廣西壯族3例肯尼迪病患者的臨床特征及基因突變☆

高文 邱小鷹 劉競麗 陳紅 楊明秀 廖書勝

廣西壯族3例肯尼迪病患者的臨床特征及基因突變☆

高文*邱小鷹*劉競麗△陳紅*楊明秀*廖書勝*

目的 研究廣西壯族肯尼迪病患者的基因突變及臨床特征。方法收集2個壯族肯尼迪病家系共3例患者的臨床表現(xiàn)、生化、神經(jīng)電生理、病理等臨床資料；運用基因分析的方法,明確家系先證者雄激素受體(androgen receptor,AR)基因第1號外顯子CAG序列的重復(fù)數(shù)。結(jié)果3例肯尼迪患者均中青年起病，緩慢進展，表現(xiàn)為四肢乏力，無感覺異常、姿勢性震顫及乳房發(fā)育；2例患者睪酮升高，肌酶中度升高；肌電圖呈神經(jīng)源性損害電生理改變，感覺神經(jīng)傳導(dǎo)均未見異常；2個肯尼迪病家系的AR基因第一號外顯子CAG重復(fù)數(shù)分別為：53、54。結(jié)論廣西壯族肯尼迪病患者具有明顯的臨床及遺傳異質(zhì)性，雄激素受體基因檢測可以作為肯尼迪病診斷的可靠依據(jù)。

肯尼迪病 運動神經(jīng)元病 肌萎縮 睪酮

肯尼迪?。↘ennedy disease）又稱脊髓延髓肌肉萎縮癥（spinal and bulbarmuscular atrophy），是一種X連鎖隱性遺傳的神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病，是由于雄激素受體(androgen receptor,AR)基因1號外顯子的CAG重復(fù)序列的異常擴增所致。1968年由Kennedy等[1]首先報道，并于1991年由La Spada等[2]明確了該病的基因缺陷?？夏岬喜∨R床特點為成年男性起病，下運動神經(jīng)元損害為主，伴感覺及內(nèi)分泌系統(tǒng)改變。歐洲神經(jīng)科學(xué)聯(lián)合會（European Federation of Neurological societies,EFNS）指南[3]將患者AR基因外顯子1的CAG重序列數(shù)目≥35次定為診斷肯尼迪病的依據(jù)。本文報道壯族肯尼迪病患者，并對其臨床特點進行分析。

1 對象與方法

1.1 研究對象3例均為廣西壯族患者，分別就診廣西柳州市人民醫(yī)院及廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院，其中病例Ⅰ與病例Ⅱ來自同一家族，病例Ⅲ為散發(fā)病例，病例Ⅰ與病例Ⅲ為住院患者，病例Ⅱ為門診患者。3例均經(jīng)過詳細的病史詢問及體格檢查，2例住院患者進行了生化等相關(guān)檢測及神經(jīng)電生理檢查，病例Ⅲ進行了神經(jīng)-肌肉活檢檢查。

1.2 雄激素受體基因第1外顯子中的CAG重復(fù)次數(shù)測定在經(jīng)過患者同意并簽署知情同意書后，用EDTA抗凝管抽取患者外周血4ml，用QIAGEN DNA Blood Min Kit試劑盒提取患者外周血白細胞DNA，在擴增型耐熱DNA聚合酶等存在的條件下應(yīng)用PCR技術(shù)擴增雄激素受體基因第1外顯子中的CAG重復(fù)片段，引物序列為KDF（5＇GCTGTGAAGGTTGCTGTTCCTCAT 3＇）和（5＇TCCAGAATCTGTTCCAGAGCGTGC 3＇），將上游引物5端作FAM標記，所得的PCR產(chǎn)物分別去離子甲酰胺混合，經(jīng)過變性后用ABI3130測序儀進行毛細血管電泳，然后用ABIGeneMapperID3.0收集片段信息，通過對比推斷患者樣本的CAG重復(fù)數(shù)。（此部分在廣州金域公司完成）。

2 結(jié)果

2.1 臨床特征3例患者臨床表現(xiàn)為中青年男性起病，緩慢進展，首發(fā)癥狀為四肢乏力，近端明顯，逐步出現(xiàn)四肢肌肉萎縮，痛性痙攣，后期出現(xiàn)延髓肌肉萎縮，3例患者均無乳房發(fā)育、姿勢性震顫及感覺異常。神經(jīng)系統(tǒng)檢查提示：下運動神經(jīng)元損害表現(xiàn)，伴肌肉萎縮，腱反射減弱或消失，3例患者感覺系統(tǒng)無異常(見表1)。所檢兩例患者肌酸激酶均中度升高，肌酸激酶同工酶輕度升高，睪酮升高（見表2）。所檢兩例患者神經(jīng)電生理檢查提示廣泛神經(jīng)源性損害，但感覺神經(jīng)傳導(dǎo)速度未見異常。病例Ⅲ的股四頭肌活檢提示：肌萎縮改變（見圖1）。

2.2 AR第1外顯子中的CAG重復(fù)次數(shù)所檢兩例患者AR第1號外顯子CAG重復(fù)數(shù)分別為：病例I：54次（圖2）；病例Ⅲ53次（圖3）。

3 討論

表1 肯尼迪病患者3例的臨床癥狀及體征

表2 肯尼迪病患者2例生化結(jié)果

肯尼迪病的臨床特點為：四肢近端肌無力，肌肉萎縮，可伴有痛性痙攣、姿勢震顫[4-5]、男性乳房發(fā)育和生殖功能下降；顏面，舌肌萎縮、震顫[6]；可有感覺異常[7]；血清肌酶水平升高，尿酸升高及脂代謝異常[8]。肌肉活檢表現(xiàn)為神經(jīng)源性肌萎縮和肌纖維群組化現(xiàn)象[9]，偶見肌源性損害[10]。本研究中的壯族肯尼迪病患者具備部分典型的臨床表現(xiàn)，但對比其他民族患者，3例壯族患者的特點在以下方面：①在臨床表現(xiàn)方面：針對日本人[4]和巴西人的研究[5]發(fā)現(xiàn)姿勢震顫是肯尼迪病的一種常見的初始癥狀，且對酒精及心得安反應(yīng)良好。一項針對12例[11]法蘭西人肯尼迪病患者的研究發(fā)現(xiàn)所有均具有乳房發(fā)育；針對中國其他民族的肯尼迪病研究報道33.3%的患者有男性乳腺發(fā)育。而本研究中三例壯族患者均無震顫及乳房發(fā)育，有別于其他民族。②在性激素異常方面，本組研究中所檢兩例患者睪酮均升高；而國內(nèi)其他民族相關(guān)研究[9]中發(fā)現(xiàn)血清睪酮(T)、雌二醇(E)、黃體生成素(LH)和卵泡刺激素(FsH)的水平與健康者均值比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義；國外尚未見相關(guān)報道。③在神經(jīng)電生理方面：中國其他民族[12-13]等研究發(fā)現(xiàn)：肯尼迪病患者肌電圖表現(xiàn)為神經(jīng)源性改變，運動神經(jīng)傳導(dǎo)正?；虍惓?，感覺神經(jīng)傳導(dǎo)存在明顯異常；國外Rhodes LE等[14]報道的病例所有的感覺神經(jīng)動作電位均降低；而本研究中的患者運動神經(jīng)檢測部分異常，但感覺神經(jīng)傳導(dǎo)均未見異常。造成此種差異的原因有待進一步研究，但可能與種族，CAG重復(fù)次數(shù)有關(guān)，此外還可能跟DNA甲基化，轉(zhuǎn)錄因子的乙?；蛐揎椧约碍h(huán)境等因素有關(guān)。

圖1 病例Ⅲ股四頭肌活檢圖見肌纖維萎縮、變性，肌間纖維脂肪組織增生，局部灶性淋巴細胞、嗜酸性粒細胞浸潤，符合肌萎縮改變（HE染色100×）

圖2 病例I的AR第1外顯子CAG重復(fù)次數(shù)（54次）

圖3 病例Ⅲ的AR第1外顯子CAG重復(fù)次數(shù)（53次）

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2014-03-20）

（責(zé)任編輯:李立）

10.3936/j.issn.1002-0152.2014.11.010

☆ 國家自然科學(xué)基金（編號：81260177）

* 廣西柳州市人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科（柳州545006）△廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科