1 006株銅綠假單胞菌的臨床分布及耐藥性分析

1 006株銅綠假單胞菌的臨床分布及耐藥性分析

王海燕1趙超2

作者單位： 111000 遼陽，解放軍第201醫(yī)院檢驗科1

261021 濰坊，解放軍第89醫(yī)院檢驗科2

【關鍵詞】銅綠假單胞菌；細菌培養(yǎng)；藥敏試驗；抗菌藥物；耐藥性

近年來，隨著廣譜抗菌藥物、免疫制劑及侵入性治療在臨床的廣泛應用，尤其是長期大量不合理使用抗菌藥物，銅綠假單胞菌引起的感染逐年增加[1]。由于銅綠假單胞菌生長條件要求低，感染途徑廣，對多種抗菌藥物都有較強的耐藥性，日益成為臨床治療的難點。我院2006年1月至2011年12月對15 239例臨床標本進行細菌培養(yǎng)，陽性7 704例， 其中分離出銅綠假單胞菌1 006株。本研究對其藥敏試驗進行了回顧分析，旨在探討銅綠假單胞菌的耐藥變化趨勢，以便指導臨床合理使用抗菌藥物。

材料與方法

一、實驗材料

1 006株銅綠假單胞菌分離于我院2006年1月1日至2011年12月31日臨床送檢的痰液、尿液、血液、傷口分泌物等各類標本。標本細菌培養(yǎng)及分離按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》(第三版)進行[2]。各種分離培養(yǎng)基由濰坊康華生物技術有限公司提供。血液培養(yǎng)采用法國生物梅里埃公司產(chǎn)BACT/ALETR3D血培養(yǎng)儀。

二、實驗方法

菌株鑒定及藥敏試驗采用法國生物梅里埃公司產(chǎn)VITEK32全自動細菌鑒定及藥敏分析儀和配套試劑進行分析。藥敏結果參照美國臨床實驗室標準化委員會的判定標準分為三級：敏感(S)、中介(I)、耐藥(R)，中介菌株在結果分析時計入耐藥菌株中。采用遼寧省臨檢中心提供的銅綠假單胞菌標準株ATCC27853進行藥敏質量控制。

三、統(tǒng)計學方法

耐藥性分析采用世界衛(wèi)生組織細菌耐藥性監(jiān)測中心推薦的WHONET5.4軟件進行統(tǒng)計分析。

結果

一、菌株分離率

2006年1月1日至2011年12月31日間臨床送檢各類標本共計15 239例，其中細菌培養(yǎng)陽性標本7 704例。分離到銅綠假單胞菌1 006株，占總標本數(shù)6.60%，占細菌培養(yǎng)陽性例數(shù)的13.06%。分離的銅綠假單胞菌主要來自創(chuàng)面分泌物和痰液標本，占50%以上，銅綠假單胞菌分離標本來源，見表1。

二、臨床分布情況

從臨床科室分布看，分離出的銅綠假單胞菌科室以創(chuàng)傷骨科、ICU和呼吸科為主，見表2。

三、藥敏檢測結果

分離出的銅綠假單胞菌對大多數(shù)抗菌藥物耐藥，尤其對氨芐西林、頭孢噻肟、復方新諾明、萘啶酸、替卡西林的耐藥率均超過60%，其中2006年對以上抗菌藥物的耐藥率更達到90%以上。對15種抗菌素的耐藥性及6年耐藥性變遷比較見表3。

四、耐藥性變化

6年間銅綠假單胞菌對氨芐西林、頭孢噻肟、頭孢西丁、呋喃妥因、復方新諾明、萘啶酸、頭孢噻吩等抗菌藥物的耐藥率從2006年至2010年呈逐年下降趨勢，2011年又升高；而對慶大霉素、亞胺培南、奈替米星、妥布霉素、阿莫西林等抗菌藥物的耐藥率則顯示逐年上升。

討論

銅綠假單胞菌在自然界及健康人的體表體內廣泛存在，具有極強的環(huán)境適應能力，可依附于人體皮膚黏膜和醫(yī)療器械表面，通過穿刺、吸氧、鼻飼、氣管切開插管、機械通氣等侵入性操作引起人體多部位、多器官的感染，是醫(yī)院感染常見的重要病原菌之一，臨床送檢標本中檢出率高。有研究顯示，侵入性操作是銅綠假單胞菌感染的獨立危險因素[3]。本研究結果顯示2006年1月1日至2011年12月31日本院分離的臨床感染性致病菌中，銅綠假單胞菌檢出1 006株為最多，占13.05%，與文獻報道的銅綠假單胞菌已占醫(yī)院感染和ICU革蘭陰性菌感染的第1位相一致[4-5]。從表1可知，1 006例銅綠假單胞菌絕大部分來源于創(chuàng)面分泌物及痰液、咽拭子，與國內其他地區(qū)報道結果基本一致[6-7]。該菌在痰液、尿液、血液、分泌物等標本中均有檢出，說明銅綠假單胞菌可引起人體多部位感染。

從表2可見銅綠假單胞菌感染率最高的科室是創(chuàng)傷骨科，究其原因是我院創(chuàng)傷骨科病區(qū)多，創(chuàng)傷患者多且傷口開放，在手術及后續(xù)治療過程中傷口與外界接觸機會增加，從而增加了銅綠假單胞菌感染的發(fā)生率；ICU、呼吸科這幾個科室感染率高，可能與患者長期住院治療、病情危重、免疫力低下，長期使用抗菌藥物，且多伴有侵入性醫(yī)療操作，從而增加了感染機會。

銅綠假單胞菌具有多重耐藥性的特點，能對多種抗菌藥物產(chǎn)生天然耐藥或獲得性耐藥，給臨床治療帶來了極大的挑戰(zhàn)。目前臨床用藥不嚴格導致其多種耐藥率逐年升高，對其直接有效的抗菌藥物較少，其耐藥導致的結果嚴重，是臨床治療的難點[8]。本研究顯示分離菌株對抗菌藥物均呈耐藥，耐藥率高低不等，出現(xiàn)多藥耐藥和泛耐藥的現(xiàn)象。表3可見銅綠假單胞菌僅對亞胺培南有較低的耐藥率；對氨芐西林、頭孢唑林、頭孢西丁、復方新諾明、萘啶酸等有較高的耐藥率。研究發(fā)現(xiàn)，臨床濫用藥物導致銅綠假單胞菌發(fā)生多種耐藥基因突變，其耐藥機制復雜的主要原因是[9-12]：①由于外膜微孔蛋白oprD2的缺失等導致細胞外膜通透性下降，是導致抗菌藥物治療失敗的重要原因之一；②由于青霉素結合蛋白(penicillin-binding proteins, PBPs)和DNA拓撲酶結構改變而改變了抗菌藥物的作用靶點，從而逃避抗菌藥物的抗菌作用；③生物膜形成，研究結果顯示，細菌生物膜在銅綠假單胞菌感染中廣泛存在；④產(chǎn)生抗菌活性酶，如氨基糖苷鈍化酶、超廣譜β-內酰胺酶(extended spectyum β lactamase, ESBLs)、AmpcC酶及金屬酶等；⑤主動泵出系統(tǒng)等隨時將抗菌藥物排出。因此，銅綠假單胞菌具有天然的獲得性耐藥機制，使其易定植、易變異，導致部分患者反復感染。

表1　銅綠假單胞菌的臨床標本來源及分布

表2　銅綠假單胞菌的臨床科室分布

表3　銅綠假單胞菌對抗菌藥物的耐藥率比較(%)

碳青霉烯類抗菌藥物抗菌譜廣，對革蘭陽性菌、革蘭陰性菌、需氧菌、厭氧菌兼有很強的抗菌活性，然而隨著臨床對碳青霉烯類抗菌藥物的廣泛應用甚至不合理使用，其耐藥性也逐年增加[13]。目前研究表明，以亞胺培南為代表的碳青霉烯類抗生素的作用靶位是細菌內膜上的青霉素結合蛋白，而特異性通道oprD2缺失引起外膜通透性降低，阻礙抗菌藥物到達細菌內作用靶位，則是引起銅綠假單胞菌對亞胺培南耐藥的主要原因[14]。本研究顯示由于抗菌藥物的廣泛應用，本院銅綠假單胞菌對亞胺培南的耐藥性從2009年開始出現(xiàn)，且呈上升趨勢。鄧芳等[15]分離出的多重耐藥銅綠假單胞菌對合成青霉素類、頭孢菌素類、氟喹諾酮類、氨基糖苷類(阿米卡星除外)等均有較高的耐藥性，且發(fā)現(xiàn)了對亞胺培南和全部第3代頭孢菌素及常用抗假單胞菌藥物都耐藥的多重耐藥菌株，給臨床有效控制感染帶來了嚴重威脅。

綜上所述，銅綠假單胞菌呈多重耐藥趨勢的形勢不容樂觀，其耐藥性的產(chǎn)生除與其本身存在諸多耐藥基因有關外，也和廣譜抗菌藥物的廣泛應用有密切的關系。因此，抗菌藥物使用應根據(jù)臨床微生物室的藥敏結果，嚴格按要求合理提高療效，減少不良藥品的不良反應。臨床抗感染經(jīng)驗證明，單一抗生素對大多數(shù)革蘭陰性桿菌尤其是銅綠假單胞菌的治療不理想，易出現(xiàn)耐藥株，故應采用NCCLS等主張的多重使用聯(lián)合用藥[16].同時為了提高抗生素治療效果，應根據(jù)病原菌對抗菌藥物的耐藥遷延特性，間歇性選用，才能更好地控制醫(yī)院銅綠假單胞菌感染的發(fā)生，及時防止耐藥菌的交叉?zhèn)鞑ァ?/p>

參考文獻

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(本文編輯：黃紅稷)

王海燕，趙超. 1006株銅綠假單胞菌的臨床分布及耐藥性分析[J/CD]. 中華肺部疾病雜志： 電子版， 2015， 8(2)： 212-214.

·短篇論著·

收稿日期：(2015-02-23)

文獻標識碼：中圖法分類號： R563 B

通訊作者：趙超，Email：zc89009@sina.com

DOI：10.3877/cma.j.issn.1674-6902.2015.02.017