益腎更寧合劑對圍絕經(jīng)期大鼠血清E2、LH 及FSH水平的影響*

王新斌，馬睿玲

(甘肅中醫(yī)學院，甘肅 蘭州730000)

圍絕經(jīng)期綜合征指婦女絕經(jīng)前后由于性腺生殖軸功能衰退所致的一系列以自主神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂為主，伴有神經(jīng)心理癥狀的一組癥候群。在中醫(yī)古籍中，無本病的單獨記載，有醫(yī)家結合臨床實踐，稱之為“絕經(jīng)前后諸證”。中醫(yī)臨證分為腎陰虛和腎陰陽兩虛，其病機除腎虛為主外，可兼心陰不足、肝陰虧虛、肝氣郁結等，見癥復雜，其中多臟同病為本病證主要特點。筆者以祖國醫(yī)學理論為依托，汲先賢近人之精華，衷中參西，擬定以補腎清心平肝為治法的方藥益腎更寧合劑治療圍絕經(jīng)期綜合征，臨床療效較好。為了進一步探討益腎更寧合劑的作用機制，筆者觀察了其對圍絕經(jīng)期大鼠血清雌二醇(E2)、黃體生成素(LH)及卵泡刺激素(FSH)水平的影響。

1 材料與方法

1．1 動 物

15～18 月齡SD 雌性大鼠60 只，體質(zhì)量(250±20)g;4～6 月齡SD 雌性大鼠10 只，體質(zhì)量(200 ±20)g。均為SPF 級，購自甘肅中醫(yī)學院中心實驗室，合格證號SCXK(甘)2004－0006。分籠飼養(yǎng)，空氣清新，通風良好，自由攝食、飲水，飼養(yǎng)溫度(20 ±2)℃，每日光照12 h，飼料、水、墊料由專人每日及時加換。

1．2 藥品、試劑與儀器

益腎更寧合劑藥物組成:酒熟地黃12 g，山茱萸10 g，炙淫羊藿18 g，珍珠母30 g，生白芍12 g，麥冬10 g，川黃連6 g，軟紫草(后下)12 g 等。藥劑由甘肅中醫(yī)學院制劑室提供，水煎并按4∶1 比例濃縮，2 ℃冰箱中儲存?zhèn)溆?。尼爾雌醇片，北京四環(huán)制藥有限公司產(chǎn)品，生產(chǎn)批號2071101。血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、促黃體生成素(LH)放射免疫分析盒，購自北京科美東雅生物技術有限公司，批號依次為20070605，20060601，20060412。80－1 型電動離心機，金壇市恒豐儀器廠產(chǎn)品;GC－911型γ－放射免疫計數(shù)器，中國科技大學實業(yè)總公司產(chǎn)品。

1．3 模型的建立、動物分組與給藥

選取60 只15～18 月齡大鼠，進行陰道脫落細胞涂片及光學顯微鏡觀察，連續(xù)10 d。選取32 只符合圍絕經(jīng)期大鼠模型標準者［1］，采用隨機數(shù)字法分為模型對照組、尼爾雌醇組和益腎更寧合劑高、低劑量組4 組，每組8 只。另選青年(4～6 月齡)大鼠8 只作為青年對照組。參照文獻［2］方法，按人與動物表面積等效量1∶0．018 給藥。模型對照組、青年對照組以蒸餾水10 μL/g 灌胃，1 d 1 次;尼爾雌醇組用蒸餾水配成混懸液0．24 μg/g 灌胃，每2 周1 次;益腎更寧合劑高、低組依次設定生藥量26．56，6．64 g/kg 灌胃，1 d 1 次。各組均以10 μL/g 體質(zhì)量灌胃，連續(xù)4 周。

1．4 檢測指標

末次給藥后，禁食、禁水24 h，稱體質(zhì)量，于腹主動脈采集血標本，置普通生化管，離心(3 000 r/min)分離血清，－20 ℃保存?zhèn)溆谩２捎梅琶夥y定E2、LH、FSH 含量，操作嚴格按試劑盒說明書進行。

1．5 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 13．0 統(tǒng)計分析軟件處理。數(shù)據(jù)以均數(shù)()±標準差(s)表示，組間比較采用單因素方差分析(One－Way ANOVA)。以P＜0．05 為差別有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

與青年對照組對比，模型對照組大鼠血清E2降低，LH、FSH 升高，差別有統(tǒng)計學意義(P＜0．01)。與模型對照組對比，益腎更寧合劑高劑量組和尼爾雌醇組E2升高，F(xiàn)SH、LH 降低，差別有統(tǒng)計學意義(P＜0．01 或P＜0．05)。結果表明:益腎更寧合劑可提高圍絕經(jīng)期大鼠血清E2含量，降低LH、FSH 水平，并存在一定量效關系。見表1。

表1 各組大鼠血清E2、LH 及FSH 水平對比 ±s

表1 各組大鼠血清E2、LH 及FSH 水平對比 ±s

注:與青年對照組對比，* P ＜0．05，＊＊P ＜0．01;與模型對照組對比，# P ＜0．05，## P ＜0．01。

組 別 動物數(shù) E2/(ng·L －1) FSH/(IU·L －1) LH/(IU·L －1)模型對照組 8 7．547 1 ±0．806 7＊＊ 5．688 0 ±0．364 9＊＊ 6．830 0 ±0．829 8＊＊青年對照組 8 14．340 0 ±0．627 5 2．334 7 ±0．405 7 4．351 3 ±0．861 8尼爾雌醇組 8 11．137 1 ±0．932 6## 3．940 3 ±0．127 6## 4．388 7 ±0．552 1##益腎更寧合劑高劑量組 8 9．213 1 ±0．782 1## 4．900 1 ±0．141 4## 5．493 7 ±0．830 2#益腎更寧合劑低劑量組 8 8．953 3 ±0．821 7##5．084 2 ±0．754 5 6．067 5 ±0．779 8

3 討 論

圍絕經(jīng)期是婦女從性成熟期向老年期過渡的特殊時期，是必經(jīng)的生理過程。婦女在絕經(jīng)前后，卵巢功能開始衰退、出現(xiàn)內(nèi)分泌系統(tǒng)失衡狀況，導致下丘腦—垂體—卵巢—子宮性腺軸(HPOA)的改變，使LH、FSH 水平升高，平衡反饋失調(diào)，從而影響植物神經(jīng)中樞及其支配下的各臟器功能，引起一系列軀體和精神癥狀。中醫(yī)癥狀表現(xiàn)為潮熱面赤，進而出現(xiàn)汗出、精神倦怠、煩躁易怒、頭暈目眩、耳鳴心悸、失眠健忘、腰膝酸軟、手足心熱，或伴有月經(jīng)紊亂癥狀。早在《素問·上古天真論》就認識到“女子七七，任脈虛，太沖脈衰少，天癸竭，地道不通，故形壞而無子?！薄鹅`樞·海論》曰:“髓海有余，則輕勁多力，自過其度;髓海不足，則腦轉(zhuǎn)耳鳴，脛酸眩冒，目無所見，懈怠安臥。”這些都明確指出了腎與月經(jīng)、生殖、衰老的密切關系。婦女七七之年左右(五十歲左右)，腎氣漸衰，體內(nèi)天癸這種隨腎氣充盛而泌至物質(zhì)趨于衰竭，月經(jīng)也漸次斷絕，且生育能力缺失。腎氣虛衰為本病的發(fā)病根本。有學者［3］認為:圍絕經(jīng)期雌激素水平下降，出現(xiàn)潮熱、汗出等“陰虛”癥狀，雌激素的這些作用類似“陰”的作用，而婦女的血虛癥狀與雌激素成負相關系，血屬陰，與本病腎陰虛為主要病因病機相符合。

婦女以血為基本，以血為用，血屬陰。天癸是一種重要的陰精，對人體的生長、發(fā)育與生殖起促進作用。任脈為陰脈之海。沖脈為血海，陰精衰少，從而導致月經(jīng)斷絕。方中酒熟地黃、山茱萸、生白芍、麥冬等藥物著重滋補腎陰，補其不足以治本;煅珍珠母、川黃連、軟紫草兼以清心平肝，瀉其有余以治其標。根據(jù)中醫(yī)學“陽生陰長”之理論，在大量的滋陰藥中少佐助陽之品淫羊藿，是取《景岳全書》“善補陰者，必于陽中求陰，陰得陽升泉源不竭”之意。淫羊藿配伍甘咸寒之珍珠母可鎮(zhèn)攝浮陽，此因圍絕經(jīng)期婦女出現(xiàn)烘熱汗出、潮熱面紅、情志異常等植物神經(jīng)功能紊亂的癥狀是陰陽平衡失約、陰不斂陽以致的虛陽上浮的表現(xiàn)，而珍珠母也可抑制淫羊藿溫熱升浮之氣。此外，淫羊藿補腎溫陽，主要成分為黃酮類化合物，現(xiàn)代研究表明，淫羊藿黃酮可增強HPOA促性腺功能，且具有雌激素樣活性［4］。圍絕經(jīng)期婦女體內(nèi)的性激素水平下降，使用補腎藥物起到調(diào)整生殖內(nèi)分泌的作用，復方在臨床治療圍絕經(jīng)期綜合征已取得良好的療效。

本實驗結果顯示:益腎更寧合劑高劑量組能夠升高模型大鼠血清E2(P＜0．01)，降低LH、FSH 含量(P＜0．01 或P＜0．05)，且存在著一定的量效關系。此為益腎更寧合劑治療圍絕經(jīng)期綜合征提供了實驗依據(jù)，即通過其微弱的雌激素樣作用，提高更年期模型大鼠體內(nèi)E2水平，改善垂體－性腺軸功能，使內(nèi)環(huán)境趨于穩(wěn)定。這可能是該方用于治療圍絕經(jīng)期綜合征的作用機制之一。

［1］程化奇，熊舜華，殷新尤，等．大鼠更年期實驗模型研究［J］．實驗動物與比較醫(yī)學，1993，13(4):1921．

［2］黃繼汗，黃曉暉，陳志揚，等．藥理實驗動物間和動物與人體間的等效劑量換算［J］．中國臨床藥理學與治療，2004，9(9):1069－1071．

［3］楊敏，李燦東，李紅，等．圍絕經(jīng)期綜合征中醫(yī)證素與性激素水平的相關研究［J］．中華中醫(yī)藥雜志，2012，27(2):368．

［4］張磊，王嵐，吳霞，等．淫羊藿總黃酮對不同性別大鼠性器官及相關激素的影響［J］．中藥藥理與臨床，2009，25(1):33．