pH鹽度對(duì)文昌魚(yú)的急性毒性效應(yīng)

2014-07-08 21:15:22白秀娟盧伙勝馮波

河北漁業(yè) 2014年4期

白秀娟+盧伙勝+馮波

DOI:10.3969/j.issn.1004-6755.2014.04.001

摘要：研究了pH、鹽度對(duì)茂名海域文昌魚(yú)的急性毒性，在水溫（25±1） ℃條件下，找出了文昌魚(yú)在高低pH和高低鹽度水體中96 h LC50分別為：pH為5和10；鹽度為17.5‰和47.5‰。pH和鹽度對(duì)文昌魚(yú)出砂率和死亡率的影響均呈典型的V字型，影響的方程為二項(xiàng)式方程。文昌魚(yú)出砂率和死亡率與pH值和鹽度變化均為高度相關(guān)（r＞0.8）。隨時(shí)間延長(zhǎng)，文昌魚(yú)活力降低，體色加深，出砂和死亡數(shù)增多。

關(guān)鍵詞：文昌魚(yú)；pH；鹽度；急性毒性

文昌魚(yú)（Branchiostoma belcheri）隸屬于脊索動(dòng)物門(mén)（Phylum Chordata），頭索動(dòng)物亞門(mén)（Cephalochordata），終生都保留脊索動(dòng)物門(mén)的三大主要特征——被神經(jīng)管、脊索和咽鰓裂。是研究脊椎動(dòng)物起源與演化的關(guān)鍵類(lèi)群[1-3]。由于其個(gè)體小、軀體半透明、體外受精發(fā)育等有利條件，是文昌魚(yú)作為進(jìn)化發(fā)育生物學(xué)研究的非常理想的模式動(dòng)物[4]。

鹽度是影響水生動(dòng)物生理狀態(tài)的主要環(huán)境因子之一，包括機(jī)體新陳代謝、生長(zhǎng)、營(yíng)養(yǎng)需求等[5]。在高滲或低滲條件下，機(jī)體必須消耗一定的額外能量來(lái)維持水鹽平衡[6]。潮汐、降雨或人類(lèi)活動(dòng)都可能導(dǎo)致海水鹽度的變化，從而造成水生生物滲透脅迫。鹽度脅迫對(duì)一些魚(yú)類(lèi)、蝦蟹類(lèi)研究的報(bào)道相對(duì)較多[7-9]，有關(guān)鹽度脅迫對(duì)文昌魚(yú)的研究報(bào)道卻較少，本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了急性鹽度脅迫對(duì)文昌魚(yú)的影響，旨在為文昌魚(yú)的資源保護(hù)提供參考依據(jù)。

pH值作為水環(huán)境的主要因子，過(guò)高或過(guò)低都可引起水生生物不適，如引起生物呼吸道、表皮的腐蝕損傷。pH對(duì)海水魚(yú)蝦類(lèi)的直接影響表現(xiàn)為酸性過(guò)強(qiáng)可使魚(yú)蝦血液pH值下降，從而削弱其載氧能力，造成缺氧癥，影響蝦的礦化作用，而且低pH會(huì)增加鐵離子、硫離子等物質(zhì)的毒性；反之，堿性過(guò)強(qiáng)的水會(huì)加劇水中的氨氮毒害作用[10-11]。其中pH值對(duì)氨氮毒性影響最顯著[12]。pH值對(duì)蝦類(lèi)相關(guān)研究較多[13-14]，單獨(dú)作為一個(gè)因子對(duì)水生生物的影響的研究相對(duì)較少。

文昌魚(yú)生活于溫帶和熱帶海洋地區(qū)的近海海域，對(duì)棲息環(huán)境要求相對(duì)較高，喜歡干凈砂質(zhì)水底。但隨日益增加的工農(nóng)業(yè)污染排放入海，文昌魚(yú)生活的水域水質(zhì)極易遭到破壞。近年，對(duì)茂名海域文昌魚(yú)的生活棲息及生態(tài)環(huán)境研究日漸報(bào)道[15-17]。本文著重研究了pH值對(duì)茂名海域文昌魚(yú)的急性毒性。

1 材料與方法

1.1 文昌魚(yú)采集

圖1 文昌魚(yú)采集地點(diǎn)

文昌魚(yú)采自廣東茂名大放雞島海域，采集區(qū)域如圖1所示。由潛水員攜帶文昌魚(yú)專(zhuān)用采集器[18](采集面積為0.075 m2)采集泥沙，用套篩分選文昌魚(yú)。將文昌魚(yú)放在裝有海水及底砂的水桶中帶回實(shí)驗(yàn)室。

1.2 文昌魚(yú)暫養(yǎng)

選體長(zhǎng)3.60～4.95 cm，體重0.06～0.19 g，性腺未成熟的幼魚(yú)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。采用經(jīng)曝曬兩天的海水，水溫（24±1） ℃，鹽度（29±1）‰，pH 8.05，NO2-0.07 mg/L，用50 L的水桶，放砂深20 cm左右，砂取自文昌魚(yú)生活海域，暫養(yǎng)時(shí)間為一周。期間投喂自己培育的小環(huán)藻(Cyclotellasp)、小角毛藻(Chaetocerossp)、雙壁藻(Diploneissp)、雙眉藻(Amphora ehrenberg)和人工餌料等，并進(jìn)行微充氧，保證暫養(yǎng)期間海水中的氧含量。

1.3 pH值、鹽度校準(zhǔn)

試驗(yàn)所需藥品速溶海水晶，HCl和NaOH均為分析純。鹽度測(cè)定采用校準(zhǔn)后的鹽度計(jì)（CHO-89264MC），pH值校準(zhǔn)采用便攜式pH計(jì)（PHBJ-260）。

1.4 急性毒性實(shí)驗(yàn)

試驗(yàn)在體積為20 cm×20 cm×30 cm玻璃缸中進(jìn)行，每個(gè)缸放砂深約7 cm，經(jīng)曝曬2 d，用50目篩過(guò)濾的海水2 L。每玻璃缸放經(jīng)過(guò)暫養(yǎng)一周的文昌魚(yú)8尾，高低各設(shè)4個(gè)濃度梯度，每個(gè)濃度設(shè)兩個(gè)重復(fù)。試驗(yàn)期間不充氧，不投喂，時(shí)間設(shè)為96 h，每隔24 h觀察測(cè)定一次，如急性毒性實(shí)驗(yàn)用水濃度有較大幅度降低，則按照比例進(jìn)行補(bǔ)充，保證pH、鹽度的損失率不超過(guò)20%；并記錄文昌魚(yú)出砂、活動(dòng)及死亡情況。

文昌魚(yú)在自然條件下喜將身體的一半埋在沙中，受到干擾或水質(zhì)惡化時(shí)躲藏于砂中；但當(dāng)砂中的環(huán)境條件亦變差時(shí)，將會(huì)逃離砂，重新回到水中。用玻璃棒輕觸，能快速鉆砂，定義為活力強(qiáng)；用玻璃棒輕觸，能游動(dòng)，但不能鉆砂，定義為活力弱；體色在試驗(yàn)過(guò)程中有變紅現(xiàn)象，并且隨時(shí)間延長(zhǎng)和濃度增減，體色加深程度增強(qiáng)；用玻璃棒輕觸，文昌魚(yú)沒(méi)有任何反應(yīng)，定義為文昌魚(yú)死亡。

半致死濃度（LC50）按以下公式[19]略加修改計(jì)算（當(dāng)遇到兩個(gè)數(shù)值都接近50%且與50%差值相同時(shí)，按照兩個(gè)數(shù)值分別計(jì)算出半致死濃度后取平均值）。

LC50＝C1＋[（P1－50%）/（P1－P2）]×（C2-C1）

C1和 C2分別代表成活率最接近 50％的低端濃度和高端濃度，P1和 P2分別代表低端濃度和高端濃度時(shí)的成活率。

2 結(jié)果與分析

2.1 pH對(duì)文昌魚(yú)的影響

2.1.1 pH對(duì)文昌魚(yú)的存活影響不同時(shí)段文昌魚(yú)的存活情況，見(jiàn)表1。

表1 文昌魚(yú)在不同pH值水體中的存活率

項(xiàng)目不同pH條件下的存活率/%

3.5 4.5 5.5 6.5 8.5 9.5 10.5 11.5

24 h 56.25 75 100 100 100 100 81.25 81.25

48 h 43.75 62.5 87.5 100 100 87.5 81.25 68.75

72 h 37.5 56.25 75 100 100 81.25 62.5 43.75

96 h 6.25 43.75 56.25 100 100 68.75 31.25 6.25

將96 h文昌魚(yú)半數(shù)致死的pH定義為96 h LC50，依據(jù)半致死濃度計(jì)算公式找到文昌魚(yú) 96 h LC50分別為低端pH組中96 h LC50為4.2，高端pH組中96 h LC50為10.1。

經(jīng)SPSS11.5軟件分析，低pH（3.5～6.5）組，各pH組文昌魚(yú)出砂率在24 h時(shí)差異顯著（P＜005），在其他各時(shí)間點(diǎn)文昌魚(yú)出砂率隨pH增加差異極顯著（P＜0.01）；相同pH組，第24 h時(shí)出砂率與其他各時(shí)間點(diǎn)出砂率差異極顯著（P＜0.01），48 h與72 h時(shí)出砂率差異顯著（P＜005），96 h時(shí)各組出砂率與第48 h和72 h文昌魚(yú)出砂率與差異極顯著（P＜0.01）。

高pH（8.5～11.5）組， 24 h時(shí)，各pH組隨pH增加文昌魚(yú)出砂率差異顯著（P＜0.05），其他各時(shí)間點(diǎn)文昌魚(yú)出砂率隨pH增加差異極顯著（P＜0.01）。相同pH組，第24 h與48 h文昌魚(yú)出砂率差異不顯著（P＞0.05），與72 h文昌魚(yú)出砂率差異顯著（P＜0.05），與96 h出砂率差異極顯著（P＜0.01）；第48 h與72 h和96 h文昌魚(yú)出砂率差異顯著（P＜0.05），第72 h與96 h文昌魚(yú)出砂率差異顯著（P＜0.05）。

2.1.2 文昌魚(yú)出砂率和pH關(guān)系文昌魚(yú)出砂率和pH的相關(guān)關(guān)系，見(jiàn)圖2。

圖2 文昌魚(yú)出砂率和pH相關(guān)關(guān)系

表2 文昌魚(yú)出砂率與水體中pH值相關(guān)方程

項(xiàng)目 24 h 48 h 72 h 96 h

二項(xiàng)式方程 Y＝-2.31 x2－36.68

x+140.91 Y＝2.87 x2－45.66

x+180.57 Y＝3.79 x2－57.81

x+222.32 Y＝5.87 x2－88.09

x+333.85

R2 R2＝0.8825 R2＝0.9553 R2＝0.9545 R2＝0.9325

文昌魚(yú)出砂率與pH值基本呈V形變化。在pH 介于3.5～8.5時(shí)，文昌魚(yú)出砂率隨pH增加呈下降趨勢(shì)；pH 介于8.5～11.5之間時(shí)，文昌魚(yú)出砂率隨pH增加呈上升趨勢(shì)。

2.1.3 文昌魚(yú)出砂率與水體中pH值相關(guān)分析文昌魚(yú)出砂率與水體中pH值相關(guān)方程見(jiàn)表2。各時(shí)段不同pH值組文昌魚(yú)出砂率隨pH值增加呈二項(xiàng)式相關(guān)，且相關(guān)程度較高，說(shuō)明文昌魚(yú)出砂率與pH值變化高度相關(guān)（r＞0.8）。

2.2 鹽度對(duì)文昌魚(yú)的急性毒性

2.2.1 鹽度對(duì)文昌魚(yú)的存活影響鹽度對(duì)文昌魚(yú)的存活影響見(jiàn)表3。

表3 文昌魚(yú)在不同鹽度組96 h的存活率

項(xiàng)目不同鹽度條件下的存活率/%

10‰ 15‰ 20‰ 25‰ 35‰ 40‰ 45‰ 50‰

24 h 68.75 81.25 100 100 100 100 81.25 81.25

48 h 56.25 75 87.5 100 100 93.75 81.25 56.25

72 h 43.75 56.25 75 100 100 81.25 62.5 43.75

96 h 6.25 31.25 68.75 100 100 75 56.25 31.25

經(jīng)計(jì)算，文昌魚(yú)96 h LC50低鹽度組為176‰，高鹽度組為45.7‰。

經(jīng)SPSS11.5軟件分析，低鹽度組（10‰～25‰），文昌魚(yú)出砂率和其鹽度相關(guān)性差異顯著（P＜0.05）或極顯著（P＜0.01）；各鹽度組相同時(shí)間對(duì)比，文昌魚(yú)出砂率隨鹽度變化差異極顯著（P＜001）。在高鹽度組（35%～50‰），各鹽度組文昌魚(yú)出砂率在24 h時(shí)差異顯著（P＜0.05），其他時(shí)間段文昌魚(yú)出砂率差異極顯著（P＜0.01）；同一鹽度組24 h與72 h以及72 h與96 h對(duì)比，文昌魚(yú)出砂率差異顯著（P＜0.05），第48 h與72 h各鹽度組文昌魚(yú)出砂率差異不顯著（P＞0.01）；其他各組文昌魚(yú)出砂率差異極顯著（P＜0.01）。

2.2.2 文昌魚(yú)出砂率與鹽度關(guān)系文昌魚(yú)出砂率與鹽度關(guān)系，見(jiàn)圖3。

圖3 文昌魚(yú)出砂率與鹽度關(guān)系圖文昌魚(yú)出砂率與鹽度呈V字型，在鹽度10‰～35‰之間，文昌魚(yú)出砂率與鹽度呈負(fù)相關(guān)，鹽度越高，文昌魚(yú)出砂率隨鹽度增高而降低；鹽度介于35‰～50‰之間，文昌魚(yú)出砂率與鹽度呈正相關(guān)，鹽度越高，出砂率越高；時(shí)間越長(zhǎng)，出砂率越高。

2.2.3 文昌魚(yú)出砂率與鹽度相關(guān)分析如表4，在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)，鹽度介于10‰～50‰之間時(shí)，文昌魚(yú)出砂率與鹽度呈二項(xiàng)式相關(guān)，且出砂率與鹽度呈高度相關(guān)（r＞0.8）。

表4 文昌魚(yú)出砂率與鹽度相關(guān)方程

項(xiàng)目 24 h 48 h 72 h 96 h

二項(xiàng)式方程 Y＝-0.16 x2－10.02

x+160.22 Y＝0.19 x2－11.77

x+195.39 Y＝0.2 x2－12.2

x+209.46 Y＝0.2 x2－12

x+218.71

R2 R2＝0.9041 R2＝0.8289 R2＝0.8311 R2＝0.642

3 討論

在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)水體中環(huán)境不利于文昌魚(yú)時(shí)，文昌魚(yú)會(huì)從沙中爬出，當(dāng)中毒較深時(shí)，文昌魚(yú)已經(jīng)無(wú)力鉆進(jìn)沙中，只能呆在水中，用玻璃棒輕輕觸動(dòng)文昌魚(yú)身體，文昌魚(yú)也只能輕輕擺動(dòng)一下身體，無(wú)力游動(dòng)，此時(shí)文昌魚(yú)體色變成深紅色，且有部分腐爛，這樣漂浮一到連天即死亡。我們以出砂作為中毒較淺的指標(biāo)，把死亡作為中毒較深的指標(biāo)，以此來(lái)判定文昌魚(yú)受環(huán)境條件影響的程度。

在高滲或低滲條件下，魚(yú)機(jī)體必須消耗一定的額外能量來(lái)維持水鹽平衡[20]，長(zhǎng)時(shí)間的低鹽度脅迫可能導(dǎo)致細(xì)胞持續(xù)受損[21]，推測(cè)鹽度脅迫對(duì)魚(yú)體的免疫系統(tǒng)有一定的抑制作用[22]。在鹽度25‰～35‰范圍內(nèi)未出現(xiàn)文昌魚(yú)出砂或死亡現(xiàn)象，說(shuō)明此范圍比較適合文昌魚(yú)生活，這與在自然海域中軍曹魚(yú)成魚(yú)分布于鹽度22.5‰～44.5‰水體中[9]頗為相近。在鹽度超過(guò)35‰時(shí)，海水中氧的溶解度隨溫度、鹽度增加而降低[23]，溶解氧的改變會(huì)影響到水體其他環(huán)境因子的變化，這在一定程度上降低了文昌魚(yú)的耐受性，從而使文昌魚(yú)出砂率大大增高，而存活率明顯降低。文昌魚(yú)耐受鹽度的96 h LC50低值為17.6‰，略高于施氏鱘96 h LC50的1472‰和西伯利亞鱘的1308‰[24]，鱘作為脊椎動(dòng)物門(mén)的古老的物種，而文昌魚(yú)作為脊索動(dòng)物門(mén)的代表，從耐受低鹽的能力上看出脊椎動(dòng)物門(mén)的耐受性還是強(qiáng)于脊索動(dòng)物門(mén)的耐受能力的。

pH值適合時(shí)，耗氧率較低；而在pH值不適合時(shí)，魚(yú)體表現(xiàn)出不適應(yīng)，將通過(guò)改變代謝狀況，消耗較多的能量以適應(yīng)外界環(huán)境，表現(xiàn)為增大了蛋白質(zhì)的代謝比例，造成耗能增大、耗氧率升高[25]。水體中 pH 的變化會(huì)對(duì)離體組織的呼吸產(chǎn)生顯著影響，尤其是對(duì)離體鰓組織每單位呼吸面積的影響更顯著[26]。文昌魚(yú)在pH值低于6.5或高于8.5時(shí)，表現(xiàn)為出砂，不停地游動(dòng)、翻滾等躁動(dòng)的現(xiàn)象，pH值越低或越高，這些表現(xiàn)越明顯，不停地游動(dòng)勢(shì)必消耗大量的能量，需要的耗氧量增大；而pH的改變使文昌魚(yú)的呼吸受到嚴(yán)重影響，降低了呼吸效率，使供氧不足，導(dǎo)致出砂和死亡現(xiàn)象。在pH介于65～8.5之間時(shí)，未出現(xiàn)出砂和死亡現(xiàn)象，說(shuō)明此范圍比較適宜文昌魚(yú)生活。文昌魚(yú)耐受高低pH的96 h LC50分別為4.2和10.1，這比中國(guó)林蛙[27]耐受pH的高低值（107和3.6）略低，可能也是由于所屬分類(lèi)地位不同所致。

參考文獻(xiàn)：

[1] Gee H. Vertebrate morphology: Return of the amphioxus [J].Nature,1994，370(6490): 504-505

[2] Lacalli TC. New perspectives on the evolution of protochordate sensory and locomotory systems, and the origin of brains and heads[J]. Phil Trans R Soc Lond B Biol Sci，2001，356(1414):1565-1572

[3] Lacalli TC. Sensory systems in amphioxus: A window on the an-cestral chordate condition [J].Brain Behav Evol, 2004，64(3):148-162

[4] Holland LZ, Laudet V, Schubert M. The chordate amphioxus:：Anemerging model organism for developmental biology [J].Cell Mol Life Sci, 2004，61(18): 2290-2308

[5] Fry F E J.The effect of environmental factors on the physiology of fish[M]. Hoar W S, Randall D J(Eds. ) Fish Physiology Vol VII: Environmental Relations and Behaviour, Academ ic Press, New York, 1971: 1-98

[6] KirschnerL B.The energetics of osmotic regulation in ureotelic and hypoosmotic fishes[J]. Exp Zool, 1993, 267:19-26

[7] 陳宇鋒，艾春香，林瓊武，等.鹽度脅迫對(duì)鋸緣青蟹血清及組織、器官中PO和SOD活性的影響[J].臺(tái)灣海峽，2007, 26（4）：569-575

[8] 王曉杰，張秀梅，李文濤.鹽度脅迫對(duì)許氏平鲉血液免疫酶活力的影響[J].海洋水產(chǎn) 研究，2005，26（6）:17-21

[9] 徐力文，劉廣鋒，王瑞旋，等.急性鹽度脅迫對(duì)軍曹魚(yú)稚魚(yú)滲透壓調(diào)節(jié)的影響[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，2007，18（7）：1596-1600

[10] Walton, W. E., Compton, S. M., Allan, J. D., and Daniels, R. E. The effect of acid stress on survival and reproduction of Dophnia pules(Crustacea: Cladocera). Can. J. Zool. 1982. 60(4): 573-579

[11] Zimmer, D. J. Effects of low pH acclination on cladocerans: Clues to the interaction of physiology and ecology of acid lake zooplankton. In: Witters H. and Vanderborght O. (Editors). Ecophysiology of Acid Stress in Aquatic Organisms. Ann. Soc. R. Zool. Belg. 1987，117(1): 139-149

[12] Meade J W. Allowable ammonia for fish culture [J]. Prog Fish_cult ,1985, 47(3) : 135-145

[13] 趙先銀，李健，李吉濤，等.pH脅迫對(duì)日本對(duì)蝦非特異性免疫因子及RNA/DNA比值的影響[J].漁業(yè) 科學(xué) 進(jìn) 展，2011，32（1）：60-66

[14] 李義.溫度、pH對(duì)日本沼蝦血清酚氧化酶活力及穩(wěn)定性的影響[J].海洋科學(xué)，2002，26（10）：1-3

[15] 馮波，盧伙勝，陳文河.茂名文昌魚(yú)自然保護(hù)區(qū)浮游植物數(shù)量的季節(jié)變動(dòng)[J].海洋環(huán)境科學(xué)，2008，27（5）：484-487

[16] 盧伙勝，沈春燕，馮波.茂名大放雞海域文昌魚(yú)、蛇尾分布及其與底質(zhì)粒度特征的關(guān)系[J]. 中國(guó)海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，38（2）：297-302

[17] 馮波，盧伙勝，陳文河. 廣東茂名大放雞海區(qū)文昌魚(yú)分布與底質(zhì)關(guān)系[J].熱帶海洋學(xué)報(bào)，2006，25（2）：18-23

[18] 盧伙勝，陳春亮，顏云榕.實(shí)用新型專(zhuān)利:中國(guó),ZL200420045790. 7[P]. 2005-05

[19] 呂永林，張永普，單賽賽，等.不同溫度條件下氨氮對(duì)泥蚶的急性毒性影響[J].浙江海洋學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2012,21（1）：54-64

[20] 童燕，陳立僑，莊平，等.急性鹽度脅迫對(duì)施氏鱘的皮質(zhì)醇、代謝反應(yīng)及滲透調(diào)節(jié)的影響[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào)，2007，31增刊（1）：38-44

[21] 楊宇晴，余德光，謝駿，等.急性鹽度脅迫對(duì)斜帶石斑魚(yú) Na+/K+-ATP 酶及血清應(yīng)激指標(biāo)的影響[J].熱帶海洋學(xué)報(bào)，29(4): 160 164

[22] 王文博,李?lèi)?ài)華.環(huán)境脅迫對(duì)魚(yú)類(lèi)免疫系統(tǒng)影響的研究概況[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào),2002,26(4): 368-374

[23] 鮑永恩.遼寧省沿海溫、鹽度對(duì)海水溶解氧濃度的影響和換算[J].海洋環(huán)境科學(xué)，1983，2（3）：82-86

[24] 趙峰，莊平，李大鵬，等.鹽度對(duì)施氏鱘和西伯利亞鱘稚魚(yú)的急性毒性[J].生態(tài)學(xué)雜志，2008,27(6): 929-932

[25] 朱愛(ài)意，趙向炯，付俊.褐菖鲉耗氧率及窒息點(diǎn)的初步研究.海洋水產(chǎn)研究，2007，28(1): 95-99

[26] 王剛，李加兒，區(qū)又君，等.溫度、鹽度、pH 對(duì)卵形鯧鲹幼魚(yú)離體鰓組織耗氧量的影響[J].南方水產(chǎn)科學(xué)，2011，7（5）：37-42

[27] 楊富億，邵慶春，李景林，等.中國(guó)林蛙變態(tài)蝌蚪對(duì)pH、鹽度和堿度的適應(yīng)性[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，2004,15(8)：1411-1415

Acute toxicity of pH and salinity on Branchiostoma belcheri

BAI Xiu

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Juan，LU Huo

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Sheng，F(xiàn)ENG Bo

(Fisheries College, Guangdong Ocean University, Zhanjiang 524088, China)

Abstract：This experiment was conducted to study The acute toxicity of pH and salinity on the Branchiostoma belcheri . To find the 96 h LC50 of Branchiostoma belcheri in the water of pH and salinity .The results showed that the limit of Branchiostoma belcheri in the water of pH and salinity . In the pH water the 96 h LC50 is 5 and 10 ; and in the salinity the 96 h LC50 is 17.5‰ and 47.5‰.The influence of pH and salinity to the rate of out of sand and death rate is V. The effect of equation is binomial equation. The rate of out of sand with the change of salinity and the death rate with the change of salinity are height（r＞0.8）. The lively of Branchiostoma belcheri got much lower，their colour got darken, and the Branchiostoma belcheri got out of sand and death more and more.

Key words：Branchiostoma belcheri; pH; salinity; The acute toxicity

（收稿日期：2014-01-21；修回日期：2014-01-27）