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    血清自身抗體和抗核抗體檢測在自身免疫性肝病診斷中的價(jià)值

    2015-04-04 05:40:34歐陽艷君
    實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志 2015年23期

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    血清自身抗體和抗核抗體檢測在自身免疫性肝病診斷中的價(jià)值

    歐陽艷君

    (遼寧省盤錦市遼河油田總醫(yī)院 消化內(nèi)科, 遼寧 盤錦, 124010)

    關(guān)鍵詞:自身免疫性肝病; 自身免疫性肝炎; 原發(fā)性膽汁性肝硬化; 原發(fā)性硬化性膽管炎

    自身免疫性肝病(ALD)是因過度自身免疫反應(yīng)造成的一類肝臟疾病,發(fā)病機(jī)制尚不明確,臨床主要包括自身免疫性肝炎(AIH)、原發(fā)性膽汁性肝硬化(PBC)及原發(fā)性硬化性膽管炎(PSC),前者主要表現(xiàn)為肝細(xì)胞受累壞死,后二者主要為肝外膽管細(xì)胞受累[1], 3種疾病均可進(jìn)展為肝硬化,甚至肝癌[2]。因此合適的自身抗體檢查,及時(shí)并準(zhǔn)確診斷該類疾病,對(duì)患者的治療及預(yù)后有重要意義。本研究檢測自身免疫性肝病患者的部分自身相關(guān)抗體,包括抗平滑肌抗體(ASMA)、抗核抗體(ANA)、抗線粒體抗體(AMA),探討3者在ALD診斷中的價(jià)值,現(xiàn)報(bào)告如下。

    1資料與方法

    選取2013年4月-2015年4月在遼寧省盤錦市遼河油田總醫(yī)院住院的經(jīng)病理檢查確診的ALD患者132例設(shè)為ALD組,均符合2011年中華醫(yī)學(xué)會(huì)風(fēng)濕病學(xué)分會(huì)制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]。排除標(biāo)準(zhǔn)[4]: ① 合并丙型肝炎病毒(HCV)、戊型肝炎病毒(HEV)、艾滋病病毒(HIV)等病毒感染者; ② 合并自身免疫性疾病如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)等患者; ③ 近期內(nèi)接受過透析治療、輸血、服用抗凝藥等患者。其中男58例,女74例,年齡18~66歲,平均(36.6±10.4)歲;AIH患者49例,PBC患者55例,PSC患者28例。同時(shí)選取50例未累及肝臟的其他自身免疫病的患者作為非ALD組,50例同期健康體檢者為對(duì)照組,男女各半,年齡16~70歲,平均(38.4±12.1)歲。3組年齡、性別等一般資料可比(P>0.05)。

    3組均于入院后抽取靜脈血分離血清,以1∶100稀釋,采用間接免疫熒光法檢測血清ANA、ASMA、AMA。嚴(yán)格根據(jù)肝臟馬賽克間接免疫熒光法檢測試劑盒(德國歐盟公司)操作說明書,以HEP-2細(xì)胞及大鼠肝、腎和胃組織的冰凍切片作抗原。室溫下,抗原與血清共孵育30 min,加入異硫氰酸熒光素(FITC)標(biāo)記的第二抗體,室溫孵育30 min,清洗,甘油封片,熒光顯微鏡觀察結(jié)果。

    使用EURO LineScan軟件(德國歐蒙公司)自動(dòng)判讀標(biāo)本的陰陽性和著色強(qiáng)度,結(jié)果由2位不知情資深醫(yī)師共同分析。

    2結(jié)果

    2.13組抗ANA、ASMA、AMA陽性檢出率比較

    ALD組ANA陽性數(shù)92例,陽性率69.70%(92/132); ASMA陽性數(shù)36例,陽性率為19.70%(26/132);AMA陽性數(shù)59例,陽性率為44.70%(59/132)。非ALD組ANA陽性16例,陽性率為32.00%(16/50);對(duì)照組ANA陽性2例,陽性率為4.00%(2/50);非ALD組及對(duì)照組ASMA、AMA的陽性檢出率均為0%。ALD組ANA陽性率顯著高于非ALD組與對(duì)照組(P<0.01)。

    2.2ALD組3種患者ANA、ASMA、AMA陽性

    檢出率比較

    AIH患者ANA陽性表達(dá)率為81.63%(40/49),以胞漿顆粒型為主,少部分具有核點(diǎn)型、核顆粒型等;PBC患者ANA陽性率83.64%(46/55),可見核膜型、核仁型、均質(zhì)型、胞漿纖維型及混合型等;PSC患者ANA陽性率較低,為21.43%(6/28)。核型多為核顆粒、核均質(zhì)型。AIH、PBC患者ANA陽性率差異顯著(P<0.01),且二者均顯著高于PSC患者(P<0.01)。PSC患者ANA陽性率與非ALD組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

    AIH、PBC、PSC患者ASMA陽性檢出率分別為53.06%(26/49)、18.18%(10/55)、0%; AMA陽性檢出率分別為16.33%(8/49)、92.73%(51/55)及0%。AIH患者ASMA陽性檢出率顯著高于PBC患者(P<0.01)、AMA陽性檢出率顯著低于后者(P<0.01)。

    2.3ANA與ASMA、AMA聯(lián)合檢測診斷的

    靈敏性與特異性

    ANA與ASMA聯(lián)合檢測對(duì)AIH的檢出率最高;ANA與AMA聯(lián)合檢測對(duì)PBC的檢出率最高。以非ALD組為參照, ANA與ASMA單獨(dú)和聯(lián)合應(yīng)用對(duì)AIH診斷的靈敏度分別為80.40%、66.26%、89.42%; 特異性分別為90.22%、78.30%、92.22%。ANA與AMA單獨(dú)和聯(lián)合應(yīng)用對(duì)PBC診斷的靈敏度分別為83.64%、58.18%、92.73%,特異性分別為89.53%、95.06%、96.25%。

    3討論

    ALD是由自身免疫反應(yīng)引起的病理機(jī)制不明性肝臟綜合征,主要包括AIH、PBC、PSC及這3種肝病并發(fā)的重疊綜合征。ALD自身抗體檢測及肝組織特征檢查對(duì)其鑒別診斷、治療以及發(fā)病機(jī)制的研究中具有重要作用[5-6]。AIH在中、青年女性人群中發(fā)病率較高[7],病情易進(jìn)展為肝硬化,死亡率極高,因此早期診斷和阻斷病情進(jìn)展十分重要。國際自身免疫性肝炎小組[8]根據(jù)AIH患者血清中自身抗體種類,將其分為3種亞型,其中ANA、ASMA陽性為主要特征I型,抗肝腎微??贵wI型抗體、抗肝細(xì)胞溶質(zhì)抗原Ⅰ型抗體陽性為主要特征的Ⅱ型,以及血清中抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗體陽性的Ⅲ型。

    ANA可見于多種結(jié)締組織疾病和其他自身免疫性疾病,對(duì)AIH的診斷不具有特異性。ASMA靶抗原分為肌動(dòng)蛋白和非肌動(dòng)蛋白,對(duì)I型AIH的診斷有重要意義。研究[9]表明,血清抗體檢查同時(shí)出現(xiàn)高滴度ASMA與ANA,AIH診斷率達(dá)100%。本研究中,AIH患者ASMA、ANA的檢出率分別為53.06%、81.63%明顯高于非ALD組患者,且二者聯(lián)合檢測AIH診斷率提高至89.42%, 特異性為92.22%,表明ANA聯(lián)合ASMA檢測可準(zhǔn)確診斷AIH,與李曄[10]的研究結(jié)果一致。

    PBC是一種慢性肝內(nèi)膽汁淤積性疾病,中老年女性人群中發(fā)病率較高,確診時(shí)多數(shù)患者已到晚期。有研究[11]報(bào)道PBC多種自身抗體檢測中,ANA陽性率最高,核型主要以胞漿顆粒為主,其次為核點(diǎn)型。本研究PBC患者ANA陽性率83.64%, 顯著高于非ALD組,可見核膜型、核仁型、均質(zhì)型、胞漿纖維型及混合型等,與上述研究一致。美國肝病學(xué)會(huì)PBC診斷指導(dǎo)認(rèn)為AMA陽性是PBC重要的免疫學(xué)診斷指標(biāo),研究[12]表明95.00%以上的PBC患者AMA檢測為陽性。本研究PBC患者AMA陽性率92.73%,略低于該值,可能是因?yàn)闃?biāo)本量過小造成的。而本研究ANA與AMA聯(lián)合檢測對(duì)PBC診斷的靈敏度提高至92.73%,特異性為96.25%,表明ANA聯(lián)合AMA檢測可準(zhǔn)確診斷AIH,與李曄[13]的結(jié)果一致。

    PSC主要以膽汁淤積綜合征為主,ANA陽性率較低,其他抗體檢測的陽性率也不高,并且特異性不強(qiáng)[14]。本研究中,PSC患者ANA陽性率為21.43%,與非ALD組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;ASMA、AMA的陽性率為0%。結(jié)果提示自身抗體檢測無法作為PSC診斷的可靠依據(jù)。這一結(jié)果的原因,一方面可能由于納入的PSC病例數(shù)太少,另一方面可能是本研究所選擇的自身抗體指標(biāo)有限,因此對(duì)PSC還有待進(jìn)一步研究。

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    基金項(xiàng)目:中國高校醫(yī)學(xué)期刊臨床專項(xiàng)資金(11520899)

    收稿日期:2015-05-10

    中圖分類號(hào):R 575

    文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

    文章編號(hào):1672-2353(2015)23-191-02DOI: 10.7619/jcmp.201523075

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