血清胃蛋白酶原與再生基因Ⅳ聯(lián)合檢驗(yàn)對(duì)胃癌早期診斷的應(yīng)用價(jià)值＊

黃容旺，范文偉，李國(guó)斌，陳 銘

（廣東省東莞市石龍博愛(ài)醫(yī)院內(nèi)二科 523000）

胃癌是中國(guó)最常見(jiàn)的消化道腫瘤，其病死率居各種惡性腫瘤之首［1］。目前，診斷胃癌的主要方法是纖維胃鏡和上消化道造影檢查，其中，胃鏡被稱為是確診胃癌的“金標(biāo)準(zhǔn)”。由于這兩種途徑檢查方法必須要求具備先進(jìn)的儀器設(shè)備和專門的操作人員，技術(shù)要求高，費(fèi)用也高，而且胃鏡又令患者很痛苦、不適合兒童和心肺功能不全的老年人，結(jié)果使不少患者望而卻步，且對(duì)亞臨床癥狀患者尚不能作為普查手段。而早期胃癌缺乏一定的特異性癥狀與體征，一般的消化道癥狀經(jīng)對(duì)癥治療后能暫時(shí)好轉(zhuǎn)，當(dāng)出現(xiàn)明顯的臨床癥狀而就診時(shí)，往往病情已屬中、晚期，使胃癌難以早期發(fā)現(xiàn)，從而使患者失去了最佳治療時(shí)機(jī)，影響胃癌的預(yù)后［2］。早診斷、早治療成為提高患者生存質(zhì)量、降低病死率的惟一途徑。這使得人們希望能有一種簡(jiǎn)便、快速、重復(fù)性好、非介入性、便于動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)等優(yōu)點(diǎn)的檢查方法，能篩選出胃癌的高危人群，最好對(duì)胃癌能進(jìn)行早期診斷。近年來(lái)，血清腫瘤標(biāo)志物成為研究的熱點(diǎn)，腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)操作簡(jiǎn)單，價(jià)格便宜，適合腫瘤普查，但大多數(shù)腫瘤標(biāo)志物特異性和敏感性較差，影響了臨床應(yīng)用。有研究表明，胃蛋白酶原（PG）、再生基因Ⅳ（RegⅣ）為近期研究較多的胃癌相關(guān)的血清標(biāo)志物，對(duì)胃癌早期診斷可能有輔助價(jià)值［3］，為探討PG與RegⅣ聯(lián)合檢驗(yàn)對(duì)胃癌早期診斷的價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年1月至2013年6月本院收治的胃部病變患者216例，所有患者均經(jīng)胃鏡及病理學(xué)診斷確診。其中，胃癌患者18例（胃癌組）：男8例，女10例，年齡32～75歲，平均（52.6±7.2）歲，低分化癌8例，中分化癌5例，高分化癌5例。良性胃病患者198例（良性胃病組）：男82例，女116例，年齡35～75歲，平均（51.4±7.0）歲，其中，胃潰瘍38例，胃息肉54例，萎縮性胃炎46例，淺表性胃炎60例。另選取門診體檢健康者100例（對(duì)照組），男56例，女44例，無(wú)消化道、肝臟、腎臟疾病史。所有受試者均自愿參加試驗(yàn)，并簽署知情同意書。

1.2 儀器與試劑 東芝120生化分析儀、意大利Alisei酶標(biāo)儀、Access2全自動(dòng)微粒子化學(xué)發(fā)光分析儀、Bio－RAD公司i－Cycler熒光PCR儀；PGⅠ、PGⅡ試劑盒，購(gòu)自北京美康生物技術(shù)研究中心，RegⅣELISA試劑盒，購(gòu)自深圳匹基生物公司。

1.3 方法 所有受試者清晨采集空腹靜脈血5mL，3500 r／min離心15min，分離血清后－20℃保存，應(yīng)用東芝120生化分析儀進(jìn)行檢測(cè)分析（TrFIA）PGⅠ、PGⅡ；ELISA法檢測(cè)RegⅣ；定量檢測(cè)所用儀器系Bio－RAD公司i－Cycler熒光PCR儀；應(yīng)用羅氏電化學(xué)發(fā)光法，使用原裝試劑檢測(cè)CEA、CA19－9。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料以表示，比較用t檢驗(yàn)，多組間兩兩比較用單因素方差分析；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組血清PGⅠ、PGⅡ、RegⅣ、CEA和CA19－9比較 胃癌組血清PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ／PGⅡ均顯著低于良性胃病組和對(duì)照組（P＜0.05）；良性胃病組血清PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ／PGⅡ顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），胃癌組 RegⅣ、CEA和CA19－9均顯著高于良性胃病組和對(duì)照組（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 各組血清PGⅠ、PGⅡ、RegⅣ、CEA和CA19－9比較

2.2 血清PG聯(lián)合RegⅣ篩查胃癌的效果評(píng)價(jià) 以病理診斷為金標(biāo)準(zhǔn)，以PGⅠ＜70ng／mL聯(lián)合PGⅠ／PGⅡ＜3.0為界值，血清PG檢測(cè)胃癌的敏感性為72.0%，特異性為63.8%；血清PG聯(lián)合RegⅣ檢測(cè)胃癌的敏感性為83.3%，特異性為78.2%。血清CEA聯(lián)合CA19－9檢測(cè)胃癌的敏感性為55.6%，特異性為59.1%。PG與RegⅣ聯(lián)合檢驗(yàn)敏感性、特異性均顯著高于CEA與CA19－9聯(lián)合檢驗(yàn)（P＜0.05），見(jiàn)表2～3。

表2 PG與RegⅣ聯(lián)合檢驗(yàn)結(jié)果（n）

表3 CEA與CA19－9聯(lián)合檢驗(yàn)結(jié)果（n）

3 討 論

長(zhǎng)期以來(lái)，胃癌一直是中國(guó)發(fā)病率和病死率較高的惡性腫瘤之一。國(guó)內(nèi)有報(bào)道顯示［4］，中國(guó)胃癌患者手術(shù)后5年生存率為30%～50%，其中，進(jìn)展期患者術(shù)后5年生存率為40%，早期患者術(shù)后5年生存率為90%。早診斷、早治療成為提高患者生存質(zhì)量、降低病死率的惟一途徑。然而，目前，臨床上胃癌的診斷主要依靠纖維胃鏡和上消化道造影檢查，這兩種檢查操作難度大，對(duì)儀器設(shè)備和操作人員要求高，費(fèi)用貴，不能作為普查手段，且往往在患者有明顯占位病變才能確診，從而使患者失去了最佳治療時(shí)機(jī)。近年來(lái)，腫瘤標(biāo)志物研究與應(yīng)用已經(jīng)成為腫瘤診斷的研究熱點(diǎn)。由于腫瘤標(biāo)志物可以在腫瘤患者組織、體液和排泄物中檢出，標(biāo)本易于獲得，且操作相對(duì)簡(jiǎn)單，價(jià)格低廉，特別適合作為腫瘤普查和早期診斷的方法［5］。然而，目前大多數(shù)標(biāo)志物檢測(cè)相應(yīng)腫瘤的敏感度及特異度仍不夠理想，尚未找到一種靈敏度、高特異度的指標(biāo)，而多種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢驗(yàn)可以提高腫瘤診斷的效果，正成為腫瘤診斷的研究方向。

PG屬于門冬氨酸蛋白家族，是胃黏膜特異性功能酶－胃蛋白酶的無(wú)活性前體，主要包括PGⅠ和PGⅡ。PGⅠ主要表達(dá)于胃底部，由主細(xì)胞和頸黏液細(xì)胞分泌。PGⅡ主要表達(dá)于十二指腸和全胃部。由于胃幾乎是PG的惟一來(lái)源，并且在分泌階段PG分泌量會(huì)發(fā)生變化，通過(guò)對(duì)血清PGⅠ和PGⅡ的檢測(cè)可以反映不同部位胃黏膜功能。已有研究表明，淺表性胃炎和幽門螺桿菌感染胃炎PGⅠ和PGⅡ分泌量升高，而腸上皮化生、不典型增生和胃癌時(shí)PGⅠ和PGⅡ分泌量降低［6］。本研究結(jié)果顯示，良性胃病組患者血清PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ／PGⅡ水平明顯升高，而胃癌組患者血清PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ／PGⅡ水平低于良性胃病患者和健康對(duì)照組，與相關(guān)報(bào)道基本一致［7］。其原因主要是胃潰瘍、淺表性胃炎等良性胃病主細(xì)胞和壁細(xì)胞數(shù)量增加，PG分泌量增多，而胃癌患者胃腺體和主細(xì)胞數(shù)量減少，有些被腸上皮替代，導(dǎo)致PG分泌量降低。

RegⅣ屬于鈣依賴性凝集素超家族，其所編碼的蛋白是一種表達(dá)于胃腸道和胰腺的分泌性蛋白［8］。有研究表明，RegⅣ與消化系統(tǒng)腫瘤的發(fā)生發(fā)展有密切的關(guān)系［9］。胃癌患者RegⅣ表達(dá)明顯增強(qiáng)，RegⅣ表達(dá)產(chǎn)物可以促進(jìn)細(xì)胞增殖，加速胃癌進(jìn)展。Qin等［10］研究發(fā)現(xiàn)29.4%的胃癌RegⅣ呈陽(yáng)性表達(dá)，其表達(dá)水平與腫瘤分期、患者預(yù)后等明顯相關(guān)性。通過(guò)定量RT－PCR分析顯示RegⅣ在30.4%的胃癌中呈高水平表達(dá)［11］。本研究結(jié)果顯示，胃癌組患者RegⅣ陽(yáng)性表達(dá)率為30.7%，與Qin等［10］報(bào)道基本一致，而定量RT－PCR結(jié)果顯示胃癌組RegⅣ水平明顯高于良性胃病組和對(duì)照組。而CEA和CA19－9檢查結(jié)果也表明兩種腫瘤標(biāo)志物與胃部病變情況有很好的一致性。

本研究還對(duì)血清PG聯(lián)合RegⅣ篩查胃癌的效果進(jìn)行了評(píng)價(jià)。血清PG聯(lián)合RegⅣ檢測(cè)胃癌的敏感性為83.3%，特異性為78.2%。血清CEA聯(lián)合CA19－9檢測(cè)胃癌的敏感性為55.6%，特異性為59.1%。PG與RegⅣ聯(lián)合檢驗(yàn)敏感性、特異性均顯著高于CEA與CA19－9聯(lián)合檢驗(yàn)。證實(shí)血清PG聯(lián)合RegⅣ檢測(cè)適用于胃癌高危人群的篩查。

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