解金輝,種靖慧,黃 嫻,王 維,董 崢,李立新,李彤彤,李 力,閆莉娜
(天津市血液中心,天津300110)
新生兒溶血?。╤emolytic disease of the newborn,HDN)是一種由于母嬰血型不合所引起的新生兒同種免疫性溶血疾病,常見于ABO血型系統(tǒng),即母親血型為O型,嬰兒血型為A或者B型。該病僅發(fā)生于胎兒與早期新生兒,是新生兒早期黃疸的重要原因。本文將送檢至本實驗室的1939例懷疑因母嬰ABO血型不合引起的新生兒標本進行檢測,并對檢測結果進行分析。
2012年8月至2013年8月間因臨床表現(xiàn)懷疑患有HDN的新生兒血樣送至本實驗室進行HDN檢測。新生兒血樣均為EDTA抗凝保存。
抗A、抗B血清及反定型細胞Ac、Bc、Oc由上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司提供;微柱凝膠檢測卡由達亞美(Diamed)公司提供;抗體篩選細胞由sanquin公司提供,IgM抗D血清由長春博德生物技術有限責任公司提供。
試管法檢測新生兒及母體ABO及RhD血型。
新生兒紅細胞直接抗人球蛋白試驗,紅細胞抗體釋放試驗,游離抗體試驗及母體不規(guī)則抗體篩選試驗均由微柱凝膠法檢測,試驗操作遵守達亞美凝膠卡使用說明。其中新生兒細胞抗體釋放試驗采用56℃水浴熱放散。
新生兒溶血的診斷標準:(1)母嬰血型不合;(2)早期出現(xiàn)高膽紅素血癥(病理性黃疸)和/或貧血;(3)作改良直接抗人球蛋白試驗,抗體釋放試驗及游離試驗,其中,改良直接抗人球蛋白試驗及/或抗體釋放試驗陽性可確診[1]。
采用SPSS 21軟件進行卡方檢驗。
在1939份標本中,母親血型均為O型RhD陽性,并且抗體篩選試驗均為陰性。A型血嬰兒818例,其中直接抗人球蛋白試驗陽性141例,紅細胞抗體釋放試驗陽性730例。B型血嬰兒1121例,其中直接抗人球蛋白試驗陽性121例,紅細胞抗體釋放試驗陽性881例。A型血與B型血嬰兒的直接抗人球蛋白試驗和釋放試驗陽性率差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05,表 1)。
Tab.1 Positive rate contrast between blood type A and B
在1939份標本中,出生5 d內的嬰兒有1779人,日齡大于5 d的嬰兒160人,兩組嬰兒HDN陽性率差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05,表 2)。
Tab.2HDN positive rate in different age group
ABO血型不合是引起新生兒溶血病常見的原因之一,主要為O型血的母親引起A型血或B型血的嬰兒患病,在本文的統(tǒng)計中,A型血的嬰兒庫姆試驗陽性率和釋放試驗陽性率都較B型血的嬰兒高,而且這種差異具有統(tǒng)計學意義。由于A型血嬰兒紅細胞表面的A抗原多于B型血嬰兒紅細胞表面的B抗原,所以當母體中的IgG抗A或者抗B進入胎兒體內后,A型紅細胞表面吸附的抗體就會多于B型紅細胞,所以A型血的嬰兒直接抗人球蛋白試驗和釋放試驗陽性率都會高于B型血的嬰兒。本試驗結果與其他文獻報道是相同的[2]。
在檢測嬰兒血型時,只需正定型檢測即可,如果正定型凝集強度弱,表示紅細胞表面抗原數(shù)量少,可能是抗原仍未發(fā)育完全,也可能因為血型為亞型,在血清學試驗不能確定血型時,我們可以通過高分辨的基因分型方法準確定型[3],因為抗原數(shù)量較少,母體中的IgG抗A或者抗B對其紅細胞破壞也比較小,所以不會引起嚴重的HDN。
送檢HDN的患兒血樣采集時間與HDN檢出率呈負相關關系,越早送檢,HDN檢出率就越高[4],所以如果嬰兒臨床表現(xiàn)懷疑HDN時,應當盡快送檢,及時對癥治療。在本文釋放試驗陽性中,最大嬰兒日齡為20 d,提示我們如果錯過最佳檢測時間,仍然應該盡快送檢。
在HDN檢測中,只有抗人球蛋白試驗陽性和釋放試驗陽性是診斷標準,如果這兩項試驗結果陰性,而游離抗體試驗陽性是不能確診的,因為即使患兒血液中含有抗體,但是其紅細胞表面沒有該抗體對應的抗原,即紅細胞不能被致敏,也就不會導致溶血。
HDN傳統(tǒng)的檢測方法是試管法,該方法操作繁雜,靈敏度低,結果不易判斷,漏檢率高。而微柱凝膠檢測卡操作簡單,重復性好,在新生兒溶血病檢測試驗中,也比試管法有明顯高的靈敏度[5]。在本文中采用的方法微微柱凝膠法,使得有臨床表現(xiàn)的患兒HDN檢出率達到了83.1%(1611/1939)。此外,還要注意酶化細胞制備過程,避免酶化細胞發(fā)生溶血,影響最終檢測結果。正確的檢測結果能夠指導臨床及時對患兒進行有針對性的治療,減少該病對嬰兒造成的影響。
[1] 金漢珍,黃德珉,官希吉,等.實用新生兒學[M].第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2000:531-550.
[2] 薛向陽,金春子,呂勝利.105例母嬰ABO血型不合的新生兒中溶血病的實驗室檢測結果分析[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2006,14(8):64-67.
[3] 張純武,王本泉,劉 彪,等.基因分型方法在疑難血型鑒定中的應用[J].中國應用生理學雜志,2013,29(5):461-464.
[4] Whyte J,Graham H.Prediction of the severity of ABO haemolytic disease of the newborn by cord blood tests[J].Acta Paediatr Scand,1981,70(2):217-222.
[5] 陳 華,伍 燕,王嬌華.微柱凝膠技術在新生兒溶血病抗體檢測中的應用研究[J].中國全科醫(yī)學,2012,15(26):3079-3080.