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    常用食品防腐劑以及酸性條件對乳酸菌的影響

    2014-03-21 06:26:20王晨波
    化學與生物工程 2014年6期
    關(guān)鍵詞:山梨酸鉀苯甲酸鈉酸性

    王晨波

    (雀巢研發(fā)中心上海有限公司,上海201812)

    乳酸菌是一種常見的益生菌,可將碳水化合物轉(zhuǎn)化為乳酸以及其它的抗菌成分,廣泛應(yīng)用于生物治療[1]和農(nóng)業(yè)[2]等領(lǐng)域:存在于人體腸胃道及陰道中,通過構(gòu)筑保護層來隔絕致病菌與上皮細胞的接觸(如發(fā)酵乳桿菌Lactobacillus fermentum)[3];用于生產(chǎn)各種不同類型的發(fā)酵食品如酸奶、泡菜、酒類,經(jīng)過發(fā)酵后,可減輕蛋白質(zhì)造成的過敏反應(yīng)(如經(jīng)植物乳桿菌Lactobacillus plantarum發(fā)酵的豆制品[4]);存在于大自然中,是常見的食品酸敗菌,影響到食品的品質(zhì)并縮短食品的保質(zhì)期(如常見的啤酒酸敗菌:干酪乳桿菌Lactobacillus casei和短乳桿菌Lactobacillus brevis[5])。

    山梨酸鉀和苯甲酸鈉是常用的食品防腐劑,在環(huán)境pH值低于5時,可以抑制微生物體內(nèi)的酶反應(yīng),從而抑制甚至殺死細菌、酵母或霉菌[6]。

    現(xiàn)有的研究主要集中在如何保證乳酸菌的活性及其抑菌效果方面,而極少將它們作為酸敗菌進行實驗。實際上,在食品質(zhì)量與安全的評估中,經(jīng)常選取乳酸菌作為評估食品保質(zhì)期的指標菌,尤其是那些高水分活度(AW>0.93[7])的食品。因此,作者選取了5株常見乳酸菌,就它們對酸性條件、山梨酸鉀和苯甲酸鈉的耐受性進行了研究,擬為選取相應(yīng)的菌種作進一步的應(yīng)用研究提供參考。

    1 實驗

    1.1 菌株與培養(yǎng)基

    5株乳酸菌包括2株Lactobacillus plantarum(LAC1,LAC2)、1株Lactobacillus casei(LAC3)、1株Lactobacillus brevis(LAC4)和1株Lactobacillus fermentum(LAC5),由雀巢研發(fā)總部提供。

    實驗采用Broth培養(yǎng)基,水分活度均在0.99左右。

    1.2 細菌細胞的處理

    所有菌株都在deMann Rogosa Sharpe(MRS)Broth培養(yǎng)基(Merck)中于30℃、無氧條件下(BBL Gas Jars使用Merck Anaerocult A Gas Pak system)復活復壯[8]。實驗前每株菌株都必須培養(yǎng)48h,然后用0.85%的鹽水在離心機(SorvallBiofuge Fresco)上以1 000×g轉(zhuǎn)速清洗2次(4℃,2min)。在培養(yǎng)過程中,分別于第0d、第1d、第4d和第7d取樣,用MRS Agar平板(Merck)來記錄乳酸菌的活菌數(shù)(以lgCFU計,CFU單位為個·mL-1)。

    1.3 酸性條件對乳酸菌生長影響的考察

    各取5株處理后的乳酸菌10μL分別接入5種不同pH值(4.2、3.8、3.4、3.0、2.8)[8]的10mL MRS Broth培養(yǎng)基(用1mol·L-1鹽酸調(diào)節(jié)pH值)中,于第0d、第1d、第4d和第7d取樣觀察乳酸菌在30℃、無氧條件下的生長情況。

    1.4 山梨酸鉀和苯甲酸鈉在酸性條件下對乳酸菌生長影響的考察

    取5株處理后的乳酸菌各10μL分別接入含有200×10-6或500×10-6山梨酸鉀、200×10-6或500× 10-6苯甲酸鈉的10mL MRS Broth培養(yǎng)基(用1mol ·L-1鹽酸調(diào)節(jié)pH值)中,于第0d、第1d、第4d和第7d取樣觀察乳酸菌在30℃、無氧條件下的生長情況。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 酸性條件對乳酸菌生長的影響(圖1)

    圖1 5株乳酸菌在5種酸性條件下的生長情況Fig.1 Growth of five species of Lactobacillus spp.under five kinds of acidic conditions

    由圖1可以看出,酸性條件對乳酸菌生長的影響如下:pH值為4.2、3.8和3.4時,所有菌株都能生長;pH值為3.0時,LAC3(Lactobacillus casei)和LAC4(Lactobacillus brevis)可以生長,LAC1(Lactobacillus plantarum)、LAC2(Lactobacillus plantarum)和LAC5(Lactobacillus fermentum)不能存活;pH值為2.8時,所有菌株都不能存活。

    5株乳酸菌對酸性條件的耐受性如下:LAC3(Lactobacillus casei),LAC4(Lactobacillus brevis)>LAC1(Lactobacillus plantarum)>LAC5(Lactobacillus fermentum)>LAC2(Lactobacillus plantarum)。

    2.2 山梨酸鉀和苯甲酸鈉在酸性條件下對乳酸菌生長的影響(圖2)

    由圖2可以看出,山梨酸鉀和苯甲酸鈉在酸性條件下對乳酸菌生長的影響如下:pH值為4.2時,山梨酸鉀濃度為200×10-6和500×10-6的情況下,所有菌株都能生長;pH值為3.8時,苯甲酸鈉濃度為200× 10-6和500×10-6的情況下,所有菌株都能生長;pH值為3.4時,苯甲酸鈉濃度為200×10-6的情況下,所有菌株都能生長;pH值為3.4時,苯甲酸鈉濃度為500×10-6的情況下,LAC3(Lactobacillus casei)、LAC4(Lactobacillus brevis)和LAC5(Lactobacillus fermentum)可以生長,LAC1(Lactobacillus plantarum)和LAC2(Lactobacillus plantarum)不能存活。

    5株乳酸菌對酸性條件下的山梨酸鉀和苯甲酸鈉的耐受性如下:LAC3(Lactobacillus casei),LAC4(Lactobacillus brevis),LAC5(Lactobacillus fermentum)>LAC1(Lactobacillus plantarum),LAC2(Lactobacillus plantarum)。

    3 結(jié)論

    5株常見的乳酸菌被挑選出來,在不同pH值和防腐劑濃度的條件下進行生長情況的監(jiān)測和分析。結(jié)果表明,乳酸菌對于低pH值(>3.0)和防腐劑(如苯甲酸鈉濃度<500×10-6)的耐受性均較強。

    圖2 5株乳酸菌在不同酸性條件和食品防腐劑濃度下的生長情況Fig.2 Growth of five species of Lactobacillus spp.under different kinds of acidic conditions with different concentrations of food preservative

    [1] VIEIRA L Q,dos SANTOS L M,NEUMANN E,et al.Probiotics protect mice against experimental infections[J].J Clin Gastroenterol,2008,42(S3):S168-S169.

    [2] 汪燕玲.幾種有益微生物及其對水質(zhì)的改良作用[J].漁業(yè)現(xiàn)代化,2004,(4):29-30.

    [3] OSSET J,BARTOLOME R M,GARCIA E,et al.Assessment of the capacity of Lactobacillus to inhibit the growth of uropathogens and block their adhesion to vaginal epithelial cells[J].J Infect Dis,2001,183(3):485-491.

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    [8] COLLINS J K,O′SULLIVAN G C,THORNTON G M,et al.Probiotic strains from Lactobacillus salivarius and antimicrobial agents obtained therefrom:US,7186545B2[P].2007-03-06.

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