胱硫醚β—合成酶G919A基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓關(guān)系的meta分析

李丹丹+喬木+王喜冰+梁學清+趙昕

[摘 要] 目的 綜合評估胱硫醚β-合成酶（CBS）基因G919A多態(tài)性與原發(fā)性高血壓（EH）發(fā)生風險的關(guān)系。方法 全面檢索PubMed、Embase、Medline、萬方數(shù)據(jù)庫、中國知網(wǎng)（CNKI）、維普資訊，收集CBS基因G919A多態(tài)性與EH發(fā)生關(guān)系的病例對照研究，優(yōu)勢比（OR）及95%可信區(qū)間（CI）評估關(guān)聯(lián)強度，應用RevMan5.3軟件對納入研究進行異質(zhì)性檢驗和效應值OR合并，漏斗圖評價發(fā)表性偏倚；敏感度分析過程，分別以固定效應模型和隨機效應模型合并OR值，以評估結(jié)果的穩(wěn)定性。結(jié)果 共納入4篇文獻6組病例-對照研究，共累計EH組患者1147例，健康對照組1138例，根據(jù)異質(zhì)性檢驗結(jié)果選取固定效應模型或隨機效應模型合并數(shù)據(jù)。Meta分析結(jié)果顯示：CBS基因919純合子模型（AA vs GG）、雜合子模型（GA vs GG）、顯性模型（AA+GA vs GG）、隱性模型（AA vs GG+GA）和基因頻率（A vs G）與EH關(guān)系的合并OR（95%CI）分別為3.03（1.95～4.72）、1.49（1.10～2.02）、1.61（1.23～2.10）、2.65（1.26～5.57）和1.55（1.35～1.79），均P<0.01。漏斗圖未檢測出顯著的發(fā)表性偏倚。結(jié)論 目前Meta分析表明CBS基因G919A多態(tài)性與EH發(fā)病相關(guān)聯(lián)，尤其是在中國人群。

[關(guān)鍵詞] 胱硫醚β-合成酶；原發(fā)性高血壓；基因多態(tài)性；Meta分析

中圖分類號：R544.1 文獻標識碼：A 文章編號：1009-816X（2016）06-0422-05

[Abstract] Objective To evaluate the relationship between cystathionine beta-synthase （CBS） G919A genetic polymorphisms and the risk of essential hypertension （EH）. Methods A comprehensive search was conducted on PubMed， Embase， Medline， Wanfang Databases， CNKI and VIP to collect the case-control studies on the relationship between CBS G919A genetic polymorphisms and EH. Odds ratios （OR） with 95% confidence intervals （CI） were applied to assess the strength of association. The RevMan 5.3 software was applied for heterogeneity test and combined OR and their 95%CI calculation. Publication bias was assessed through funnel plot and the combined ORs were estimated through fixed-effects models or random-effects models for sensitivity analysis so as to assess the stability of the results. Results Four related literatures （six case-control studies） on the relationship between CBS G919A polymorphisms and EH were included，involving 1147 EH patients （case-groups） and 1138 controls.Based on the heterogeneity results，fixed-effects models or random-effects models were applied to estimate the combined ORs.The meta-analyses showed that combined OR （95% CI） for CBS 919 heterozygote model（AA vs GG），homozygote model（GA vs GG），dominant model（AA+GA vs GG），recessive model（AA vs GG+GA）and gene frequency（A vs. G） were 3.03（1.95～4.72）， 1.49（1.10～2.02）、1.61（1.23～2.10）、2.65（1.26～5.57） and 1.55（1.35～1.79）. No significant publication bias was detected by funnel plot and sensitivity analysis suggested the robustness of the results. Conclusions The present meta-analysis suggests that CBS 919A genetic polymorphisms positively correlate with EH， especially in Chinese population.

[Key words] Cystathionine beta-synthase （CBS）； Essential hypertension （EH）； Genetic polymorphism； Meta-analysis

原發(fā)性高血壓（essential hypertension，EH）是最常見的心血管疾病之一，主要以體循環(huán)動脈壓增高為主要臨床表現(xiàn)，目前認為其是由遺傳因素和環(huán)境因素共同作用的結(jié)果[1]。眾多環(huán)境及臨床疾病與EH相關(guān)，其中包括鈉鹽的攝入、飲酒、缺乏鍛煉、不良的飲食習慣、肥胖、胰島素抵抗型糖尿病及高脂血癥等[2]。盡管這些因素解釋了大部分高血壓發(fā)生的原因，但仍有高達60%的高血壓的風險差異是由于個人的基因所引起的[3]。研究發(fā)現(xiàn)，血漿同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）水平升高與EH的發(fā)生密切相關(guān)[4]。而胱硫醚β-合成酶（cystathionine beta-synthase，CBS）是Hcy代謝過程中的關(guān)鍵酶，因此，CBS基因缺陷可通過影響血漿總Hcy水平間接導致高血壓的發(fā)生，其中常見的突變位點有T833C、G919A、844ins68等。目前已有關(guān)于CBS基因G919A多態(tài)性與EH發(fā)生風險關(guān)系的相關(guān)研究，但各研究結(jié)果間存在一定爭議。Meta分析對于存在差異的不同研究，能夠匯總多項研究結(jié)果，增大樣本量，提高效應值估計精度，定量分析合并效應量，成為循證醫(yī)學中有力的研究工具。本研究采用Meta分析評估CBS基因G919A多態(tài)性與EH發(fā)生風險的關(guān)系，為EH的早期診斷和篩選易感人群提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 文獻檢索途徑和策略：計算機全面檢索PubMed、Embase、Medline、萬方數(shù)據(jù)庫、中國知網(wǎng)、維普資訊，獲取有關(guān)CBS基因G919A多態(tài)性與EH關(guān)系的相關(guān)研究文獻。檢索中文主題詞或關(guān)鍵詞為：胱硫醚β-合成酶或CBS、基因、多態(tài)性、原發(fā)性高血壓。英文主題詞或關(guān)鍵詞為：Cystathionine beta-synthase or CBS，Gene，polymorphism or variant，Hypertension。檢索日期截止至2016年3月1日，檢索語種不限，同時輔以文獻追蹤法查閱相關(guān)文獻，同時手工檢索文獻，以確保文獻檢索的全面性。病例報道、評論、綜述、系統(tǒng)評價類文獻不作為納入文獻。

1.2 文獻納入標準：納入文獻均符合以下標準：①原始資料為已公開發(fā)表的文獻；②研究設計為病例-對照研究；③EH病例組診斷明確；④病例組和對照組各基因型數(shù)據(jù)表達明確；⑤對照組各基因型分布符合哈迪-溫伯格平衡（Hard-Weinberg equilibrirum，HWE）。兩位系統(tǒng)評價員獨立篩選，對納入文獻質(zhì)量進行評價并提取基本資料，包括第一作者、發(fā)表年份、民族、基因分型方法、樣本量、病例組與對照組各基因型及基因頻率分布情況和對照組各基因型的HWE平衡情況。如有爭議則共同復查原文后協(xié)商決定。

1.3 統(tǒng)計學處理：對納入研究的原始數(shù)據(jù)應用RevMan5.3軟件進行合并統(tǒng)計分析。本研究以0R值及其95%CI為效應指標評價CBS基因G919A多態(tài)性與EH易感性的關(guān)聯(lián)強度，所采用的基因型模型有純合子模型（AA vs GG）、雜合子模型（GA vs GG）、顯性模型（AA+GA vs GG）、隱性模型（AA vs GG+GA）和直接比較基因頻率（A vs G）。采用Q檢驗評估納入研究間的異質(zhì)性，檢驗水準為α=0.05，同時應用I2定量異質(zhì)性大?。簷z驗水準為I2=56%，如納入研究間無明顯異質(zhì)性（I2≤56%，P≥0.05）則采用固定效應模型；如異質(zhì)性明顯（I2>56%，P<0.05）則采用隨機效應模型合并數(shù)據(jù)。繪制漏斗圖評估發(fā)表性偏倚。

2 結(jié)果

2.1 納入文獻的基本情況：經(jīng)過文獻檢索和嚴格篩選，最終納入4篇文獻[5～7，9]，共6個病例-對照研究，包括HE患者1147例，對照組1138例。因CBS基因G919A主要在我國范圍內(nèi)研究，故所得研究均以我國人群為研究對象，均采用PCR-RFLP基因分型方法，除趙磊（b）[8]研究的對照組不符合HWE外，其余對照組均符合HWE。各納入文獻基本特征和原始數(shù)據(jù)見表1。

2.2 Meta分析結(jié)果：異質(zhì)性檢驗結(jié)果：純合子模型（AA vs GG，圖1，P=0.06>0.05）、雜合子模型（GA vs GG，圖略，P=0.01<0.05）、顯性模型（AA+GA vs GG，圖2，P=0.03<0.05）、隱性模型（AA vs GG+GA，圖略，P=0.04<0.05）和基因頻率（A vs G，圖3，P=0.05，I2=55%<56%），故純合子模型和基因頻率模型采用固定效應模型合并數(shù)據(jù)，其余模型均采用隨機效應模型合并數(shù)據(jù)，與EH關(guān)系的合并OR（95% CI）分別為3.03（1.95～4.72）、1.49（1.10～2.02）、1.61（1.23～2.10）、2.65（1.26～5.57）和1.55（1.35～1.79），對應Z值分別為4.91、2.56、3.45、2.58和6.05；均P<0.01。表明CBS919各基因型模型均與EH相關(guān)聯(lián)，說明CBS919多態(tài)性與EH相關(guān)。

考慮到種族差異對CBS基因多態(tài)性的影響，本文進一步進行亞組分析（如圖3，基因頻率A vs G各種族亞組與EH關(guān)系的meta分析，其余各基因型模型的森林圖未列出），亞組分析表明，不同民族CBS919各基因型模型與EH的關(guān)聯(lián)性不同（結(jié)果見表2），可見，CBS基因多態(tài)性存在明顯的種族差異。

2.3 發(fā)表性偏倚與敏感度分析：漏斗圖中各點分布基本對稱（圖4），說明無明顯的發(fā)表性偏倚。在敏感度分析過程，分別以固定效應模型和隨機效應模型合并OR值，其結(jié)果基本一致，并通過加入趙磊（b）[8]的研究，其合并數(shù)據(jù)分析的結(jié)果與之前結(jié)果亦一致，說明目前所得結(jié)果是穩(wěn)定的。

3 討論

血漿Hcy水平升高作為心血管疾病的獨立危險因素己被廣泛認同。CBS是Hcy代謝轉(zhuǎn)硫基過程中的重要酶，該基因定位于染色體21q22.3，長25～30KB，編碼551個氨基酸長度。CBS基因G919A位于第8外顯子，當?shù)?07位氨基酸由甘氨酸（Gly）代替了絲氨酸（Ser），導致CBS活性下降，但并不影響CBS與5′磷酸吡哆醛的結(jié)合，其引起酶活性下降的機制仍不清[10]。目前對CBS基因多態(tài)性的研究主要集中在腦血管疾病及冠心病領域[11～13]。絕大多數(shù)研究者認為，CBS基因突變導致CBS缺乏或活性降低是血管性疾病的獨立危險因素，CBS基因多態(tài)性存在明顯的地域和種族差異，與本文亞組分析結(jié)果一致。

目前已有較多探索CBS基因G919A多態(tài)性與EH發(fā)生風險關(guān)系的研究，但各研究結(jié)果存在一定差異。本研究運用Meta分析的方法增大樣本含量，提高了檢驗效能和效應量估計精度，將不一致的研究結(jié)果進行定量綜合。本文最終共納入6個病例-對照研究，根據(jù)異質(zhì)性檢驗結(jié)果選取固定效應模型或隨機效應模型合并效應指標OR值。Meta分析結(jié)果顯示，CBS基因919純合子模型（AA vs GG）、雜合子模型（GA vs GG）、顯性模型（AA+GA vs GG）、隱性模型（AA vs GG+GA）和基因頻率（A vs G）與EH的合并OR（95%CI）分別為3.03（1.95～4.72）、1.49（1.10～2.02）、1.61（1.23～2.10）、2.65（1.26～5.57）和1.55（1.35～1.79），均P<0.01。表明CBS基因G919A多態(tài)性與EH發(fā)病相關(guān)聯(lián)，尤其是在中國人群，且漏斗圖未檢測出顯著的發(fā)表性偏倚。因CBS基因G919A主要在我國范圍內(nèi)研究，國外未見此類研究，故所得研究均以我國人群為研究對象，但由于本研究納入的文獻數(shù)量有限，可能受到混雜因素如種族因素的影響，考慮到種族差異對CBS基因多態(tài)性的影響，本文進一步進行亞組分析，結(jié)果表明，不同民族CBS 919各基因型模型與EH的關(guān)聯(lián)性不同，但為得到更可靠的結(jié)論，需要進一步開展多中心、大樣本、設計良好的病例-對照研究，更新系統(tǒng)評價，為EH的遺傳背景提供進一步證據(jù)，為其早期診斷和預防提供循證醫(yī)學依據(jù)。

參考文獻

[1]Kouremenos N， Zacharopoulou IV， Triatafyllidi H， et al. Genes and Genetic Variations Involved in the Development of Hypertension： Focusing on a Greek Patient Cohort[J]. Hellenci J Cardiol，2014，55（1）：9-16.

[2]Fowdar JY， Lason MV， Szvetko AL， et al. Investigation of homocysteine-pathway-related variants in essential hypertension[J]. Int J Hypertens，2012，2012（9）：1-9.

[3]Singh M， Mensah GA， Bakris G. Pathogenesis and clinical physiology of hypertension[J]. Cardiol Clin，2010，28：545-559.

[4]Majtan T， Kraus JP. Folding and activity of mutant cystathionine β-synthase depends on the position and nature of the purification tag： characterization of the R266K CBS mutant[J]. Protein Expr Purif，2012，82（2）：317-324.

[5]時慶平，張穎，王紅，等.新疆維吾爾族、漢族胱硫醚β-合成酶基因多態(tài)性及血漿同型半胱氨酸與原發(fā)性高血壓的相關(guān)性[J].中華遺傳學雜志，2015，32（1）：94-100.

[6]王紅，時慶平，張穎，等.胱硫醚β-合成酶基因多態(tài)性及血漿同型半胱氨酸與新疆哈薩克族原發(fā)性高血壓的關(guān)系[J].新疆醫(yī)科大學學報，2014，12（37）：1595-1599.

[7]趙磊，張蕾，芮東升.胱硫醚β合成酶G919A多態(tài)性與新疆錫伯族高血壓的相關(guān)性[J].實用醫(yī)學雜志，2015，31（17）：2863-2865.

[8]趙磊，張蕾，芮東升.新疆回族原發(fā)性高血壓與胱硫醚β合成酶G919A多態(tài)性的相關(guān)性[J].實用醫(yī)學雜志，2015，31（19）：3156-3158.

[9]趙磊，張蕾，芮東升.新疆漢族、錫伯族原發(fā)性高血壓與CBS G919A多態(tài)性的相關(guān)性[J].廣東醫(yī)藥，2016，37（2）：224-226.

[10]Meier M， Oliveriusova J， Kraus JP， et al. Structural insights into mutaoons of cystathfenine beta-synathase[J]. Biochim Biophys Acta，2003，1647（1-2）：206-213.

[11]Mendes CC， Raimundo AM， Oliveria LD， et al. DHFR 19-bp deletion and SHMT C1420T polymorphisms and metabolite cocentrations of the folate pathway in individuals with Down syndrome[J]. Genet Test Med Biomarkers，2013，17（4）：274-277.

[12]Sarov M， Not A， de Baulny HO， et al. A case of homocystinuria due to CBS gene mutations revealed by cerebral venous thrombosis[J]. J Neurol Sci，2014，336（1）：257-259.

[13]Ding R， Lin S， Chen D. The association of Cystathionine β Synthase T833C polymorphism and the risk of stroke： A meta-analysis[J]. J Neurol Sci，2012，312（1）：26-30.

（收稿日期：2016-7-11）