扶芳藤益心方、益心方及扶芳藤對(duì)小鼠急性毒性影響試驗(yàn)*

李成林 江會(huì)鎮(zhèn) 陳博靈 湖北中醫(yī)藥大學(xué) (武漢 430065)

扶芳藤益心方、益心方及扶芳藤對(duì)小鼠急性毒性影響試驗(yàn)*

李成林 江會(huì)鎮(zhèn)△陳博靈▲湖北中醫(yī)藥大學(xué) (武漢 430065)

目的：觀察扶芳藤益心方、益心方及扶芳藤灌胃的急性毒性反應(yīng)。方法：將80只小鼠分為扶芳藤益心方組、益心方組、扶芳藤組、正常對(duì)照組，每組20只，雌雄各半。扶芳藤益心方組給予2.78g/mL扶芳藤益心方醇提物藥液；益心方給予1.79g/mL益心方醇提物藥液；扶芳藤組給予3.07g/mL扶芳藤醇提物藥液；正常對(duì)照組給予蒸餾水。依40mL/kg的給藥量(最大給藥量)灌胃給藥，對(duì)小鼠進(jìn)行一次性灌胃給藥的急性毒性試驗(yàn)。觀察小鼠異常或不良反應(yīng)、死亡及主要臟器異常病變。結(jié)果：扶芳藤益心方組及扶芳藤組小鼠給藥后出現(xiàn)靜伏少動(dòng)、腹式呼吸癥狀，給藥5h后上述癥狀消失。余2組未見其他異?；虿涣挤磻?yīng)。各組均無小鼠死亡，14d后處死解剖未見主要臟器異常病變。結(jié)論：扶芳藤益心方醇提物小鼠一次性灌胃的最大給藥量為111.2g/kg，相當(dāng)于擬臨床人用藥的115倍，急性毒性小，使用較安全；益心方醇提物小鼠一次性灌胃的最大給藥量為71.6g/kg，相當(dāng)于擬臨床日用劑量153倍，急性毒性小，使用較安全；扶芳藤醇提物小鼠一次性灌胃的最大給藥量為122.8g/kg，相當(dāng)于擬臨床人用藥的246倍，急性毒性小，使用較安全。

扶芳藤益心方是筆者多年臨床運(yùn)用的中藥復(fù)方，該方由扶芳藤、紅參、三七、石菖蒲等組成，在治療冠心病心絞痛方面療效顯著[1]。參照《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范》(GLP)，對(duì)扶芳藤益心方及其拆方扶芳藤和益心方的藥品安全性進(jìn)行小鼠急性毒性試驗(yàn)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料和方法 1.1動(dòng) 物 昆明小鼠，18～22g，雌、雄各半，SPF級(jí)，購于廣西醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，許可證號(hào)：SCXKG桂2009-0002。

1.2 供試藥物 扶芳藤益心方醇提物稠膏，每克膏含總藥材3.54g；益心方醇提物稠膏，每克膏含總藥材1.92g；扶芳藤醇提物稠膏，每克膏含總藥材4.52g。以上藥物均于廣西中醫(yī)藥大學(xué)制藥廠制劑室提純，原藥材由南寧市景昌中藥飲片有限公司提供，許可證號(hào)：桂20110150。試驗(yàn)時(shí)用蒸餾水配制成能通過12號(hào)小鼠灌胃針的最大給藥量供小鼠灌胃。得到扶芳藤益心方醇提物藥液濃度為2.78g/mL；益心方醇提物藥液濃度為1.79g/mL；扶芳藤醇提物藥液濃度為3.07g/mL。

1.3 試驗(yàn)方法 1.3.1預(yù)實(shí)驗(yàn)：取禁食不禁水14h以上的小鼠雌雄各20只。分為扶芳藤益心方預(yù)實(shí)驗(yàn)組、益心方預(yù)實(shí)驗(yàn)組、扶芳藤預(yù)實(shí)驗(yàn)組、正常對(duì)照預(yù)實(shí)驗(yàn)組，每組雌雄各5只。扶芳藤益心方預(yù)實(shí)驗(yàn)組給予扶芳藤益心方醇提物藥液；益心方預(yù)實(shí)驗(yàn)組給予益心方醇提物藥液；扶芳藤預(yù)實(shí)驗(yàn)組給予扶芳藤醇提物藥液；正常對(duì)照預(yù)實(shí)驗(yàn)組給予蒸餾水。依40mL/kg的給藥量灌胃給藥，觀察1周，小鼠無一死亡，無法按照常規(guī)測定LD50，故進(jìn)行最大給藥量測定。

1.3.2 最大給藥量測定：選取健康小鼠80只，雌雄各半，隨機(jī)分為扶芳藤益心方組、益心方組、扶芳藤組、正常對(duì)照組，共4組，每組20只，雌、雄各半。各組小鼠平均體重，差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。小鼠禁食不禁水14h后，給予扶芳藤益心方組2.78g/mL扶芳藤益心方醇提物藥液；益心方組1.79g/mL益心方醇提物藥液；扶芳藤組3.07g/mL扶芳藤醇提物藥液；正常對(duì)照組蒸餾水。按40mL/Kg的最大給藥量灌胃給藥，給藥后小鼠正常飼養(yǎng)。觀察小鼠的活動(dòng)、飲食、皮毛、糞便等有無異常改變。觀察有無中毒癥狀及死亡，連續(xù)觀察2周。與給藥后1周和給藥后2周各復(fù)稱重一次，給藥2周稱重后，處死小鼠進(jìn)行解剖，觀察主要臟器有無異常變化。

2 結(jié) 果 扶芳藤益心方組及扶芳藤組小鼠給藥后出現(xiàn)靜伏少動(dòng)、腹式呼吸癥狀，給藥5h后上述癥狀消失。余2組活動(dòng)、飲食、皮毛、二便等未見其他異?；虿涣挤磻?yīng)。各組均無小鼠死亡，觀察14d中各組體重增長情況見表1。14d后處死解剖未見主要臟器異常病變。扶芳藤益心方醇提物小鼠一次性灌胃的最大給藥量為111.2g/Kg，相當(dāng)于擬臨床人用藥的115倍；益心方醇提物小鼠一次性灌胃的最大給藥量為71.6g/Kg，相當(dāng)于擬臨床日用劑量153倍；扶芳藤醇提物小鼠一次性灌胃的最大給藥量為122.8g/Kg，相當(dāng)于擬臨床人用藥的246倍。

表1 各組小鼠體重增長率表

組 別劑量(kg)動(dòng)物數(shù)(只)給藥后7d體重增長率(%)給藥后14d體重增長率(%)空白對(duì)照組等體積蒸餾水2040.667.1扶芳藤益心方組111.22043.374.1益心方組71.62042.268.2扶芳藤組122.82043.270.1

扶芳藤益心方醇提物小鼠一次性灌胃的最大給藥量為111.2g/Kg；益心方醇提物小鼠一次性灌胃的最大給藥量為71.6g/Kg，；扶芳藤醇提物小鼠一次性灌胃的最大給藥量為122.8g/Kg。除扶芳藤益心方及扶芳藤給藥后小鼠有一過性的靜伏少動(dòng)，腹式呼吸外，無明顯其它不適。表明扶芳藤益心方、扶芳藤小鼠最大給藥量下急性毒性小，使用較安全；益心方小鼠最大給藥量下急性毒性小，使用安全。

3 討 論 扶芳藤益心方中，扶芳藤、人參、三七、石菖蒲均為公藥，其中君藥扶芳藤是特色壯藥，《中國壯醫(yī)學(xué)》載：“扶芳藤，辛、平，能通火路、龍路，舒筋脈，止出血，散瘀血，補(bǔ)虛?！薄吨兴幋筠o典》記載:扶芳藤能“補(bǔ)腎強(qiáng)筋，安胎，止血消瘀”。謝金鮮等研究單味扶芳藤對(duì)心血管時(shí)發(fā)現(xiàn)，扶芳藤可延長小鼠心肌缺血的存活時(shí)間，抑制血栓形成，改善去甲腎上腺素(NA)所致的腸系膜微循環(huán)障礙，并可擴(kuò)張耳廓微血管[2]。臣藥人參，味甘、微苦,性平,入肺、脾、心經(jīng)，《神農(nóng)本草經(jīng)》指出：“人參有‘補(bǔ)五臟、安精神、定魂魄、止驚悸、除邪氣、明目開心益智’的功效。付雙全歸納了人參對(duì)心血管系統(tǒng)作用的藥理學(xué)機(jī)制有：改善血流動(dòng)力學(xué)、抗氧化抑制心肌細(xì)胞凋亡、抑制心肌肥大、改善心室重構(gòu)、降壓、改善血管內(nèi)皮功能、抗心律失常、改善高脂血癥、保護(hù)心源性休克等[3]。三七總皂苷是三七主要生理活性成分，能有效地有利于血液流變學(xué)的正常功能，保證正常血黏度，防止血栓形成，改善微循環(huán)[4]。石菖蒲可降低血黏度、抑制血小板活性；可降血脂、抗血小板聚集、抗血栓形成[4,5]。實(shí)驗(yàn)為以上三種制劑的安全性提供可靠依據(jù)，亦為下一步含藥血清制備提供了參考。

[1] 李成林,陳博靈,潘朝鋅,等.扶芳藤益心湯對(duì)氣虛血瘀型胸痹的臨床研究[J].廣西中醫(yī)藥，2013，37(4)：19-21.

[2] 謝金鮮,林啟云,班步陽.扶芳藤對(duì)心血管作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].廣西中醫(yī)藥,1999, 22(5): 51-53.

[3] 付雙全.人參的心血管作用藥理學(xué)研究進(jìn)展[J].長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2012,28(2):357-359.

[4] 方永奇,李 翎,吳啟端,等.β-細(xì)辛醚和冰片對(duì)大鼠缺血再灌注 腦損傷的保護(hù)作用[J].現(xiàn)代老年醫(yī)學(xué)與保健,2002,11(2):15- 81.

[5] PoplawskiJ,LozowickaB,DubisAT,et al.Synthesis and hypolipidemic and antiplatelet activities of alpha-asarone isomers in humans (in vitro),mice(invivo),andrats(invivo)[J].JMedChem,2000,43(20):3671-3674.

(收稿2014- 10-13；修回2014-11-12)

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@扶芳藤益心方 扶芳藤 動(dòng)物，實(shí)驗(yàn) 小鼠

R271.11

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2015.02.059

*廣西衛(wèi)生廳壯瑤藥醫(yī)藥研究與開發(fā)(GZZY13-18)

△廣西中醫(yī)藥大學(xué)(南寧 530001)

▲廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院(南寧 530023)