小兒解表止咳口服液中鹽酸麻黃堿含量測(cè)定*

馬 玉，肖 禾，焦小珂，張俊俠

（1.成都大學(xué)，四川 成都611137；2.四川廣元蓉成制藥有限公司，四川 廣元 628000）

小兒解表止咳口服液系由麻黃、杏仁、板藍(lán)根、半夏、青黛、百部等7味藥組成的中藥復(fù)方制劑，是集60余載臨床實(shí)踐而形成的經(jīng)驗(yàn)配方。該驗(yàn)方取《傷寒論》麻黃湯之義，選麻黃、杏仁、半夏等組方，用于小兒呼吸道感染引起的咳嗽痰多等癥。其原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)僅有理化反應(yīng)的定性鑒別和鹽酸麻黃堿的紫外掃描測(cè)定方法，準(zhǔn)確度不夠高。為了更好、更精確地控制藥品質(zhì)量，筆者采用高效液相色譜（HPLC）法測(cè)定方中君藥麻黃所含有效成分鹽酸麻黃堿的含量，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試劑

高效液相色譜儀；G1316A型柱溫箱，G1314A－UV型紫外檢測(cè)器，HP色譜站（美國HP公司）；UVl60型紫外分光光度計(jì)（日本島津公司）；梅特勒AB204型電子分析天平（瑞士）。鹽酸麻黃堿對(duì)照品（批號(hào)為171241－201007，供含量測(cè)定用，中國藥品生物制品檢定所)；小兒解表止咳口服液（四川廣元蓉成制藥有限公司，批號(hào)分別為111101，111102，111103，111201，111203，101201）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱：C18柱(250mm×4.6mm，5μm)；流動(dòng)相：乙腈－含0.1%三乙胺的0.1%磷酸溶液（3:97）；檢測(cè)波長：205nm；流速：1.0mL/min；進(jìn)樣量：10μL。在此條件下，鹽酸麻黃堿與其他組分均可達(dá)到基線分離。高效液相色譜圖見圖1。

2.2 溶液制備

稱取鹽酸麻黃堿2.25mg，精密稱定，置50mL容量瓶中，加0.1mol/L的鹽酸溶液制成每1mL含45μg的溶液，搖勻，即得對(duì)照品溶液。精密量取本品5mL，加水10mL及濃氨試液0.5mL，用乙醚振搖提取5次（30，30，20，20，20mL），合并乙醚液，加鹽酸乙醇溶液（1→20）2mL，混勻，低溫回收溶劑至干，殘?jiān)靡掖?mL溶解，轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶中，加0.1mol/L的鹽酸溶液至刻度，搖勻，即得供試品溶液。按處方比例制備缺麻黃藥材的陰性樣品，按供試品溶液的制備方法制成陰性對(duì)照品溶液。

圖1 高效液相色譜圖

2.3 方法學(xué)考察

線性關(guān)系考察：取鹽酸麻黃堿對(duì)照品，加0.1mol/L的鹽酸溶液，分別制成10，20，40，80，160μg/mL的溶液，精密吸取10μL，注入色譜儀進(jìn)行分析。以鹽酸麻黃堿峰面積值為縱坐標(biāo)、質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程Y＝29989600X－43172，r＝0.9999(n＝5)。結(jié)果表明，鹽酸麻黃堿質(zhì)量濃度在0.01～0.32g/L范圍內(nèi)與峰面積之間呈良好線性關(guān)系。

精密度試驗(yàn)：精密吸取同一對(duì)照品溶液10μL，重復(fù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積。結(jié)果鹽酸麻黃堿峰面積RSD為0.13%(n＝6)，表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn)：精密吸取同一供試品溶液10μL，每隔4h進(jìn)樣，記錄峰面積值。結(jié)果鹽酸麻黃堿峰面積的RSD為0.17%，表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

重復(fù)性試驗(yàn)：精密量取同一樣品（批號(hào)為111101）5mL，共6份，按供試品溶液制備方法處理后測(cè)定。結(jié)果鹽酸麻黃堿含量的RSD為1.5%(n＝6)，表明方法重復(fù)性良好。

加樣回收試驗(yàn)：精密量取已知含量的樣品（批號(hào)為111101）2.5mL，共9份，精確加入鹽酸麻黃堿對(duì)照品適量，按供試品制備方法處理后，測(cè)定鹽酸麻黃堿含量，計(jì)算回收率。結(jié)果見表1。

表1 鹽酸麻黃堿加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n＝9）

2.4 樣品含量測(cè)定

取6批樣品，按供試品溶液的制備方法制備，每批平行制備3次，測(cè)定鹽酸麻黃堿的含量。結(jié)果樣品中鹽酸麻黃堿含量的平均值為0.80mg，即每支樣品含8.0mg鹽酸麻黃堿。測(cè)定結(jié)果見表2。

3 討論

流動(dòng)相選擇：甲醇－含0.04%三乙胺和0.02%二正丁胺的0.092%磷酸溶液（1.5:98.5）[1]、乙腈－0.025mol/L磷酸溶液（10:90）[2]、乙腈－0.1%磷酸（10:90）[3]、0.02mol/L磷酸二氫鉀溶液（含0.2%三乙胺，用磷酸調(diào)p至2.7）－乙腈（96:4）[4]，調(diào)節(jié)流動(dòng)相比例，結(jié)果以乙腈－含0.1%三乙胺的0.1%磷酸溶液（3:97）為流動(dòng)相的柱效最高。

表2 樣品中鹽酸麻黃堿含量測(cè)定

小兒解表止咳口服液為復(fù)方制劑，成分復(fù)雜，分離難度大。在本試驗(yàn)條件下，鹽酸麻黃堿分離效果好，達(dá)到基線分離，且在20min內(nèi)即可分離完畢，無其他成分干擾，有利于鹽酸麻黃堿含量測(cè)定。本方法具有簡便、準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好的特點(diǎn)，可作為小兒解表止咳口服液的質(zhì)量控制檢測(cè)方法。

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