高爾基體糖蛋白73在58例肝癌患者診斷中的應(yīng)用

王志茹　劉慶波　趙文靜

[摘要] 目的 探討GP73對(duì)原發(fā)性肝癌的診斷價(jià)值。方法 免疫組化法檢測(cè)肝癌組織、癌旁組織及正常肝臟組織中高爾基體糖蛋白73（golgiprotein-73，GP73）和甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）的表達(dá)，ELISA法檢測(cè)肝癌患者血清GP73和AFP濃度。結(jié)果 GP73蛋白在肝癌組織強(qiáng)表達(dá)，癌旁組織細(xì)胞漿表達(dá)較弱，正常肝臟組織無(wú)表達(dá)，58例肝癌組織中GP73陽(yáng)性為55例，AFP陽(yáng)性為40例，兩者診斷肝癌的陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；58例PHC患者GP73平均濃度為（238.1±121.6）ng/mL，42例GP73陽(yáng)性，敏感性為72.4%；AFP平均濃度為（885.6±498.6） ng/mL，30例AFP陽(yáng)性，敏感性為51.7%，GP73和AFP聯(lián)合檢測(cè)能將敏感性提高到85.9%（50/58）；PHC患者腫瘤大小之間、腫瘤個(gè)數(shù)之間血清GP73濃度無(wú)確切關(guān)系。結(jié)論 GP73是一個(gè)診斷PHC良好的血清標(biāo)志物，其敏感性和特異性均較好，GP73和AFP聯(lián)合檢測(cè)可以提高早期肝癌的檢出率。

[關(guān)鍵詞] 高爾基體糖蛋白73；甲胎蛋白；原發(fā)性肝癌

[中圖分類(lèi)號(hào)] R735.7 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 2095-0616（2014）10-125-04

[Abstract] Objective To evaluate the diagnostic value of golgiprotein 73 for primary liver cancer. Methods The immunohistochemical method was used to detect the expression of golgiprotein 73（GP73） and alpha-fetoprotein（AFP） in liver cancer tissue， para-cancer tissue and normal liver tissue. The ELISA method was used to detect the serum GP73 and AFP concentrations in the patients with liver cancer. Results GP73 had strong expression in liver cancer tissue， weak expression in cytoplasma of para-cancer tissue and no expression in normal liver tissue. Of the 58 cases of liver cancer tissue， 55 cases were positive GP73 expression and 40 cases were positive AFP expression， with statistically significant difference in the positive rate of liver cancer diagnosis between the two indicators（P<0.05）； The average GP73 concentration of 58 PHC patients was （238.1±121.6）ng/mL， of which 42 patients had positive GP73 expression， with the sensibility of 72.4%； The average AFP concentration was （885.6±498.6）ng/mL， of which 30 patients had positive AFP expression， with the sensibility of 51.7%. Combined GP73 and AFP detection can increase the sensibility to 85.9%（50/58）. The serum GP73 concentrations between the PHC patients with different tumor sizes and tumor numbers did not have accurate relationship. Conclusion GP73 is a good serum marker for the diagnosis of PHC and it has good sensibility and specificity. Combined GP73 and AFP detection can improve the detection rate of early liver cancer.

[Key words] Golgiprotein 73；Alpha-fetoprotein；Primary liver cancer

原發(fā)性肝癌（primary hepatic cancer，PHC）是臨床上常見(jiàn)的惡性腫瘤。2011年《全球癌癥統(tǒng)計(jì)》顯示PHC的發(fā)病率居惡性腫瘤第5位，死亡率居第2位[1]。另有報(bào)道顯示我國(guó)為PHC高發(fā)區(qū)，發(fā)病人數(shù)和死亡人數(shù)約占全球總數(shù)的55%以上[2]。PHC具有起病隱匿、惡性度高、進(jìn)展快、轉(zhuǎn)移早等臨床特點(diǎn)，多數(shù)患者在病程早期多無(wú)臨床癥狀，約70%～80%患者發(fā)現(xiàn)時(shí)已為腫瘤晚期，無(wú)法進(jìn)行有效的根治治療，而且PHC患者術(shù)后復(fù)發(fā)率高，預(yù)后差，生存期短，因此肝癌的早期診斷尤為重要[3]。1.1 標(biāo)本來(lái)源和處理

肝癌組組、癌旁組織取自2012年1～12月吉林肝膽病醫(yī)院收治的原發(fā)性肝癌手術(shù)切除的標(biāo)本，其中男47例，女11例，年齡32～75歲，平均54歲，患者均經(jīng)臨床、影像學(xué)診斷符合《內(nèi)科學(xué)》第12版中原發(fā)性肝癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]，術(shù)前均未接受過(guò)任何抗腫瘤治療，術(shù)后病理證實(shí)為肝細(xì)胞癌。肝癌組織標(biāo)本取自手術(shù)切除的無(wú)壞死癌組織，距癌組織標(biāo)本取自大于2cm處無(wú)癌細(xì)胞浸潤(rùn)的癌旁組織，采用10%中性福爾馬林固定，常規(guī)脫水，包埋，制備病理組織切片。

正常肝組織標(biāo)本由同期住院的肝血管瘤患者活檢獲得，其中男12例，女8例，年齡21～36歲，平均26歲，均經(jīng)病理證實(shí)。

52例對(duì)照組血清來(lái)自于吉林大學(xué)第一臨床醫(yī)院2012年7月收集的健康體檢者，其中男28例，女24例，年齡23～45歲。

1.2 試劑和方法

1.2.1 試劑 GP73蛋白雙抗體夾心ELISA檢測(cè)試劑盒和鼠抗人GP73蛋白單克隆抗體購(gòu)自北京熱景生物技術(shù)有限公司；鼠抗人AFP單克隆抗體和SP染色試劑盒購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司；AFP電化學(xué)檢測(cè)試劑為Cobas601配套試劑盒，瑞士Roche公司。

1.2.2 肝癌組織、癌旁組織和正常肝組織GP73和AFP檢測(cè)

3 討論

目前PHC的診斷主要根據(jù)影像學(xué)、血清AFP濃度和病理學(xué)檢查。文獻(xiàn)報(bào)道PHC患者血清AFP檢測(cè)敏感度僅為40%～65%，特異性為76%～96%，在臨床上有近1/3的PHC患者血清AFP陰性[6]，因此尋找一種敏感性更高、特異性更強(qiáng)的肝癌血清標(biāo)志物一直是研究的熱點(diǎn)。GP73是存在于高爾基體的一種跨膜蛋白，是新近發(fā)現(xiàn)的與肝癌關(guān)系密切的糖蛋白，大量研究表明GP73敏感度和特異度均超過(guò)AFP，GP73已成為新的早期診斷肝癌的標(biāo)志物[7]。本研究首先采用免疫組化方法檢測(cè)肝癌組織、癌旁組織及正常肝組織中GP73和AFP的表達(dá)，研究結(jié)果顯示：正常肝臟組織中GP73和AFP為陰性，58例PHC患者肝癌組織和癌旁組織GP73陽(yáng)性率分別為95.4%和89.1%，顯著高于AFP的陽(yáng)性表達(dá)率（70.2%和51.8%）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，對(duì)于PHC患者，GP73蛋白是一種有意義的組織病理標(biāo)記蛋白，與文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果一致[8-10]。

本研究采用ELISA法檢測(cè)PHC患者血清GP73和AFP濃度，研究結(jié)果顯示GP73具有較好的敏感性和特異性，與本組病例中AFP檢測(cè)結(jié)果比較，GP73的敏感度高達(dá)72.4%，明顯高于AFP的敏感性。GP73和AFP聯(lián)合檢測(cè)可以將敏感性提高到85.9%，特異性仍可保持在87.1%這樣一個(gè)較高的水平，結(jié)果顯示GP73和AFP聯(lián)合檢測(cè)具有互補(bǔ)性，可以明顯提高早期肝癌的檢出率。為進(jìn)一步確認(rèn)血清GP73蛋白含量與PHC患者腫瘤大小、結(jié)節(jié)數(shù)量的相關(guān)性，我們對(duì)58例PHC患者進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)和觀察，研究結(jié)果表明血清GP73蛋白含量與PHC患者腫瘤大小、結(jié)節(jié)數(shù)量之間無(wú)確切關(guān)系，與其他學(xué)者研究結(jié)果一致[11-12]。

綜上所述，GP73是一個(gè)診斷PHC良好的血清標(biāo)志物，其敏感性和特異性均較好。而且GP73和AFP聯(lián)合檢測(cè)可以提高早期肝癌的檢出率。

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（收稿日期：2014-03-19）