利奈唑胺注射液含量測定方法驗證

重慶華邦制藥有限公司，重慶 北部新區(qū) 401121

利奈唑胺注射液含量測定方法驗證

張婷

重慶華邦制藥有限公司，重慶 北部新區(qū) 401121

目的考察利奈唑胺注射液的含量檢驗方法是否能準(zhǔn)確、可靠,并獲得客觀實際的數(shù)據(jù)或結(jié)果。方法按照利奈唑胺注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及中國藥典的要求對利奈唑胺注射液含量檢驗方法進(jìn)行驗證，本次驗證的項目包括系統(tǒng)適用性、專屬性、線性、準(zhǔn)確度、重復(fù)性及范圍、耐用性。結(jié)論從分析的結(jié)果看，使用高效液相色譜法檢測利奈唑胺注射液的含量具有很高的準(zhǔn)確性，值得推廣。

利奈唑胺注射液；方法學(xué)考察;含量測定

利奈唑胺為惡唑烷酮類的合成抗生素，利奈唑胺注射液用于治療由特定微生物敏感株引起的下列感染：耐萬古霉素的屎腸球菌引起的感染，包括并發(fā)的菌血癥；獲得性肺炎，致病菌為金黃色葡萄球菌(甲氧西林敏感或耐甲氧西林的菌株)或肺炎鏈球菌(包括多藥耐藥的菌株MDRSP)；復(fù)雜性皮膚和皮膚軟組織感染，包括未并發(fā)骨髓炎的糖尿病足部感染，由金黃色葡萄球菌(甲氧西林敏感或耐甲氧西林的菌株)、化膿鏈球菌或無乳鏈球菌引起[1-2]。因注射劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的嚴(yán)格要求，需按照規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)對其含量測定方法進(jìn)行驗證。

進(jìn)行多道焊時，應(yīng)當(dāng)控制層間溫度，層間溫度過大會導(dǎo)致熱量積累，受熱區(qū)域增大，熱影響區(qū)變寬，同時導(dǎo)致晶粒粗大，降低強度與韌性，需控制焊道層間溫度不超過58℃。

1 儀器與材料

1.1 儀器 高效液相色譜儀、容量瓶、電子天平、移液管。

CNN的輸出Y(標(biāo)簽值)為下一時間片內(nèi)多節(jié)點間組成區(qū)域內(nèi)各節(jié)點間連接狀態(tài)的組合,每種組合對應(yīng)唯一一個狀態(tài)編號,如式(3)所示.

1.2 試藥與試劑 利奈唑胺對照品；利奈唑胺注射液；三氟乙酸；乙腈、正己烷、異丙醇為色譜純。

2 方法與結(jié)果

2.2.2 方法專屬性 精密量取溶劑、空白輔料溶液、對照品溶液、樣品溶液10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；要求溶劑、空白輔料不干擾利奈唑胺含量的測定，供試品溶液主峰的保留時間應(yīng)與利奈唑胺對照品一致。實驗結(jié)果見表2。

2.2.3 線性 精密稱取利奈唑胺對照品0.05064g，置50ml容量瓶中，加10%乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液。分別精密量取對照品貯備液2.5、4.0、5.0、6.0、7.5ml置50ml量瓶中，加10%乙腈稀釋至刻度，搖勻，配制成濃度分別為50、80、100、120、150μg/ml的溶液，相當(dāng)于供試品含量測定濃度線性范圍的50%～150%的溶液。實驗結(jié)果見表3。

2.2.4 精密度 精密稱取利奈唑胺對照品0.10048g，置100ml量瓶中，加10%乙腈超聲溶解并定容搖勻，作為對照品貯備液；稱取與處方量相應(yīng)比例的輔料，置50ml容量瓶中，然后分別加入對照品貯備液4.0、5.0、6.0ml(每個濃度制備三份)，加10%乙腈溶液適量，超聲并稀釋至刻度，搖勻，過濾，作為供試品溶液(相當(dāng)于含量測試濃度的80%，100%，120%)。精密量取對照品貯備液5.0ml置50ml量瓶中，用10%乙腈稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。分別精密量取上述供試品溶液和對照品溶液各10μl注入色譜儀，記錄色譜圖。實驗結(jié)果見表4。

2.1 方法[3]用十八烷基鍵合硅膠為填充劑的色譜柱；流動相A為三氟醋酸水溶液(取10%三氟醋酸溶液10ml加入到1000ml水中)，流動相B為三氟醋酸乙腈溶液(取10%三氟醋酸溶液10ml加入到1000ml乙腈中)，按表1進(jìn)行線性梯度洗脫；檢測波長為254nm。精密量取本品5ml，置100ml量瓶中，加10%乙腈溶液稀釋至刻度，搖勻，精密量取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取利奈唑胺對照品10mg，精密稱定，用10%乙腈溶液制成每1ml中約含利奈唑胺0.1mg的溶液，作為對照品溶液，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計算，即得。

表2 專屬性實驗結(jié)果

2.2 結(jié)果

第一，數(shù)據(jù)定義功能。該功能特指數(shù)據(jù)庫管理系統(tǒng)須準(zhǔn)確提供數(shù)據(jù)定義語言，方便用戶準(zhǔn)確定義數(shù)據(jù)庫中的數(shù)據(jù)對象。

表3 線性實驗結(jié)果

結(jié)論：樣品峰面積與濃度的相關(guān)系數(shù)均大于0.999；樣品峰面積與濃度作圖為一條直線。

2.2.1 系統(tǒng)適用性試驗 取系統(tǒng)適應(yīng)性溶液10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。出峰順序依次為5-羥甲基糠醛、雜質(zhì)A、Z4d、雜質(zhì)B和利奈唑胺，利奈唑胺與相鄰雜質(zhì)峰的分離度符合要求。

表4 精密度實驗結(jié)果

2.2.5 重復(fù)性及范圍 取本品同一批樣品9份，(約相當(dāng)于含量供試品濃度的80%，100%，120%各3份)，依含量測定方法進(jìn)行測定。

左旋多巴對照品（上海Alfa Aesar公司，批號：10102261，純度：98%）；酪氨酸酶（美國Worthingto Biochemical公司，批號：33K14431，活性：1 050 U/mg）；冰醋酸（分析純）、甲醇（色譜純）均購自天津市大茂化學(xué)試劑廠；水為杭州娃哈哈集團(tuán)有限公司純凈水。

表5 精重復(fù)性實驗結(jié)果

2.2.6 耐用性 取含量測定項下的對照品溶液和供試品溶液置容量瓶中，室溫放置，分別于0、2、4、8、24h取樣，按上述色譜條件進(jìn)樣10μl，記錄色譜圖。結(jié)果見表6。

表6 耐用性實驗結(jié)果

3 討論

通過系統(tǒng)適用性試驗、方法專屬性、線性、準(zhǔn)確度、重復(fù)性及范圍和耐用性等六個方面對利奈唑胺注射液含量測定方法進(jìn)行了研究。從驗證結(jié)果來看，利奈唑胺與相鄰雜質(zhì)峰的分離度符合要求，檢驗方法的專屬性良好。在50～150μg/ml濃度范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系(r=0.9999)，在測試濃度的80%～120%范圍內(nèi)平均回收率為100%，基本完全回收。樣品溶液在室溫條件下放置24h穩(wěn)定。綜上證明：在我們的實驗室條件下能達(dá)到方法規(guī)定的系統(tǒng)適用性要求；該方法對我公司生產(chǎn)的利奈唑胺注射液產(chǎn)品含量檢測具有良好的專屬性；我們實驗條件下的能滿足檢測要求，對產(chǎn)品質(zhì)量進(jìn)行控制。

[1] 王建國，陳建．臨床治療中利奈唑胺的藥效學(xué)和藥動學(xué)研究進(jìn)展[J]．中國抗生素雜志，2013，38(10)：730-736．

[2] 崔向麗，趙志剛．新型噁唑烷酮類抗生素利奈唑胺[J]．中國新藥雜志，2008，17(6)：530-533．

[3] 蔡劍秋．中華人民共和國藥典[M]．北京：化學(xué)工業(yè)出版社，1995．

R927

A

1007-8517(2014)24-0017-02

2014.09.12)