七里香醇提物藥理作用研究及急性毒性試驗*

趙春梅， 周銘濤， 趙道強， 黃加文， 楊和金， 吳德松

(云南省藥物研究所， 云南 昆明 650111)

七里香PittosporumpentondrumMerr.var.hainanense(Gagnep.)H.L.Li[P.formosanumHayata;P.formosanumHayatavar.hainanenseGagnep.]為海桐花科植物醉魚草的根。常綠小喬木或灌木，高達12cm。嫩枝被銹色柔毛，老枝禿凈，皮孔不很明顯。分布于臺灣、海南、云南等地。具有活血消腫，解毒止痢的功效。主治跌打損傷，痢疾。民間常用。對七里香的藥理作用研究極少，因此，本文對七里香的乙醇提取物進行了藥理研究，探討其在鎮(zhèn)痛、抗炎、腸推進、抗氧化方面的藥理作用，為將來開發(fā)應用七里香提供實驗依據(jù)，現(xiàn)將實驗結果報道如下。

1 實驗材料

1.1 藥物七里香醇提取物，由云南省藥物研究所提供，70%乙醇提取3次，減壓回收，干燥。提取率為10.6%。使用時用純水配置。藥效試驗給藥劑量以急性毒性試驗結果為依據(jù)確定。阿司匹林腸溶片，100mg/片，Bayer Schering Pharma生產，批號：BJ10778；人參蜂王漿，批號：BJ：2010102606；二甲苯，廣東省化學試劑工程技術研究開發(fā)中心，批號：20090831。

1.2 動物SPF級昆明種小鼠，雌雄各半，體重18～22g，由廣東省醫(yī)學實驗動物中心提供。許可證號：SCXK(粵)2008-0002。小鼠分性別飼養(yǎng)于空調實驗室內，室溫(22±2)℃，相對濕度(60±2)%，喂顆粒標準飼料，自由飲水和攝食。

2 方法

2.1 腸推進作用研究 小鼠按體重隨機分為3組：正常對照組、七里香醇提物低、高劑量組。給藥前開始禁食12 h，按劑量灌胃給藥1次，給藥后30 min灌服墨汁，0.2 mL/只，灌服墨汁后20 min處死小鼠，打開腹腔分離腸系膜，剪取幽門至回盲部的腸管，輕輕將小腸拉成直線，測量腸管長度作為“小腸總長度”，從幽門至墨汁前沿的距離作為“墨汁在腸內推進距離”。計算墨汁推進百分率，進行統(tǒng)計分析。結果見表1.

表1 七里香腸推進作用研究

結果表明：七里香醇提物以3.0、6.1 g/kg(相當于生藥28.30、57.55 g/kg)的劑量灌胃給藥1次，能顯著促進小鼠小腸推進運動，2組促進率分別為：45.97、54.50%，3.0、6.1 g/kg劑量組與空白對照組相比較差異顯著(P<0.001)。顯示出腸推進作用。

2.2 鎮(zhèn)痛試驗 取小鼠40只， 體重18～22g，雌雄各半，隨機分為4組，組別及劑量如表2，按照表2劑量ig給藥，每日1次，連續(xù)6 d。末次給藥后45 min，ip0.6%冰醋酸0.1 mL/10g/只，立即記錄15 min內的扭體反應(小鼠出現(xiàn)腹部內凹、軀干與后肢伸張，臀部抬起反應為準)次數(shù)，并計算其抑制率。 實驗結果見表2。

表2 七里香醇提取物對醋酸所致小鼠扭體反應的影響

結果表明：七里香醇提取物以3.00、6.00 g/kg(相當于生藥28.30、56.60g/kg)的劑量連續(xù)灌胃給藥6 d，2組均能不同程度抑制醋酸所致小鼠扭體性疼痛，抑制率分別為：23.76、46.12%，尤以6.00 g/kg劑量組作用明顯，與空白對照組相比較具有顯著性差異。顯示出鎮(zhèn)痛作用。

2.3 抗炎試驗 選用18～22 g小鼠40只，按體重隨機分為4組，每組雌雄各5只，分組及給藥情況見表3。各組均預先每日灌胃給藥1次，連續(xù)7 d，對照組灌服等容量純水，各組灌胃容積均為20 mL/kg體重。末次給藥后30 min，各組小鼠于右耳兩面均勻涂抹二甲苯0.05 mL，左耳不涂為對照。致炎后1h脫頸椎處死動物，用直徑6 mm的打孔器將雙耳同部位等面積切下，取耳片稱重，以兩耳片重量之差作為腫脹度。實驗結果見表3。

表3 七里香醇提取物對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響

結果表明：七里香醇提取物以3.00、6.00 g/kg(相當于生藥28.30、56.60 g/kg)的劑量連續(xù)灌胃給藥7 d，2組均能不同程度抑制二甲苯所致小鼠耳廓腫脹，抑制率分別為：47.38、52.71%，尤以3.00、6.00 g/kg劑量組作用明顯，與空白對照組相比較具有顯著性差異。顯示出抗炎作用。

2.4 對正常小鼠血清MDA含量和SOD活性的影響 選用18～22g小鼠40只，按體重隨機分為4組，每組雌雄各5只，分組及給藥情況見表4。各組均預先每日灌胃給藥1次，連續(xù)10 d，對照組灌服等容量純水，各組灌胃容積均為20 mL/kg體重。末次給藥后1 h，從小鼠眼眶靜脈叢取血，分離血清，按臨床試劑盒方法測定血清中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。結果見表4。

表4 七里香醇提取物對對正常小鼠血清MDA含量和SOD活性的影響

結果表明：七里香醇提取物以3.00g/kg、6.00g/kg(相當于生藥28.30g/kg、56.60g/kg)的劑量連續(xù)灌胃給藥10天，能有效降低小鼠血清MDA含量，同時提高SOD活性，提示其具有顯著的抗氧化作用。

2.5 小鼠急性毒性實驗

2.5.1 正式實驗 根據(jù)預實驗的結果將KM小鼠40只隨機分為2組，即溶媒對照組和七里香20.02g/kg.bw1個劑量組，每組20只，♀♂各10只。動物禁食不禁水約6h39min～7h4min后，按40 ml/kg體重一次灌胃給予相應供試品，觀察其急性毒性反應和死亡情況，以后每天觀察1次，連續(xù)14 d；于給藥第4、7、14 d稱量體重；觀察結束處死動物，大體解剖觀察各動物臟器、器官的體積、顏色、質地等有無明顯異常。

2.5.2 試驗結果與分析

2.5.2.1 毒性反應 小鼠灌胃給予供試品七里香醇提物后，在4 h內未出現(xiàn)毒性反應。

2.5.2.2 體重 試驗期間，給藥后第3天，各劑量組小鼠體重持續(xù)增長，與溶媒對照組比較無顯著性差異(P>0.05)；至給藥后第7天，20.02g/kg.bw七里香雌鼠體重增長較快，與溶媒對照組比較具有顯著性差異(P<0.01)；至給藥后第14天，各劑量組小鼠體重持續(xù)增長，與溶媒對照組比較無顯著性差異(P>0.05)。

表5 七里香小鼠灌胃急性毒性試驗各組動物的體重

2.5.2.3 解剖觀察 觀察14天結束后脫頸椎處死的動物進行大體解剖觀察，肉眼觀察心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、胸腺、卵巢、子宮、精囊、前列腺、睪丸、胃、腸及胸腔、腹腔，各組織和器官的體積、顏色、質地等，七里香醇提物各劑量組、溶媒對照組各小鼠器官均無肉眼所見異常。

2.5.3 評價與結論 在本實驗條件下，對七里香醇提物不同劑量進行24h內小鼠單次灌胃給藥急性毒性試驗，可見動物于4 h內未出現(xiàn)毒性反應。試驗結束對存活動物進行大體解剖觀察，各組動物臟器、器官的體積、顏色、質地等均未見明顯異常。七里香醇提物24h內小鼠灌胃給藥最大給藥量為20.02g/kg.bw(相當于生藥188.87g/kg.bw)，各組均未出現(xiàn)動物死亡。

3 討論與小結

七里香是云南民間常用藥。具有活血消腫，解毒止痢的功效。主治跌打損傷，痢疾。七里香藥理作用的活性成分及其作用機制研究較少。為了探討和開發(fā)七里香的藥用價值，本文對其進行了腸推進、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗氧化等藥理作用的實驗研究。結果表明，急性毒性實驗顯示，七里香醇提物最大給藥量為20.02g/kg.bw(相當于生藥188.87g/kg.bw)，表明其毒性很小。七里香能顯著促進小鼠小腸推進運動，能抑制醋酸所致小鼠扭體性疼痛，能抑制二甲苯所致小鼠耳廓腫脹，能有效降低小鼠血清MDA含量，同時提高SOD活性。說明七里香具有腸推進作用、鎮(zhèn)痛作用、抗炎作用、抗氧化作用。本實驗結果為七里香將來產品研發(fā)和臨床應用提供了科學依據(jù)。

參考文獻：

[1]國家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會.中華本草[M].第4冊第10卷，上海:上?？茖W技術出版社，1999:63.