奶牛隱性乳房炎的快速診斷及用藥篩選

陳長生

(新疆塔城地區(qū)畜牧科技研究推廣中心，新疆 塔城市834700)

奶牛隱性乳房炎以其無明顯臨床癥狀，乳汁眼觀無異常變化，但乳腺組織已發(fā)生病理變化，乳中體細(xì)胞數(shù)明顯增加，泌乳量減少，嚴(yán)重的導(dǎo)致泌乳功能喪失為特點。因此，只有根據(jù)本場實際情況，建立一整套確實有效的診療程序，才是解決問題的關(guān)鍵。

1 材料與方法

1.1 材料

乳樣: 采自本地區(qū)某集約化奶牛養(yǎng)殖場(200份) 。培養(yǎng)基: 按常規(guī)制作方法制成普通瓊脂平板。藥敏紙片: 青霉素、氨芐西林、阿莫西林、頭孢唑啉、慶大霉素、鏈霉素、羅紅霉素、卡那霉素、紅霉素、四環(huán)素、痢特靈、環(huán)丙沙星(均按標(biāo)準(zhǔn)配制) 。

主要儀器: 培養(yǎng)箱、潔凈工作臺、電子天平、高壓滅菌鍋、冰箱、試管、檢驗盤、培養(yǎng)皿、酒精燈、玻璃棒、移液器、尺子等。

治療藥物: 注射用氨芐西林鈉、注射用乳糖酸紅霉素、硫酸慶大霉素注射液。

1.2 方法

1.2.1 奶樣采集

先用溫水將乳房擦洗干凈，后用0.2%新潔爾滅擦洗乳房，再用75%的酒精消毒乳頭，擠棄頭三把奶，然后以無菌操作方法每頭奶牛取奶樣約10 mL，立即注入備好的無菌瓶內(nèi)，封蓋、標(biāo)號，4℃條件下保存、待用。

1.2.2 檢驗試劑的配制

SMT(上海乳房炎檢驗法) 試劑(購自于上海光明乳業(yè)股份有限公司) ; H2O2(雙氧水) 試劑、NaOH(苛性鈉) 試劑、BTB(溴麝香草酚藍/溴百里酚藍) 試劑參照［1］。

1.2.3 快速診斷試驗

SMT 檢驗法: 將2 mL 被檢乳置于塑料乳房炎檢驗盤中，再加入試劑2 mL，緩慢做同心圓狀攪拌10 s 觀察。判定標(biāo)準(zhǔn)見［1］。

H2O2玻片法: 將載玻片置于白色襯墊物上，滴被檢乳一滴，再加H2O2一滴，混合均勻，靜置2 min 觀察。判定標(biāo)準(zhǔn)見［1］。

NaOH 凝乳檢驗法: 將載玻片置于黑色襯墊物上，加被檢乳5 滴，再加4%NaOH 溶液2 滴，用細(xì)玻棒或火柴梗迅速攪拌，使其擴散成直徑2.5 cm的圓形，并繼續(xù)攪拌20 ～25 s 觀察(此法不適合檢驗泌乳初期及接近干乳期的乳)。判定標(biāo)準(zhǔn)見［1］。

BTB 法: 先取被檢乳5 mL 放入試管內(nèi)，在加BTB 試劑1 mL，觀察接觸面。判定標(biāo)準(zhǔn)見［1］。

1.2.4 奶樣處理

隨機抽取乳房炎奶樣8 份，在無菌條件下，用生理鹽水按10%的比例稀釋。

1.2.5 藥敏試驗(平板紙片法)

用微量移液器吸取10 μL 稀釋的乳液均勻涂于培養(yǎng)基(平皿使用前在溫箱中放置1 h，然后在室溫下放置一段時間，使表面液體略干燥) ，再用滅菌鑷子將藥敏片貼于平皿內(nèi)，將平皿倒置于37℃的溫箱中培養(yǎng)24 h，然后用尺子測量抑菌圈直徑。

1.2.6 治療

隨機抽取患病牛24 頭，每組8 頭，分別用以下藥物治療。

①經(jīng)乳腺導(dǎo)管向乳房內(nèi)注入注射用氨芐西林鈉。一次200 mg/乳室，1 次/d，連用3 ～5 d。重癥用量加倍。②經(jīng)乳腺導(dǎo)管向乳房內(nèi)注入注射用乳糖酸紅霉素。一次200 mg/乳室，1 次/d，連用3～5 d。③經(jīng)乳腺導(dǎo)管向乳房內(nèi)注入硫酸慶大霉素注射液。一次200 mg/乳室，2 次/d，連用2 ～3 d。乳房內(nèi)注入時，將乳頭管口用酒精棉球擦拭消毒，注入后輕揉幾下乳頭，有利于藥物吸收。

1.2.7 治療效果評定

治療5 d 后，采患畜奶樣，采用SMT 檢驗法，判定治療效果。

2 結(jié)果

2.1 快速診斷試驗結(jié)果(見表1)

表1 4 種快速診斷結(jié)果

2.2 藥敏試驗結(jié)果(見表2)

表2 藥敏試驗情況

2.3 治療結(jié)果(見表3)

表3 藥物治療效果

3 分析與討論

3.1 陽性檢驗調(diào)查情況

表4 4 種檢驗法的結(jié)果對比

通過幾種診斷方法比較，SMT、H2O2法陽性率較高，NaOH、BTB 法較低。確定SMT、H2O2法在試驗中的陽性顯著，但是SMT 診斷液相對昂貴，建議在檢測奶牛乳房炎時用H2O2法。

乳房炎是當(dāng)今世界奶牛業(yè)中最常見和造成損失最大的一種疾病。隱性型乳房炎發(fā)病率高且不易發(fā)現(xiàn)，因此及時準(zhǔn)確地作出早期診斷意義重大。只有根據(jù)本場的實際情況，建立一整套確實有效的診斷程序，才是解決問題的關(guān)鍵。

3.2 藥敏試驗

8 個病例中的病原菌對氨芐西林、紅霉素、慶大霉素敏感; 對環(huán)丙沙星、卡那霉素中敏; 對其它藥物相對不敏感。藥敏實驗結(jié)果同殷波等［2］報道結(jié)果，病原菌對氨芐西林敏感。

3.3 治療情況

分別使用氨芐西林、紅霉素、慶大霉素這三種藥物治療乳房炎，氨芐西林的治療效果最好，治愈率達75%。該牛場治療乳房炎有效藥物為氨芐西林。

對奶牛乳房炎應(yīng)采取綜合防治，以防為主，防治結(jié)合，加強飼養(yǎng)管理、搞好畜舍衛(wèi)生。根據(jù)本場實際建立一整套的預(yù)防程序，加強技術(shù)人員的培訓(xùn)，減少乳房炎的感染幾率。對牛群進行定期檢查，詳細(xì)記錄檢查結(jié)果，根據(jù)實際情況及時治療。

［1］趙興緒.獸醫(yī)產(chǎn)科學(xué)實習(xí)指導(dǎo)［M］.北京: 中國農(nóng)業(yè)出版社，2002.

［2］殷波，熊焰.臨床型奶牛乳房炎病原分離鑒定及藥敏試驗.黑龍江畜牧獸醫(yī).2006，2: 61-62.

［3］蔣春茂，周新民，周廣生，等.奶牛乳房炎研究進展［J］.中國畜牧獸醫(yī)，2004，31(5) : 36-37.

［4］何振華，歐陽昌勇，何德肆.新建奶牛場乳房炎調(diào)查［J］.湖南畜牧獸醫(yī)，2005(5) : 29-30.

［5］陸承平.獸醫(yī)微生物學(xué)實驗指導(dǎo)［M］.北京: 中國農(nóng)業(yè)出版社，2001.