尿脂質運載蛋白2在狼瘡性腎炎早期診斷中的臨床研究

李暉云，于　磊，曹賽霞，楊書彥，劉國平，龔　莉

(內蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院腎內科，呼和浩特 010010)

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尿脂質運載蛋白2在狼瘡性腎炎早期診斷中的臨床研究

李暉云△※，于磊，曹賽霞，楊書彥，劉國平，龔莉

(內蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院腎內科，呼和浩特 010010)

摘要：目的探討尿脂質運載蛋白2(uLn-2)在狼瘡性腎炎(LN)患者早期診斷中的臨床意義。方法選取2010年3月至2013年9月內蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院腎內科收治的107例LN患者為研究對象，根據(jù)尿液中微量白蛋白(mAlb)水平分為Ⅰ組(mAlb<20 mg/L,33例)、Ⅱ組(mAlb 20～200 mg/L,35例)和Ⅲ組(mAlb>200 mg/L,39例)，同期選取門診體檢的40例健康體檢者作為對照組，測定其uLn-2、血肌酐、血尿素氮(BUN)、血清胱抑素C(Cys-C)水平。結果uLn-2水平在對照組、Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組逐漸增高，組間比較差異有統(tǒng)計學意義[分別為(7.2±0.7)、(9.7±0.8)、(12.2±0.9)、(15.0±1.0) μg/L,P<0.05]；Ⅲ組血肌酐[(80±13) μmol/L]、BUN[(12±4) mmol/L]、Cys-C [(1.55±0.54) mg/L] 明顯高于Ⅰ組[(65±12) μmol/L、(6±2) mmol/L、(0.90±0.22) mg/L]、Ⅱ組[(70±13) μmol/L、(7±3) mmol/L、(1.02±0.30) mg/L]和對照組[(67±11) μmol/L、(6±2)mmol/L、(0.87±0.20) mg/L]，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，但在對照組、Ⅰ組、Ⅱ組之間比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；LN患者的uLn-2與mAlb之間呈正相關性(r=0.854，P<0.05)。 結論uLn-2水平是檢測LN患者早期腎功能損傷的敏感、有效的指標，且隨著腎臟損傷程度的加重持續(xù)增高。

關鍵詞：系統(tǒng)性紅斑狼瘡；狼瘡性腎炎；尿脂質運載蛋白2；診斷意義

狼瘡性腎炎(lupus nephritis,LN)是系統(tǒng)性紅斑狼瘡引起的腎臟損害，是系統(tǒng)性紅斑狼瘡并發(fā)癥致死的最主要原因之一，一旦LN診斷確立,腎臟及其血管病變的程度直接影響患者的預后[1]。對LN早期診斷、早期干預，可阻止病情向不可逆的臨床蛋白尿階段發(fā)展，甚至逆轉病變進展，延長患者的生存期，因此，尋找有效的LN早期診斷指標及干預措施至關重要。目前尿脂質運載蛋白2(urinary lipocalin-2,uLn-2)是能靈敏反映早期腎功能損傷的新型標志物之一[2]，已經在心腎綜合征、早期糖尿病腎病、小兒心臟手術后急性腎損傷等方面有所報道，但在LN的早期診斷中研究較少。因此，在臨床工作中有必要對uLn-2與LN的關系進行更深入研究，以期為LN的早期診斷和治療提供臨床指導。

1資料與方法

1.1一般資料選擇2010年3月至2013年9月內蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院腎內科住院和門診病例確診的LN患者107例，其中男2例，女105例，年齡19～71歲，平均(26±5)歲。所有患者診斷均符合2009年美國風濕病學會系統(tǒng)性紅斑狼瘡分類及診斷標準[3]。根據(jù)尿微量白蛋白(microalbunminuria，mAlb)水平將患者分為Ⅰ組(mAlb<20 mg/L,33例)、Ⅱ組(mAlb 20～200 mg/L,35例)和Ⅲ組(mAlb>200 mg/L,39例)。Ⅰ組年齡為20～65歲，平均(27±5)歲，全為女性；Ⅱ組年齡19～67歲，平均(26±5)歲，其中男1例，女34例；Ⅲ組年齡20～71歲，平均(26±6)歲，其中男1例，女38例。同期選取門診體檢的40例健康體檢者作為對照組，其中男1例，女39例；年齡18～70歲，平均(28±6)歲，均無心力衰竭、肝腎功能不全、腫瘤等病史。

1.2研究方法

1.2.1收集方法收集所有受試者晨起清潔中段尿液標本，置無致熱源及內毒素的試管中，4 ℃下保存標本，3000 r/min離心10 min(離心半徑為10 cm)，取上清液5 mL。收集受試者樣本同時檢測mAlb，然后檢測uLn-2。

1.2.2檢測方法uLn-2檢測采用酶聯(lián)免疫吸附法(檢測儀器為美國雅培公司的Architecti2000SR/i1000SR全自動免疫分析儀,試劑盒購自美國Systems公司)；mAlb采用散射速率比濁法(儀器為德國西門子DADE BEHRING BNⅡ特定蛋白分析儀，試劑為西門子配套試劑)。血清胱抑素C(cystatin C,Cys-C)測定采用膠乳免疫透射比濁法(試劑盒由四川邁克科技有限公司提供)；血肌酐、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)測定采用連續(xù)監(jiān)測速率法(試劑盒由深圳邁瑞生物醫(yī)療電子有限公司提供)。

2結果

2.14組各項檢測指標比較四組uLn-2、mAlb水平比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01),Ⅲ組uLn-2、mAlb高于Ⅱ組、Ⅰ組、對照組(t=13.774,25.748,39.758,P<0.01；t=20.860，26.870，29.066，P<0.01),Ⅱ組uLn-2、mAlb高于Ⅰ組、對照組(t=23.896,7.891，P<0.01；t=5.193，5.995，P<0.01)，Ⅰ組uLn-2高于對照組(t=12.476，P<0.01)。4組血肌酐、BUN、Cys-C比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，Ⅲ組血肌酐、BUN、Cys-C明顯高于對照組、Ⅱ組、Ⅰ組(t=2.126，3.486，2.198，P<0.05；t=8.662，7.214，8.022，P<0.01；t=8.718，6.543，7.907，P<0.01)，但在對照組、Ⅰ組、Ⅱ組之間比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1　4組各項檢測指標比較　±s)

BUN：血尿素氮；mAlb：尿微量白蛋白；uLn-2：尿脂質運載蛋白2；Cys-C：血清胱抑素C； Ⅰ組：mAlb>20 mg/L; Ⅱ組：mAlb 20~200 mg/L; Ⅲ組：mAlb>200 mg/L;a與對照組比較，P<0.05；b與Ⅰ組比較，P<0.05;c與Ⅱ組比較，P<0.05

2.2uLn-2與mAlb的相關性分析LN患者的uLn-2與mAlb之間呈正相關(r=0.854，P<0.05)。

3討論

uLn-2是脂質運載蛋白系統(tǒng)中的一種，屬可溶性蛋白，它可以在腸菌素作用下和Fe2+形成復合物(uLn-2/腸菌素/Fe2+)。該復合物在Fe2+的介導下向細胞內轉運，誘導腎臟祖細胞向腎小管上皮細胞分化，所以uLn-2與腎臟的發(fā)育緊密相關，是保持腎臟基本結構的重要因素[4]。生理情況下uLn-2表達水平較低，當腎臟在各種致病因素作用下發(fā)生急性及慢性損傷時，uLn-2大量表達，其可誘導腎小管的上皮細胞修復再生，對腎臟功能的保護上有一定支持功能。uLn-2作為一種新型載體，可以通過競爭螯合物中的Fe2+在中間環(huán)節(jié)阻斷細菌對鐵的吸收，從而阻止細菌繁殖及生長，因此uLn-2可以看作是一種新的急性期反應蛋白[5]。Mishra等[6]在患兒體外循環(huán)手術后并發(fā)急性腎損傷的隊列研究中發(fā)現(xiàn)，術后2 h尿液uLn-2診斷急性腎損傷的受試者工作特征曲線的曲線下面積為0.998，靈敏度、特異度分別為100%、98%，說明尿液uLn-2是早期診斷急性腎損傷敏感性及特異性高的指標。

目前，在評價及診斷早期腎功能損害方面，mAlb已被證實有極大的臨床價值，是反映腎小球早期損傷的敏感指標，也是目前臨床上應用最廣泛的監(jiān)測早期腎功能損傷及改變的指標之一[7]。當腎臟結構不斷破壞及腎功能進行性惡化時，mAlb水平不斷增高，駱赟等[8]在2型糖尿病腎病中的研究中報道，mAlb水平能夠早期檢測早期腎損害，糖尿病組患者mAlb水平明顯高于正常對照組。本研究結果顯示，uLn-2水平在對照組、Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組四組之間依次逐漸增高(P<0.05)，并且LN患者中的uLn-2與mAlb之間呈正相關(r=0.854，P<0.05)，說明與腎臟損害程度相一致。另外本研究顯示，Ⅰ組uLn-2水平明顯高于對照組，而Ⅰ組mAlb的水平與對照組差異無統(tǒng)計學意義，說明uLn-2水平在正常尿白蛋白期(mAlb<20 mg)先于mAlb開始增高，而mAlb在此期卻無明顯增高，出現(xiàn)這種情況的原因可能是LN的腎小管、間質及血管受損早于其腎小球損傷。文獻報道，LN的早期腎臟損傷不僅局限在腎小球，而且也出現(xiàn)在腎小管、間質及血管，并且其受到各種致病因素的刺激比腎小球更敏感，往往先于腎小球損傷之前出現(xiàn)病理變化，uLn-2在受損的腎小管上皮細胞上高度表達，說明uLn-2水平在LN患者正常尿白蛋白期就可明顯增高[9-10]，本研究結果與此相一致。

此外本研究顯示，各組的uLn-2水平差異有統(tǒng)計學意義，在正常尿白蛋白期就開始有升高，但血肌酐、BUN等這些傳統(tǒng)指標無法顯示這方面的優(yōu)勢，往往在大量尿白蛋白期(mAlb>200 mg/L)才有明顯的升高，其主要原因是血肌酐、BUN要在腎功能損傷24～72 h后才明顯升高，而且由于較強的腎臟代償功能，血肌酐、BUN容易受循環(huán)血容量、蛋白合成及分解速度減退，進食進水量等因素影響，不能較早地反映腎臟損傷[11]。另外，作為低分子蛋白質Cys-C也是目前研究的熱點之一，它能自由地通過腎小球基膜，在近曲小管被重吸收和降解，能夠客觀地反映腎小球濾過膜通透性的早期變化，在腎小球濾過率輕微降低時即可升高。但研究發(fā)現(xiàn)，Cys-C水平僅與收縮期心力衰竭腎小球濾過率呈現(xiàn)線性相關，而用于其他原因所導致的腎小球濾過率下降及腎功能損傷的評估具有一定的局限性[12]。本研究顯示，其水平變化也是在大量尿白蛋白期(mAlb>200 mg/L)才有明顯升高，雖然在早期尿白蛋白期有所升高，但與正常尿蛋白期及對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

綜上所述，LN患者的uLn-2水平升高，同時uLn-2水平與LN患者腎損害的嚴重程度相一致，另一方面在LN患者Ⅰ組的uLn-2水平就有所增高，提示uLn-2水平可以先于mAlb早期診斷LN患者腎功能損害。因此，uLn-2可以作為LN患者早期診斷的非侵入性損傷標志物，有利于早期診斷發(fā)現(xiàn)LN，早期評估腎臟功能的損害程度，對LN早期治療和干預有重要意義。但本研究存還存在自身的局限性，需要在今后的臨床工作中擴大樣本量及利用隊列研究的方法加以改進和完善。

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Clinical Research on Urinary Lipid Carrier Protein-2 in Early Diagnosis of Lupus Nephritis

LIHui-yun,YULei,CAOSai-xia,YANGShu-yan,LIUGuo-ping,GONGLi.

(DepartmentofInternalMedicine,People′sHospitaloftheInnerMongoliaAutonomousRegion,Hohhot010010,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the clinical significance of urinary lipid carrier protein-2(urinary lipocalin-2,uLn-2) in early diagnosis of lupus nephritis(LN).MethodsA total of 107 patients with LN admitted in People′s Hospital of the Inner Mongolia Autonomous Region were divided into group Ⅰ,Ⅱand Ⅲaccording to the levels of microalbumin(mAlb) in urine:group Ⅰ(mAlb<20 mg/L,n=33),group Ⅱ(mAlb 20-200 mg/L,n=35) and group Ⅲ(mAlb>200 mg/L,n=39).Another 40 cases of healthy people underwent physical examination during the same period were selected as the control group.Levels of uLn-2,serum creatinine, blood urea nitrogen(BUN),cystatin-C(Cys-C) of all the groups were measured.ResultsThe levels of uLn-2 in the control group,groupⅠ,groupⅡ and groupⅢ increased successively,the difference between either two groups was statistically significant[(7.2±0.7) μg/L vs (9.7±0.8) μg/L vs(12.2±0.9) μg/L vs (15.0±1.0) μg/L,P<0.05];the levels of serum creatinine [(80±13) μmol/L],BUN[(12±4) mmol/L],Cys-C[(1.55±0.54) mg/L] of group Ⅲ were significantly higher than those in the control group[serum creatinine,BUN,Cys-c were (67±11) μmol/L,(6±2)mmol/L,(0.87±0.20) mg/L,respectively],and those in groupⅠ[(65±12) μmol/L,(6±2)mmol/L,(0.90±0.22) mg/L],as well as group Ⅱ[(70±13)μmol/L,(7±3) mmol/L,(1.02±0.30) mg/L,P<0.05],there was statistically significant difference between any of the groups and group Ⅲ,but there were no statistically significant differences of the above indicators between either two of the control group,groupⅠ and groupⅡ(P<0.05);the levels of uLn-2 in patients with LN were positively correlated with mAlb(r=0.854，P>0.05).ConclusionThe level of uLn-2 can be considered as a sensitive and effective indicator to early monitor the renal dysfunction in patients with LN,and it continuously increases along with the exacerbation of kidney damage.

Key words:Systemic lupus erythematosus; Lupus nephritis; Urinary lipid carrier protein-2; Diagnostic significance

doi：10.3969/j.issn.1006-2084.2015.03.051

中圖分類號：R446

文獻標識碼：A

文章編號：1006-2084(2015)03-0518-03

收稿日期：2013-08-06修回日期：2014-07-24編輯：相丹峰