摘 要:為了了解掌握甘肅省豬口蹄疫的感染分布情況以及O型口蹄疫的抗體水平,2009~2012年對全省14個州市定期采集樣品,并進行O型口蹄疫抗體水平、非結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA以及RT-PCR的檢測。結(jié)果表明:2009~2012年O型口蹄疫免疫合格率分別為:2009年72.8 %、2010年78.38 %、2011年75.7 %、2012年82.05 %。病原學(xué)RT-PCR檢測未見陽性;非結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA檢測結(jié)果表明:2009、2010、2011、2012年口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體陽性率分別為5.24 %、3.67 %、3.42 %、3.95 %、四年平均陽性率3.89 %;規(guī)模場、散養(yǎng)戶、屠宰場口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體陽性率分別為:3.22 %、2.90 %、0。
關(guān)鍵詞:豬口蹄疫;抗體水平監(jiān)測;病原學(xué)監(jiān)測
中圖分類號:S851.31 文獻標識碼:C 文章編號:1001-0769(2014)04-0057-02
1 材料和方法
1.1 試驗材料
1.1.1 試驗動物
定期在規(guī)模場、散養(yǎng)戶、屠宰場采集血清樣品,在屠宰場采集心、肝、脾、腎、淋巴結(jié)、扁桃體等內(nèi)臟樣品組織,發(fā)生疫情時在發(fā)病地點采集病料,送實驗室進行病原檢測。
1.1.2 試劑
O型口蹄疫正向間接血凝試驗抗原及標準血清、非結(jié)構(gòu)蛋白抗體3abc ELISA試劑盒購自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所;口蹄疫RT-PCR檢測試劑盒購自北京世紀元亨公司。
1.1.3 主要儀器
生化培養(yǎng)箱、生物安全柜、可調(diào)式電動移液器、酶標分析儀、不銹鋼手提式壓力蒸汽滅菌器、自動洗板機等。
2 試驗方法
參照口蹄疫診斷技術(shù)(GB/T18935-2003),并結(jié)合試劑盒說明書使用以下方法對所采集病料進行實驗室檢測。
① O型口蹄疫正向間接血凝試驗;
② 非結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA3ABC試驗;
③ 口蹄疫RT-PCR試驗。
3 試驗結(jié)果
3.1 正向間接血凝
利用正向間接血凝對2009~2012年所采集的樣品進行O性口蹄疫抗體水平檢測,檢測結(jié)果大于等于1∶32判定為陽性合格,結(jié)果見表1
3.2 口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA方法、RT-PCR方法
利用口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA方法、RT-PCR方法對2009~2012年全省豬口蹄疫感染情況進行實驗室檢測,結(jié)果見表2、3。
4 討論與分析
4.1 O型口蹄疫防控的最大困難
O型口蹄疫陽性樣品在甘肅不同地域、豬群、養(yǎng)殖方式中普遍存在,且感染地域廣泛,這是該病防控的最大困難。預(yù)示著O型口蹄疫隨時可能發(fā)生,因而該病的威脅實際上非常大,但由于病原的大面積污染,使得凈化難度非常大。
4.2 不同的地域間差別巨大
全省480個規(guī)模場,1946個散養(yǎng)戶,104個屠宰場豬口蹄疫RT-PCR檢測未見陽性;非結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA檢測結(jié)果表明:2009、2010、2011、2012年口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體陽性率分別為5.24 %、3.67 %、3.42 %、3.95 %、四年平均陽性率 3.89 %;規(guī)模場、散養(yǎng)戶、屠宰場口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體陽性率分別為:3.22 %、2.90 %、0;各市州口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體陽性率0 %~12.93 %。 可見,2009~2012年在規(guī)模、散養(yǎng)豬群中都有口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體陽性豬,而且不同的地域間差別很大。
4.3 病原廣為散播的原因
一是重養(yǎng)輕防的人為因素。當前甘肅省個別扶貧、民政、甚至獸醫(yī)部門和規(guī)模養(yǎng)殖場主的疫病防制意識比較淡薄,重養(yǎng)輕防,只抓引種、飼養(yǎng)和銷售,一味擴大生產(chǎn)規(guī)模卻不重視疫病防制;很多小型規(guī)模豬場沒有專職獸醫(yī)。這都是管理者防病意識淡薄,認識不足的表現(xiàn),因而不能給疫病防制給予足夠的重視。二是生豬的市場交易混亂等社會環(huán)境因素。在市場管理和檢疫制度執(zhí)行不徹底的情況下,也給畜禽疫病防制帶來了一定的負面影響。三是國家免疫預(yù)防為主的防疫政策中,對豬群發(fā)生疫情時,雖有補助,但補助較少,還不及時,造成養(yǎng)殖戶上報疫情的積極性降低,有隱瞞發(fā)病豬群的可能。四是規(guī)模化豬場的管理欠缺,如:免疫程序不科學(xué),消毒工作不規(guī)范、不徹底,沒有嚴格的種源凈化措施,環(huán)境污染和有害生物的控制滯后等。五是獸醫(yī)防制技術(shù)方面的因素,如生豬的病原檢測方法,在豬瘟、藍耳病等的凈化中,對活體的采樣以及檢測方法的敏感性,都需要進一步改進。