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    亞甲基四氫葉酸還原酶基因多態(tài)性與先天神經(jīng)管缺陷的相關(guān)性研究

    2014-07-09 01:01張潔瓊徐東萍
    中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生 2014年13期
    關(guān)鍵詞:基因多態(tài)性葉酸

    張潔瓊 徐東萍

    [摘要] 目的 研究亞甲基四氫葉酸還原酶基因多態(tài)性與紅細(xì)胞葉酸濃度的關(guān)系。 方法 采用PCR法對(duì)育齡女性5 128例進(jìn)行亞甲基四氫葉酸還原酶基因多態(tài)性分析,并分別給予早孕者400μg、800μg葉酸口服補(bǔ)充1個(gè)月,比較干預(yù)前后紅細(xì)胞葉酸濃度。 結(jié)果 純合CC型早孕受試者口服400 μg葉酸1個(gè)月后平均紅細(xì)胞葉酸濃度與口服800 μg葉酸者相比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P >0.05);突變基因型CT型、TT型早孕受試者差異則均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.05)。結(jié)論 對(duì)育齡婦女開(kāi)展MTHFR基因多態(tài)性檢測(cè)有利于指導(dǎo)補(bǔ)充葉酸劑量,值得臨床進(jìn)一步研究。

    [關(guān)鍵詞] 亞甲基四氫葉酸還原酶; 基因多態(tài)性;葉酸;神經(jīng)管缺陷

    [中圖分類號(hào)] R722.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701(2014)13-0016-03

    出生缺陷的圍生兒中神經(jīng)管缺陷約占21%,占比最高,中國(guó)每年約有8萬(wàn)~10萬(wàn)名神經(jīng)管缺陷兒出生 [1]。隨著近年來(lái)分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,葉酸代謝障礙被認(rèn)為與多種出生缺陷疾病有關(guān),如神經(jīng)管缺陷、唇腭裂、先天性心臟病和唐氏綜合征等[2]。亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)是葉酸代謝的關(guān)鍵酶,一旦MTHFR基因發(fā)生突變,則導(dǎo)致人體攝入的葉酸無(wú)法轉(zhuǎn)換成有效形式,葉酸利用率下降;MTHFR基因677位核苷酸的多態(tài)性形成了CC、CT和TT 3種基因型,相對(duì)于正常的CC基因型,雜合的CT基因型MTHFR酶活性降低35%,純合的TT基因型活性降低70%。MTHFR基因突變導(dǎo)致酶活性的改變,引起葉酸利用障礙,增加了發(fā)生神經(jīng)管畸形(NTDs)的風(fēng)險(xiǎn)[3]。預(yù)防性補(bǔ)充葉酸防止出生缺陷已經(jīng)得到了世界范圍內(nèi)的認(rèn)可。婦產(chǎn)科醫(yī)師通常按照統(tǒng)一的劑量(400μg)來(lái)建議孕期女性服用葉酸,標(biāo)準(zhǔn)劑量的葉酸補(bǔ)充可能無(wú)法滿足MTHFR基因發(fā)生突變的女性胎兒發(fā)育需要[4]。因此對(duì)孕期女性進(jìn)行基因檢測(cè)以指導(dǎo)臨床個(gè)性化用藥是必要的,本研究擬通過(guò)本地區(qū)育齡女性的MTHFR基因大樣本檢測(cè),了解該地區(qū)育齡女性MTHFR基因的多態(tài)性分布情況,并探討MTHFR基因多態(tài)性與服用葉酸前后紅細(xì)胞葉酸濃度的相關(guān)性。

    1 對(duì)象與方法

    1.1 研究對(duì)象

    經(jīng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn),收集2009年1月~2013年6月期間就診于我院門診的育齡女性,入選標(biāo)準(zhǔn):育齡期漢族女性,同意抽血化驗(yàn)。病例排除標(biāo)準(zhǔn):中晚期孕婦;合并慢性肝腎疾病、血液系統(tǒng)病、惡性貧血、胃十二指腸切除術(shù)后、精神障礙性疾病。入選實(shí)驗(yàn)對(duì)象5 128例,其中早孕(孕8~14周)育齡女性753例作為早孕組。

    1.2治療干預(yù)方法

    所有入選者均抽取空腹靜脈血2mL到乙二胺四乙酸(EDTA)-Na2抗凝管中,置-70℃冰箱中備用提取基因組DNA進(jìn)行MTHFR基因多態(tài)性檢測(cè)。早孕受試者根據(jù)MTHFR基因多態(tài)性檢測(cè)結(jié)果分為CC組、CT組、TT組,然后每個(gè)組再隨機(jī)分為兩組,分別給予400μg、800μg不同劑量的葉酸口服補(bǔ)充1個(gè)月。口服葉酸前及服用1個(gè)月以后均晨空腹抽取靜脈全血4mL,加入EDTA抗凝試管內(nèi)檢測(cè)紅細(xì)胞葉酸濃度。

    1.3 觀察指標(biāo)及檢測(cè)方法

    所有入選者均采用PCR法進(jìn)行C677T 位點(diǎn)MTHFR基因多態(tài)性檢測(cè);早孕者口服葉酸前后檢測(cè)紅細(xì)胞葉酸水平。

    1.3.1 MTHFR基因檢測(cè) 首先利用常規(guī)飽和酚-氯仿抽提法從全血中提取基因組DNA,測(cè)定DNA純度和濃度后-20℃保存?zhèn)溆?。MTHFR基因多態(tài)性檢測(cè)采用PCR法:①M(fèi)THFR-C677T引物設(shè)計(jì) 參照文獻(xiàn)進(jìn)行,上游引物5-TGA AGG AGA AGG TGT CTG CGG GA-3,下游引物5-AGG ACG GTG CGG TGA GAG TG-3,均由上海生物工程技術(shù)公司提供;②PCR反應(yīng)體系 總體積25μL,其中ddH20 18.5μL,10×緩沖液2.5μL,10mM的dNTPs 1μL,12.5pmol/μL的引物各lμL,DNA lμL,所用DNA提取試劑盒由Takara公司生產(chǎn)(Code No.: R004A);③PCR反應(yīng)條件 94℃預(yù)變性5 min。94℃變性30 s,58℃復(fù)性45s,72℃延伸45 s,35個(gè)循環(huán);72℃終末延伸10 min,最后置于4℃保存;④擴(kuò)增產(chǎn)物的限制性酶切 取PCR擴(kuò)增產(chǎn)物8止,用8 U TaqI限制性內(nèi)切酶于37℃酶切6 h,反應(yīng)終止后,產(chǎn)物經(jīng)3%瓊脂糖凝膠電泳,EB染色,染色后以DL 75 bp DNA片段長(zhǎng)度標(biāo)準(zhǔn)物為參考,在紫外燈下判斷結(jié)果,并拍照分析基因型[5]。

    1.3.2紅細(xì)胞葉酸濃度檢測(cè) 采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)抗凝血中紅細(xì)胞葉酸濃度,紅細(xì)胞葉酸檢測(cè)儀由山東鑫科生物科技股份有限公司生產(chǎn)提供。

    1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    應(yīng)用SPSS17.0軟件包行統(tǒng)計(jì)研究,計(jì)量資料用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差形式表示,采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料用相對(duì)數(shù)表示,采用χ2檢驗(yàn),設(shè)定a=0.05、即P<0.05為差異有顯著性。

    2 結(jié)果

    2.1 本地區(qū)育齡女性MTHFR基因的多態(tài)性分布情況

    MTHFR基因型PCR擴(kuò)增產(chǎn)物片段大小為134 bp,根據(jù)限制性內(nèi)切酶Taq I酶切片段的情況,基因型有三種,CC型(134 bp 1條帶),CT型(134 bp,75 bp,59 bp 3條帶),TT型(75 bp,59 bp 2條帶)。本次普查本地區(qū)育齡女性共檢出CC型(正?;颍? 689例,CT型(雜合突變型)2 357例,TT型(純合突變型)1 082例,基因多態(tài)性位點(diǎn)遺傳平衡檢驗(yàn)見(jiàn)表1。早孕組共檢出CC型(正?;颍?10例,CT型(雜合突變型)375例,TT型(純合突變型)168例,基因多態(tài)性位點(diǎn)遺傳平衡檢驗(yàn)見(jiàn)表2。

    表1 本地區(qū)育齡女性MTHFR基因的多態(tài)性位點(diǎn)遺傳平衡檢驗(yàn)

    表2 本地區(qū)早孕女性MTHFR基因的多態(tài)性位點(diǎn)遺傳平衡檢驗(yàn)

    2.2 MTHFR基因多態(tài)性與服用葉酸前后紅細(xì)胞葉酸濃度的相關(guān)性

    本組早期孕婦干預(yù)前CT型平均紅細(xì)胞葉酸濃度(274.5±28.5)nmol/L,TT型平均紅細(xì)胞葉酸濃度(257.3±33.4)nmol/L,與CC型平均紅細(xì)胞葉酸濃度(297.2±31.3)nmol/L相比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t1=8.152,P=0.015;t2=10.213,P=0.010)。口服400 μg葉酸1個(gè)月前后,CC型早孕受試者差異比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),CT型、TT型差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);口服800 μg葉酸1個(gè)月前后,CC型、CT型、TT型早孕受試者差異比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。CC型早孕受試者口服400 μg葉酸1個(gè)月后平均紅細(xì)胞葉酸濃度與口服800 μg葉酸者相比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);CT型、TT型早孕受試者口服400 μg葉酸1個(gè)月后平均紅細(xì)胞葉酸濃度與口服800 μg葉酸者分別相比較,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),詳見(jiàn)表3。

    3 討論

    神經(jīng)管缺陷(neural tube defects,NTDs)是因神經(jīng)管上皮的早期發(fā)生及分化紊亂而導(dǎo)致的一種最常見(jiàn)且后果嚴(yán)重的出生缺陷畸形,包括脊柱裂、無(wú)腦兒、脊髓脊膜或腦膜膨出、顱脊柱裂等臨床類型,是引起自然流產(chǎn)、死胎、死產(chǎn)及新生兒死亡最重要因素[6]。目前NTDs發(fā)病機(jī)制尚不清楚,一般認(rèn)為是環(huán)境與遺傳因素共同作用的結(jié)果,當(dāng)前的研究熱點(diǎn)是NTDs與同型半胱氨酸代謝相關(guān)性;近年來(lái)葉酸代謝途徑中酶體系多態(tài)性與神經(jīng)管缺陷發(fā)生相關(guān)性研究得到關(guān)注 [7]。

    5,10-亞甲基四氫葉酸還原酶(5,10-methyl-netetrahydrofolate,MTHFR)屬人同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)代謝途徑過(guò)程中的關(guān)鍵酶,其主要作用是催化5,10-亞甲基四氫葉酸經(jīng)還原反應(yīng)轉(zhuǎn)變5-甲基四氫葉酸的[8]。5-甲基四氫葉酸是葉酸的一種重要活性形式。而葉酸是蛋氨酸代謝中限速反應(yīng)過(guò)程,5-甲基四氫葉酸可脫落活性甲基并轉(zhuǎn)給同型半胱氨酸(Hcy),生成蛋氨酸。葉酸過(guò)低,則會(huì)引起蛋氨酸合成量的減少,導(dǎo)致血中同型半胱氨酸(Hcy)積存過(guò)多,這在孕早期階段會(huì)干擾神經(jīng)管的閉合,從而發(fā)生神經(jīng)管缺陷性胎兒[9,10]。研究發(fā)現(xiàn),MTHFR基因的C677T突變可導(dǎo)致的酶活性和熱敏感性降低,使身體對(duì)低葉酸水平的耐受范圍縮窄[11,12]。但是如果機(jī)體攝入大量的葉酸而且沒(méi)有其他半胱氨酸代謝酶缺陷存在時(shí),由于酶活反應(yīng)底物濃度增加,同樣可以維持正常的Hcy代謝,MTHFR基因的C677T突變則不會(huì)引起高Hcy血癥,但是葉酸攝入不足時(shí),MTHFR基因突變則可導(dǎo)致高Hcy血癥[13]。

    雖然MTHFR基因突變頻率存在明顯的地區(qū)、種族差異,但來(lái)自不同地區(qū)的大樣本數(shù)據(jù)研究均證實(shí),母親C677T突變是導(dǎo)致NTD兒遺傳風(fēng)險(xiǎn)的高危因素,MTHFR基因C677T型為子代發(fā)生NTD的危險(xiǎn)因素之一[14]。我們的研究結(jié)果表明,早期孕婦CT型、TT型紅細(xì)胞葉酸濃度相對(duì)較低,補(bǔ)充較大劑量(800 μg)葉酸時(shí)能夠有效地維持紅細(xì)胞葉酸濃度,常規(guī)劑量400 μg一定程度上不能滿足MTHFR基因C677T型突變?cè)袐D的正常葉酸水平需求。

    綜上所述,針對(duì)育齡婦女開(kāi)展MTHFR基因多態(tài)性檢測(cè),并用以指導(dǎo)孕期口服補(bǔ)充葉酸劑量的選擇,值得臨床進(jìn)一步研究嘗試。

    [參考文獻(xiàn)]

    [1] 畢勝,潘尚哈,張昱,等. 葉酸、維生素B12,MTHFR基因及血漿同型半胱氨酸水平與Alzheimer病關(guān)系的研究[J]. 中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2004,14(19):15-18.

    [2] 張海洋,張金華,張會(huì)敏,等. MTHFR基因多態(tài)性與腦卒中的相關(guān)性[J]. 中國(guó)老年學(xué)雜志,2012,32(4):690-691.

    [3] Weiner AS, Boyarskikh UA, Voronina EN,et al. Methylenetetrahydrofolate reductase C677T and methionine synthase A2756G polymorphisms influence on leukocyte genomic DNA methylation level[J]. Gene,2014,533(1):168-172.

    [4] 李軍,史海龍,帖紅莉,等. MTHFR基因多態(tài)性檢測(cè)在神經(jīng)管缺陷干預(yù)中的應(yīng)用[J]. 中國(guó)優(yōu)生優(yōu)育,2008,14(4):163-164.

    [5] 賀憲民,張群,楊琦,等. 亞甲基四氫葉酸還原酶和甲硫氨酸合成酶還原酶基因多態(tài)性研究[J]. 中國(guó)計(jì)劃生育學(xué)雜志,2010,18(1):13-18.

    [6] 沈立萍,仇小強(qiáng). 亞甲基四氫葉酸還原酶基因多態(tài)性、葉酸、同型半胱氨酸與神經(jīng)管缺陷的關(guān)系[J]. 中華流行病學(xué)雜志,2004,25(10):908-910.

    [7] Liu R, Geng P, Ma M, et al. MTHFR C677T polymorphism and migraine risk: A meta-analysis[J]. J Neurol Sci,2013,10: 8.

    [8] 周媛,王莉,張軍,等. 亞甲基四氫葉酸還原酶基因多態(tài)性與先天神經(jīng)管缺陷的關(guān)系[J]. 中國(guó)婦幼保健,2008, 23(22):3105-3107.

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    [11] 李桂華. 加強(qiáng)農(nóng)村育齡婦女增補(bǔ)葉酸管理預(yù)防神經(jīng)管缺陷[J]. 中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2013,10(2):119-121,125.

    [12] 徐霞,陳盛強(qiáng),謝芳英,等. 廣東漢族人N5,N10-亞甲基四氫葉酸還原酶基因多態(tài)性與冠心病的關(guān)系初探[J]. 中國(guó)基層醫(yī)藥,2005,12(6):661-662.

    [13] 周世媛,周繼蘋(píng),王莉娜,等. MTHFR基因多態(tài)性與法洛四聯(lián)癥的相關(guān)性研究[J]. 山東醫(yī)藥,2012,52(43):1-3.

    [14] 林茜,黃憶明. 孕婦維生素營(yíng)養(yǎng)狀況對(duì)胎兒生長(zhǎng)發(fā)育的影響[J]. 中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2001,11(7):50-51.

    (收稿日期:2013-11-20)

    表2 本地區(qū)早孕女性MTHFR基因的多態(tài)性位點(diǎn)遺傳平衡檢驗(yàn)

    2.2 MTHFR基因多態(tài)性與服用葉酸前后紅細(xì)胞葉酸濃度的相關(guān)性

    本組早期孕婦干預(yù)前CT型平均紅細(xì)胞葉酸濃度(274.5±28.5)nmol/L,TT型平均紅細(xì)胞葉酸濃度(257.3±33.4)nmol/L,與CC型平均紅細(xì)胞葉酸濃度(297.2±31.3)nmol/L相比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t1=8.152,P=0.015;t2=10.213,P=0.010)。口服400 μg葉酸1個(gè)月前后,CC型早孕受試者差異比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),CT型、TT型差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);口服800 μg葉酸1個(gè)月前后,CC型、CT型、TT型早孕受試者差異比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。CC型早孕受試者口服400 μg葉酸1個(gè)月后平均紅細(xì)胞葉酸濃度與口服800 μg葉酸者相比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);CT型、TT型早孕受試者口服400 μg葉酸1個(gè)月后平均紅細(xì)胞葉酸濃度與口服800 μg葉酸者分別相比較,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),詳見(jiàn)表3。

    3 討論

    神經(jīng)管缺陷(neural tube defects,NTDs)是因神經(jīng)管上皮的早期發(fā)生及分化紊亂而導(dǎo)致的一種最常見(jiàn)且后果嚴(yán)重的出生缺陷畸形,包括脊柱裂、無(wú)腦兒、脊髓脊膜或腦膜膨出、顱脊柱裂等臨床類型,是引起自然流產(chǎn)、死胎、死產(chǎn)及新生兒死亡最重要因素[6]。目前NTDs發(fā)病機(jī)制尚不清楚,一般認(rèn)為是環(huán)境與遺傳因素共同作用的結(jié)果,當(dāng)前的研究熱點(diǎn)是NTDs與同型半胱氨酸代謝相關(guān)性;近年來(lái)葉酸代謝途徑中酶體系多態(tài)性與神經(jīng)管缺陷發(fā)生相關(guān)性研究得到關(guān)注 [7]。

    5,10-亞甲基四氫葉酸還原酶(5,10-methyl-netetrahydrofolate,MTHFR)屬人同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)代謝途徑過(guò)程中的關(guān)鍵酶,其主要作用是催化5,10-亞甲基四氫葉酸經(jīng)還原反應(yīng)轉(zhuǎn)變5-甲基四氫葉酸的[8]。5-甲基四氫葉酸是葉酸的一種重要活性形式。而葉酸是蛋氨酸代謝中限速反應(yīng)過(guò)程,5-甲基四氫葉酸可脫落活性甲基并轉(zhuǎn)給同型半胱氨酸(Hcy),生成蛋氨酸。葉酸過(guò)低,則會(huì)引起蛋氨酸合成量的減少,導(dǎo)致血中同型半胱氨酸(Hcy)積存過(guò)多,這在孕早期階段會(huì)干擾神經(jīng)管的閉合,從而發(fā)生神經(jīng)管缺陷性胎兒[9,10]。研究發(fā)現(xiàn),MTHFR基因的C677T突變可導(dǎo)致的酶活性和熱敏感性降低,使身體對(duì)低葉酸水平的耐受范圍縮窄[11,12]。但是如果機(jī)體攝入大量的葉酸而且沒(méi)有其他半胱氨酸代謝酶缺陷存在時(shí),由于酶活反應(yīng)底物濃度增加,同樣可以維持正常的Hcy代謝,MTHFR基因的C677T突變則不會(huì)引起高Hcy血癥,但是葉酸攝入不足時(shí),MTHFR基因突變則可導(dǎo)致高Hcy血癥[13]。

    雖然MTHFR基因突變頻率存在明顯的地區(qū)、種族差異,但來(lái)自不同地區(qū)的大樣本數(shù)據(jù)研究均證實(shí),母親C677T突變是導(dǎo)致NTD兒遺傳風(fēng)險(xiǎn)的高危因素,MTHFR基因C677T型為子代發(fā)生NTD的危險(xiǎn)因素之一[14]。我們的研究結(jié)果表明,早期孕婦CT型、TT型紅細(xì)胞葉酸濃度相對(duì)較低,補(bǔ)充較大劑量(800 μg)葉酸時(shí)能夠有效地維持紅細(xì)胞葉酸濃度,常規(guī)劑量400 μg一定程度上不能滿足MTHFR基因C677T型突變?cè)袐D的正常葉酸水平需求。

    綜上所述,針對(duì)育齡婦女開(kāi)展MTHFR基因多態(tài)性檢測(cè),并用以指導(dǎo)孕期口服補(bǔ)充葉酸劑量的選擇,值得臨床進(jìn)一步研究嘗試。

    [參考文獻(xiàn)]

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    [2] 張海洋,張金華,張會(huì)敏,等. MTHFR基因多態(tài)性與腦卒中的相關(guān)性[J]. 中國(guó)老年學(xué)雜志,2012,32(4):690-691.

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    (收稿日期:2013-11-20)

    表2 本地區(qū)早孕女性MTHFR基因的多態(tài)性位點(diǎn)遺傳平衡檢驗(yàn)

    2.2 MTHFR基因多態(tài)性與服用葉酸前后紅細(xì)胞葉酸濃度的相關(guān)性

    本組早期孕婦干預(yù)前CT型平均紅細(xì)胞葉酸濃度(274.5±28.5)nmol/L,TT型平均紅細(xì)胞葉酸濃度(257.3±33.4)nmol/L,與CC型平均紅細(xì)胞葉酸濃度(297.2±31.3)nmol/L相比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t1=8.152,P=0.015;t2=10.213,P=0.010)??诜?00 μg葉酸1個(gè)月前后,CC型早孕受試者差異比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),CT型、TT型差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);口服800 μg葉酸1個(gè)月前后,CC型、CT型、TT型早孕受試者差異比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。CC型早孕受試者口服400 μg葉酸1個(gè)月后平均紅細(xì)胞葉酸濃度與口服800 μg葉酸者相比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);CT型、TT型早孕受試者口服400 μg葉酸1個(gè)月后平均紅細(xì)胞葉酸濃度與口服800 μg葉酸者分別相比較,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),詳見(jiàn)表3。

    3 討論

    神經(jīng)管缺陷(neural tube defects,NTDs)是因神經(jīng)管上皮的早期發(fā)生及分化紊亂而導(dǎo)致的一種最常見(jiàn)且后果嚴(yán)重的出生缺陷畸形,包括脊柱裂、無(wú)腦兒、脊髓脊膜或腦膜膨出、顱脊柱裂等臨床類型,是引起自然流產(chǎn)、死胎、死產(chǎn)及新生兒死亡最重要因素[6]。目前NTDs發(fā)病機(jī)制尚不清楚,一般認(rèn)為是環(huán)境與遺傳因素共同作用的結(jié)果,當(dāng)前的研究熱點(diǎn)是NTDs與同型半胱氨酸代謝相關(guān)性;近年來(lái)葉酸代謝途徑中酶體系多態(tài)性與神經(jīng)管缺陷發(fā)生相關(guān)性研究得到關(guān)注 [7]。

    5,10-亞甲基四氫葉酸還原酶(5,10-methyl-netetrahydrofolate,MTHFR)屬人同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)代謝途徑過(guò)程中的關(guān)鍵酶,其主要作用是催化5,10-亞甲基四氫葉酸經(jīng)還原反應(yīng)轉(zhuǎn)變5-甲基四氫葉酸的[8]。5-甲基四氫葉酸是葉酸的一種重要活性形式。而葉酸是蛋氨酸代謝中限速反應(yīng)過(guò)程,5-甲基四氫葉酸可脫落活性甲基并轉(zhuǎn)給同型半胱氨酸(Hcy),生成蛋氨酸。葉酸過(guò)低,則會(huì)引起蛋氨酸合成量的減少,導(dǎo)致血中同型半胱氨酸(Hcy)積存過(guò)多,這在孕早期階段會(huì)干擾神經(jīng)管的閉合,從而發(fā)生神經(jīng)管缺陷性胎兒[9,10]。研究發(fā)現(xiàn),MTHFR基因的C677T突變可導(dǎo)致的酶活性和熱敏感性降低,使身體對(duì)低葉酸水平的耐受范圍縮窄[11,12]。但是如果機(jī)體攝入大量的葉酸而且沒(méi)有其他半胱氨酸代謝酶缺陷存在時(shí),由于酶活反應(yīng)底物濃度增加,同樣可以維持正常的Hcy代謝,MTHFR基因的C677T突變則不會(huì)引起高Hcy血癥,但是葉酸攝入不足時(shí),MTHFR基因突變則可導(dǎo)致高Hcy血癥[13]。

    雖然MTHFR基因突變頻率存在明顯的地區(qū)、種族差異,但來(lái)自不同地區(qū)的大樣本數(shù)據(jù)研究均證實(shí),母親C677T突變是導(dǎo)致NTD兒遺傳風(fēng)險(xiǎn)的高危因素,MTHFR基因C677T型為子代發(fā)生NTD的危險(xiǎn)因素之一[14]。我們的研究結(jié)果表明,早期孕婦CT型、TT型紅細(xì)胞葉酸濃度相對(duì)較低,補(bǔ)充較大劑量(800 μg)葉酸時(shí)能夠有效地維持紅細(xì)胞葉酸濃度,常規(guī)劑量400 μg一定程度上不能滿足MTHFR基因C677T型突變?cè)袐D的正常葉酸水平需求。

    綜上所述,針對(duì)育齡婦女開(kāi)展MTHFR基因多態(tài)性檢測(cè),并用以指導(dǎo)孕期口服補(bǔ)充葉酸劑量的選擇,值得臨床進(jìn)一步研究嘗試。

    [參考文獻(xiàn)]

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    (收稿日期:2013-11-20)

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