關(guān)于非整倍體細(xì)胞DNA倍體測定在宮頸上皮內(nèi)瘤變分級中的臨床應(yīng)用體會(huì)

黃純　鄭申莉　彭海燕

摘要：宮頸上皮內(nèi)瘤變是與宮頸癌密切相關(guān)的一組癌前病變，一般多有HPV感染，HPV將其DNA片段整合到宮頸細(xì)胞核內(nèi)DNA上，可引起染色體數(shù)量的改變，形成非整倍體細(xì)胞，CIN宮頸細(xì)胞多有DNA非整倍體改變。通過DNA圖像分析，來判斷細(xì)胞核內(nèi)染色體倍體數(shù)量及發(fā)布來判斷宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）的嚴(yán)重程度。組織病理學(xué)診斷的CIN1、CIN2、CIN3/CIS和宮頸癌病歷中，出現(xiàn)非整倍體細(xì)胞分別為66%、70%、89%和88%.非整倍體細(xì)胞越多，非整倍體細(xì)胞峰越多，病變程度越重，預(yù)后越差。本文闡述CIN分級與DNA非整倍體細(xì)胞的關(guān)系在臨床中篩查和治療的體會(huì)。

關(guān)鍵詞：宮頸上皮內(nèi)瘤變；宮頸癌；非整倍體細(xì)胞；DNA倍體

1 材料與方法

1.1取材、制片及染色 2012年1月～2014年5月，對44238名城鎮(zhèn)及農(nóng)村婦女進(jìn)行了子宮頸DNA檢查。參與檢查的婦女的年齡在25～35歲，平均年齡（37.5±5.0）歲，排除無完整宮頸及行宮頸治療的。用宮頸刷在陰道擴(kuò)張器直視下取材。宮頸樣本收集后，經(jīng)化學(xué)及物理處理，使細(xì)胞平鋪在玻片上，每例制成兩張薄層細(xì)胞片，其中一片進(jìn)行巴氏染色做常規(guī)細(xì)胞學(xué)診斷，另外一片進(jìn)行FeulgenDNA染色做DNA定量測定。

1.2細(xì)胞學(xué)診斷 巴氏染色片經(jīng)兩位有經(jīng)驗(yàn)的細(xì)胞病理醫(yī)師閱片。根據(jù)Bethesda診斷分別為5組：良好；ASCUS；LSIL；HSIL/CIS；鱗狀上皮癌。全自動(dòng)DNA倍體分析儀對Feulgen染色片中的每一個(gè)細(xì)胞進(jìn)行123個(gè)核特征掃描分析，自動(dòng)將細(xì)胞分類并測出其細(xì)胞核內(nèi)DNA含量。出現(xiàn)細(xì)胞核DNA倍數(shù)>5c細(xì)胞片，診斷為倍體異常細(xì)胞即陽性片，若無>5c細(xì)胞者，為陰性片。常規(guī)細(xì)胞學(xué)異常者或DNA檢測陽性病例，均需進(jìn)一步做陰道鏡、子宮頸的活檢，進(jìn)行病理組織學(xué)診斷。

2 結(jié)果

2.1 DNA圖像分析儀在篩查CIN2和CIN2以上病變的敏感性 用宮頸活檢病理診斷結(jié)果作為依據(jù)，在992例中，CIN1 618例，CIN2 200例，CIN3/CIS 114例和侵潤癌60例（表1）。若將常規(guī)細(xì)胞學(xué)LSIL或HSIL定為活檢標(biāo)準(zhǔn)，常見細(xì)胞學(xué)篩查CIN2或CIN2以上病變（374例）的敏感性為39%，特異性為91%；篩出CIN3或CIN3以上病變（174例）的敏感性為52%，特異性為86%。DNA定量分析儀若以1個(gè)或超過1個(gè)>5c細(xì)胞為活檢標(biāo)準(zhǔn)，篩查CIN2或CIN2以上病變的敏感性為77%；篩查CIN3或CIN3以上病例的敏感性為85%，特異性為61%。若將3個(gè)或3個(gè)以上>5c細(xì)胞作為活檢標(biāo)準(zhǔn)，篩查CIN2或CIN2以上病變的敏感性為69%，特異性為84%；篩查CIN3或CIN3以上病例的敏感性為82%，特異性為74%。

DVA倍體分析系統(tǒng)為正常和異常，異常包括：①1～2個(gè)>5c；②3個(gè)或3個(gè)以上>5c，但無非整倍體細(xì)胞峰出現(xiàn)；③有非整倍體細(xì)胞峰.

2.2非整倍體細(xì)胞與宮頸上皮內(nèi)瘤變分級的關(guān)系 CIN1、CIN2、CIN3/CIS和宮頸癌等不同級別的宮頸疾病中，在每100個(gè)被測細(xì)胞中出現(xiàn)>2.5c的細(xì)胞分別為4.4±0.27、7.1±0.15、11.4±1.14和15.6±2.3，除CIN3/CIS與宮頸癌之間并無差別，各組之間差異均有顯著性（P<0.05）；出現(xiàn)>5C的細(xì)胞分別有0.6±0.04、1.21±0.16、2.47±0.38和3.12±0.78，除CIN3/CIS與宮頸癌之間并無差別，各組之間差異均有顯著性。除了非整倍體細(xì)胞數(shù)目不同外，不同級別CIN和宮頸癌出現(xiàn)非整倍體細(xì)胞的頻率也是不一致的。CIN1、CIN2、CIN3和宮頸癌分別有29%、59%、84%和87%病例中可出現(xiàn)非整倍體細(xì)胞。

3 討論

本研究提示CIN1、CIN2、CIN3/CIS和宮頸癌出現(xiàn)的非整倍體細(xì)胞的頻率分別為29%、59%、84%和87%，這與其他一些研究一致，即宮頸上皮癌前病變級別越高，DNA倍體異常細(xì)胞和非整倍體細(xì)胞峰出現(xiàn)的頻率越大。Kashyap等調(diào)查了不同分化程度宮頸癌DNA非整倍體細(xì)胞出現(xiàn)的頻率，發(fā)現(xiàn)在高分化的鱗狀上皮癌為64%，中度分化鱗癌為71%，低分化鱗癌為83%。以上均說明非整倍體細(xì)胞的多少與宮頸癌的惡性程度相關(guān)，非整倍體細(xì)胞越多，病變越嚴(yán)重，預(yù)后越差。

宮頸上皮內(nèi)瘤變是與宮頸浸潤癌密切相關(guān)的一組癌前病變，而HPV感染是CIN發(fā)生、發(fā)展中最重要的危險(xiǎn)因素。HPV將其DNA片段整合到宮頸細(xì)胞核內(nèi)DNA上，可引起染色體數(shù)量的改變，形成非整倍體細(xì)胞，CIN宮頸細(xì)胞多有DNA非整倍體改變。

總之，結(jié)合誘發(fā)因素，根據(jù)DNA倍體分析方法可協(xié)助宮頸細(xì)胞學(xué)判斷宮頸病變的發(fā)展和嚴(yán)重程度，對臨床有很高的使用價(jià)值，特別是宮頸CIN1、CIN2、CIN3/CIS和宮頸癌的篩查和治療[1-2]。

參考文獻(xiàn)：

[1]李靈潔，王開秀，楊芳，等.細(xì)胞DNA定量分析進(jìn)行宮頸癌篩查的臨床研究[J].中國婦幼保健，2008，23（16）：2319-2320.

[2]黃宏梅，韋雪梅，方云光.細(xì)胞DNA定量分析用宮頸癌及癌前病變早期篩查的臨床觀察[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2010，16（15）：2-3.

編輯/王敏