié)核病相關(guān)癥狀，且存在確切的其他病原體感染證據(jù)，常規(guī)抗炎治療后好轉(zhuǎn)。

二、試劑盒和儀器

結(jié)核感染T細(xì)胞檢測試劑盒(北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn))；金胺O熒光TB染色液(珠海貝索生物科技有限公司生產(chǎn))； PPD(成都生物制品研究所生產(chǎn))；Sunrise 酶標(biāo)儀[瑞士Tecan(帝肯)公司]； 全自動(dòng)BACTEC MGIT 960分枝桿菌培養(yǎng)系統(tǒng)(美國BD公司生產(chǎn))； 37 ℃ 恒溫箱(北京市永光明醫(yī)療儀器：303-O臺式培養(yǎng)箱)；科華SF-36WT洗板機(jī)(上海京工實(shí)業(yè)有限公司生產(chǎn))。

三、兩組研究對象的檢測方法

1.IGRA-ELISA檢測：使用肝素鋰抗凝的真空采血管空腹采集體積不低于4 ml的全血標(biāo)本,在2 h內(nèi)將全血標(biāo)本輕柔顛倒混勻后分裝到N、T、P 3個(gè)培養(yǎng)管中, 每個(gè)培養(yǎng)管中加入全血1 ml。N 為本底對照培養(yǎng)管, T 為添加了結(jié)核分枝桿菌特異性早期分泌靶蛋白6 (early-secreted antigenic target 6，ESAT6)和培養(yǎng)濾液蛋白10 (culture filtrate protein 10，CFP10)的測試培養(yǎng)管, P 為添加了非特異刺激原植物血球凝集素(PHA) 的陽性對照培養(yǎng)管。將全血顛倒混勻后迅速放入37 ℃ 恒溫培養(yǎng)箱, 直立, 靜置培養(yǎng)(22±2)h 后取出,1500×g離心10 min，收集上清液血漿,注意不可吸到細(xì)胞層，用ELISA雙抗體夾心法定量檢測IGRA含量,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作。結(jié)果判斷: 特異性抗原管(T)-本底對照管(N)≥14 pg/ml為陽性，說明結(jié)核感染的可能性很高。理論上每位受試者都能對非特異性刺激原PHA產(chǎn)生反應(yīng)。

2.金胺O熒光染色：用接種環(huán)挑取痰液中干酪樣膿樣或帶血小塊，制成厚涂片，自然干燥，染色前火焰固定。將制好的涂片用金胺O溶液染色，加溫促使菌體著色，3%鹽酸乙醇脫色，然后用高錳酸鉀溶液復(fù)染，置含有紫外光源的熒光顯微鏡下檢查，抗酸桿菌會(huì)發(fā)出閃亮的橘黃色。

3.結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)：結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)操作程序嚴(yán)格按照中國防癆協(xié)會(huì)基礎(chǔ)專業(yè)委員會(huì)編著的《結(jié)核病診斷實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)規(guī)程》[6]要求進(jìn)行，采用BACTEC MGIT 960系統(tǒng)對結(jié)核分枝桿菌進(jìn)行分離培養(yǎng)和藥物敏感性試驗(yàn)(簡稱“藥敏試驗(yàn)”)，以對硝基苯甲酸(PNB)、噻吩-2-羧酸肼(TCH)鑒別培養(yǎng)基初步鑒別結(jié)核分枝桿菌、牛分枝桿菌和非結(jié)核分枝桿菌。

4.PPD皮膚試驗(yàn)：所有研究對象在采血后,使用Mantoux法在前臂皮內(nèi)注射PPD 0.1 ml (5 IU),72 h檢測反應(yīng)結(jié)果，用直尺量取硬結(jié)平均直徑并記錄。若硬結(jié)平均直徑≥5 mm為陽性，≥15為強(qiáng)陽性，以紅腫硬結(jié)平均直徑≥15 mm作為判斷是否感染結(jié)核分枝桿菌的標(biāo)準(zhǔn)[7]。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用SPSS 13.0軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、活動(dòng)性肺結(jié)核組IGRA-ELISA法與細(xì)菌學(xué)方法檢測陽性率比較

根據(jù)細(xì)菌學(xué)檢查結(jié)果，以涂片陽性或分枝桿菌培養(yǎng)陽性為標(biāo)準(zhǔn)確定為細(xì)菌學(xué)檢查陽性，將活動(dòng)性肺結(jié)核組患者再分為菌陽和菌陰兩組。菌陽組(痰抗酸桿菌熒光染色陽性或培養(yǎng)陽性)48例，菌陰組(痰抗酸桿菌熒光染色和培養(yǎng)均陰性)102例；菌陽肺結(jié)核患者IGRA-ELISA法陽性率為95.8%(46/48)，菌陰肺結(jié)核患者IGRA-ELISA法陽性率為88.2%(90/102)，將兩組的IGRA-ELISA陽性率進(jìn)行對比分析，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.397，P>0.05)。

活動(dòng)性肺結(jié)核組中IGRA-ELISA法陽性率為90.7%(136/150),熒光染色法檢出陽性患者18例，陽性率為12.0%(18/150)，與IGRA-ELISA法陽性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=185.790，P<0.01)；分枝桿菌培養(yǎng)共檢出36例陽性患者，陽性率24.0%(36/180)，與IGRA-ELISA法陽性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=136.260，P<0.01)。

二、 IGRA-ELISA法與PPD皮膚試驗(yàn)在活動(dòng)性肺結(jié)核組和非結(jié)核組中的檢測結(jié)果比較

比較IGRA-ELISA法和PPD皮膚試驗(yàn)對150例活動(dòng)性肺結(jié)核組和180例非結(jié)核組的檢測結(jié)果，二者的敏感度分別為90.7%(136/150)和74.7%(112/150)，經(jīng)χ2檢驗(yàn)分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=13.420，P<0.01)；二者的特異度分別為85.0%(153/180)和48.3%(87/180)，經(jīng)χ2檢驗(yàn)分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=54.540，P<0.01)(表1)。

討 論

一、傳統(tǒng)PPD試驗(yàn)的弊端

分枝桿菌是一種細(xì)胞內(nèi)病原菌，容易激發(fā)患者體內(nèi)的細(xì)胞免疫，機(jī)體在感染后，一旦體內(nèi)變態(tài)反應(yīng)增強(qiáng)或機(jī)體抵抗力下降，就會(huì)發(fā)病從而引起相應(yīng)的臨床癥狀。因此評估患者的 T 淋巴細(xì)胞是否被結(jié)核分枝桿菌特異性抗原致敏是一種可行的早期診斷方法，IGRA-ELISA法和PPD皮膚試驗(yàn)都是基于這個(gè)原理設(shè)計(jì)的。但是傳統(tǒng)的PPD試驗(yàn)有很多弊端：其一, PPD試驗(yàn)對于免疫抑制的患者特別是合并HIV感染、重癥疾病者、年幼兒童及營養(yǎng)不良、器官移植者, 缺乏足夠的敏感度[8]；其二，PPD試驗(yàn)需要被試者做完皮試后回訪,以閱讀其結(jié)果,存在閱讀者主觀上的差異性。其三, PPD含有多種混合抗原,后者同時(shí)存在于結(jié)核分枝桿菌、卡介苗(BCG)和非結(jié)核分枝桿菌(NTM)中，PPD試驗(yàn)陽性無法區(qū)分是否曾經(jīng)接種BCG及是否接觸了環(huán)境分枝桿菌或感染了結(jié)核分枝桿菌而出現(xiàn)交叉反應(yīng), 容易出現(xiàn)假陽性率。我國是結(jié)核病高發(fā)的發(fā)展中國家，又是BCG廣泛接種地區(qū)，因此，PPD試驗(yàn)在我國用于結(jié)核病感染篩查受到很大的限制。

二、IGRA-ELISA技術(shù)原理

以T細(xì)胞免疫為基礎(chǔ)的IGRA-ELISA原理為:人體感染結(jié)核分枝桿菌后，產(chǎn)生記憶T淋巴細(xì)胞，當(dāng)再次受到結(jié)核分枝桿菌特異性抗原感染后，這些記憶T淋巴細(xì)胞增殖為效應(yīng)T淋巴細(xì)胞，效應(yīng)T淋巴細(xì)胞會(huì)分泌各種細(xì)胞因子，主要為γ-干擾素，故檢測血中γ-干擾素水平就可檢測機(jī)體中效應(yīng)T淋巴細(xì)胞的水平，據(jù)此就可判斷機(jī)體是否感染結(jié)核分枝桿菌。IGRA中結(jié)核特異性抗原ESAT6和CFP10是由Mtb基因組RD1區(qū)編碼的低分子質(zhì)量蛋白, 只存在于Mtb復(fù)合群中, 而在BCG和大部分NTM中缺乏[9]。因此，與PPD試驗(yàn)相比，IGRA最大的優(yōu)勢就是能區(qū)分結(jié)核分枝桿菌感染和BCG接種引起的免疫應(yīng)答，顯著提升了檢測特異性。李兵等[10]、白雪娟等[11]的研究表明，對PPD試驗(yàn)和IGRA-ELISA檢測均為陰性的受試者進(jìn)行BCG接種，PPD試驗(yàn)結(jié)果隨時(shí)間延長均變?yōu)殛栃裕鳬GRA-ELISA結(jié)果仍為陰性，進(jìn)一步證實(shí)了IGRA-ELISA在診斷結(jié)核感染方面特異性優(yōu)于PPD試驗(yàn)。

表1 IGRA-ELISA與PPD試驗(yàn)的檢測結(jié)果比較

注 敏感度=真陽性人數(shù)/(真陽性人數(shù)+假陰性人數(shù))×100% 特異度=真陰性人數(shù)/(真陰性人數(shù)+假陽性人數(shù)))×100%

三、IGRA-ELISA檢測結(jié)果分析

本試驗(yàn)用IGRA-ELISA和PPD試驗(yàn)平行檢測330例受試者外周血中γ-干擾素釋放含量,IGRA-ELISA法敏感度和特異度分別為90.7%和85.0%，PPD試驗(yàn)檢測的敏感度和特異度分別為74.7%和48.3%，該結(jié)果顯示IGRA-ELISA法檢測結(jié)核分枝桿菌的敏感度和特異度均高于PPD試驗(yàn)(P<0.01),可以更有效地篩查結(jié)核感染，與國內(nèi)外報(bào)道一致[12-14]。

痰檢對結(jié)核分枝桿菌感染的診斷具有非常重要的意義，找到抗酸桿菌是診斷結(jié)核病的“金標(biāo)準(zhǔn)”。然而，結(jié)核病的早期診斷涂片鏡檢雖然取樣方便，但是敏感度低且易受非結(jié)核分枝桿菌等其他抗酸桿菌的影響，臨床實(shí)踐中常存在著漏檢現(xiàn)象；分枝桿菌培養(yǎng)法特異度高但敏感度低，且培養(yǎng)時(shí)間較長，易導(dǎo)致患者的早期診斷被延誤，尤其是菌陰肺結(jié)核和肺外結(jié)核的延遲診斷率更高。本研究對細(xì)菌學(xué)方法與IGRA-ELISA進(jìn)行比較分析，活動(dòng)性肺結(jié)核組中IGRA-ELISA法陽性率為90.7%，遠(yuǎn)高于涂片染色陽性率(12.0%)和分離培養(yǎng)陽性率(24.0%)，經(jīng)卡方檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；且IGRA-ELISA法特異度高達(dá)85.0%，表明該方法可以彌補(bǔ)細(xì)菌學(xué)敏感度低的缺陷。進(jìn)一步分析表明，菌陽肺結(jié)核患者IGRA法陽性率為95.8%(46/48),菌陰肺結(jié)核患者IGRA法陽性率為88.2%(90/102)，二者的陽性率都接近90.0%，且兩者的檢測結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。該結(jié)果表明：相比細(xì)菌學(xué)檢查，IGRA-ELISA法操作更簡捷，診斷時(shí)間明顯縮短，大大降低了細(xì)菌學(xué)診斷延誤率，在診斷菌陰肺結(jié)核時(shí),IGRA-ELISA可發(fā)揮其輔助診斷作用。此外，由于結(jié)核抗原特異性T細(xì)胞有向病變部位集中的趨勢, IGRA-ELISA技術(shù)的檢測物已不僅局限于靜脈血, 支氣管肺泡灌洗液、痰液、胸腔積液、腹腔積液、腦脊液等也可用于對肺結(jié)核及肺外結(jié)核的診斷[15]。

綜上所述，IGRA-ELISA對篩查結(jié)核感染有較好的應(yīng)用價(jià)值，尤其對于缺乏細(xì)菌學(xué)診斷依據(jù)的菌陰肺結(jié)核和肺外結(jié)核，有很好的輔助診斷價(jià)值。因此，IGRA-ELISA在臨床上可以作為結(jié)核病診斷金標(biāo)準(zhǔn)之外的一個(gè)非常有效的輔助診斷方法。但是, 當(dāng)前對γ-干擾素釋放試驗(yàn)特異性研究的數(shù)據(jù)及樣本量較小,且存在一定的假陰性率，需要進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量進(jìn)行驗(yàn)證，分析導(dǎo)致假陰性結(jié)果的原因，在技術(shù)、方法上還需進(jìn)一步完善。

[1] 全國第五次結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查技術(shù)指導(dǎo)組，全國第五次結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查辦公室.2010年全國第五次結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查報(bào)告.中國防癆雜志，2012,34(8):485-508.

[2] Diel R，Loddenkemper R，Nienhaus A. Evidence-based compari-son of commercial interferon-γ release assays for detecting active TB: a meta analysis. Chest，2010,137(4):952-968．

[3] Lalvani A. Diagnosing tuberculosis infection in the 21st century:new tools to tackle an old enemy. Chest,2007,131(6):1898-1906.

[4] 吳雪瓊，梁艷，王國治.γ干擾素釋放試驗(yàn)臨床應(yīng)用的價(jià)值、問題與展望.中國防癆雜志，2015,37(7): 722-725.

[5] 中華醫(yī)學(xué)會(huì).臨床診療指南 結(jié)核病分冊. 北京:人民衛(wèi)生出版社，2006:121-122.

[6] 中國防癆協(xié)會(huì)基礎(chǔ)專業(yè)委員會(huì).結(jié)核病診斷實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)規(guī)程.北京:中國教育文化出版社，2006:46-65.

[7] 戰(zhàn)云飛，劉風(fēng)霞，楊效光，等.結(jié)核診斷指標(biāo)在診斷肺結(jié)核中的臨床意義.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2013,23(21)：5369-5371.

[8] 熊勇超，侯月云，趙建忠，等.γ干擾素釋放試驗(yàn)在檢測結(jié)核分枝桿菌潛伏感染中的應(yīng)用.中國防癆雜志,2012,34(9):613-616.

[9] 中華醫(yī)學(xué)會(huì)結(jié)核病學(xué)分會(huì)，《中華結(jié)核和呼吸雜志》編輯委員會(huì).γ-干擾素釋放試驗(yàn)在中國應(yīng)用的建議.中華結(jié)核和呼吸雜志，2014, 37(10): 744-747.

[10] 李兵，陳獻(xiàn)雄，楊倩婷,等.卡介苗對結(jié)核分枝桿菌γ-干擾素酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測法的影響.臨床肺科雜志，2010,15(7): 955-956.

[11] 白雪娟，梁艷，陽幼榮，等.卡介苗接種對酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)檢測結(jié)核分枝桿菌感染的影響.中國防癆雜志，2015,37(7):753-756.

[12] Nishimura T, Hasegawa N, Mori M, et al.Accuracy of an interferon gamma release assay to detect active pulmonary and extra-pulmonary tuberculosis. Int J Tuberc Lung Dis, 2008,12(3):269-274.

[13] Lalvani A, Pathan AA, McShane H,et al.Rapid detection ofmycobacteriumtuberculosisinfection by enumeration of antigen-specific T cells. Am J Respir Crit Care Med,2001,163(4):824-828.

[14] 李曉飛，趙勤，汪亞玲,等.兩種結(jié)核分枝桿菌相關(guān)γ-干擾素定量檢測試劑盒檢測結(jié)核分枝桿菌感染結(jié)果比較研究.中國防癆雜志，2011,33(5):267-270.

[15] 張麗帆,劉曉清. γ干擾素釋放分析T-SPOT.TB診斷結(jié)核感染臨床應(yīng)用進(jìn)展.中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào),2009,31(4):506-510.

(本文編輯：王然 薛愛華)

Clinical application value of the whole blood interferon gamma release assay in the infection of Mycobacterium tuberculosis

MENG Su-kai，WU Zhen-ping, ZHONG Da.

Tianjin Center For Tuberculosis Control, Tianjin 300041, China

MENG Su-kai,Email： xuetu160007@163.com

Objective To investigate the diagnostic value of the whole blood interferon gamma release assay (IGRA) to the infection ofMycobacteriumtuberculosis(Mtb). Methods From Jun 2014 to Nov 2014,a total of 330 patients in Tianjin center for tuberculosis control were enrolled in this prospective study,from which active TB were diagnosed in 150 patients and non-TB with respiratory diseases were diagnosed in 180 patients. Each patient was tested by IGRA-ELISA，PPD，fluorescence staining and mycobacterial culture.The statistic analyses were performed using SPSS 13.0, the chi-square test was used to assess the difference between rates,P<0.05 was considered to be significantly different. Results The sensitivity and specificity of IGRA-ELISA and PPD were 90.7% (136/150) and 74.7% (112/150), 85.0% (153/180) and 48.3% (87/180), respectively．There were significant difference between them (χ2=13.420，P<0.01；χ2=54.540，P<0.01). In 150 active pulmonary tuberculosis patients, the positive rate of IGRA-ELISA were 90.7%,which was higher than fluorescence staining 12.0% (18/150) and mycobacteria culture 24.0% (36/150). The positive rate of IGRA-ELISA in bacteriological-positive and bacteriological-negative pulmonary tuberculosis were 95.8% (46/48) and 88.2% (90/102)，there was no significant difference between them (χ2=0.397，P>0. 05). Conclusion IGRA-ELISA which has a high sensitivity and specificity is easy to perform.It can be used in the diagnosis of tuberculosis infection, especially in the diagnosis of smear and culture negative pulmonary tuberculosis patients and extra-pulmonary tuberculosis patients.

Interferon-gamma release tests； Tuberculosis, pulmonary/diagnosis; Enzyme-linked immunosorbent assay

10.3969/j.issn.1000-6621.2015.12.009

300041 天津結(jié)核病控制中心檢驗(yàn)科(孟蘇凱、吳振萍)，肺內(nèi)科門診(鐘達(dá))

孟蘇凱，Email:xuetu160007 @163.com

2015-06-30)