我國大菱鲆病毒性紅體病的研究進(jìn)展

摘 要：大菱鲆病毒性紅體病的頻繁暴發(fā)給我國大菱鲆養(yǎng)殖業(yè)造成了嚴(yán)重的危害，本文將綜述我國大菱鲆病毒性紅體病及其病原虹彩病毒的研究進(jìn)展，旨在為病毒性紅體病的防治提供一定的理論基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：大菱鲆 紅體病 虹彩病毒

中圖分類號：S941 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號：1672-3791（2013）04（c）-0230-01

1 大菱鲆病毒性紅體病

因肉質(zhì)美味而被大眾熟知的大菱鲆（Sophthalmus maximus）是我國東部沿海地區(qū)的一種重要的海水養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)魚類，隸屬于硬骨魚類、鰈形目，雙眼位于身體的一側(cè)，俗稱比目魚和多寶魚[1]。大菱鲆養(yǎng)殖規(guī)模擴(kuò)大的同時(shí)病害也隨之增多，尤其是近年來大菱鲆紅體病的頻繁暴發(fā)，已嚴(yán)重影響了我國大菱鲆的健康養(yǎng)殖。通常把大菱鲆鰭基部和腹面脊椎骨沿線充血發(fā)紅的病癥稱為大菱鲆紅體病，根據(jù)已有報(bào)道大菱鲆紅體病的病原是多樣性的，病毒、細(xì)菌和寄生蟲都會(huì)使大菱鲆出現(xiàn)相似的紅體病癥，但其中以病毒性病原導(dǎo)致的損失尤為明顯。

病魚在感染初期死亡較少，但出現(xiàn)明顯癥狀后很快死亡，屬亞急性死亡?；疾『痛顾赖拇罅怫抑饕牟“Y是體表無明顯損傷，但是在魚體腹面無眼側(cè)沿脊椎骨附近皮下及各鰭部淤血、發(fā)紅；嚴(yán)重時(shí)整個(gè)魚體腹面呈粉紅色，同時(shí)鰓絲呈暗灰色。解剖后可見病魚腫大的腎臟呈灰白色，血液稀薄、凝固性很差[2]。

2 大菱鲆病毒性紅體病的流行概況

大菱鲆病毒性紅體病從2001年開始導(dǎo)致大菱鲆魚苗和養(yǎng)成魚大量死亡，并且在我國多個(gè)大菱鲆養(yǎng)殖場流行。特別是在2003年，山東省煙臺(tái)蓬萊的一家大菱鲆養(yǎng)殖場，養(yǎng)成期的大菱鲆在發(fā)病后1個(gè)月內(nèi)的累積死亡率高達(dá)20%以上，造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。秋、冬季節(jié)（8～12月份）為該病毒侵染的高發(fā)季節(jié)，在大菱鲆養(yǎng)殖的各個(gè)時(shí)期都有感染，包括苗期、養(yǎng)成期和親魚培育期，感染力較強(qiáng)[2]。

3 大菱鲆病毒性紅體病病原研究

2004年史成銀等首次報(bào)道了我國養(yǎng)殖大菱鲆紅體病虹彩病毒，經(jīng)電鏡觀察，在紅體病魚的鰓、腎臟、脾臟和腸等多個(gè)組織內(nèi)發(fā)現(xiàn)了近球形的病毒，二十面體對稱，呈現(xiàn)典型的內(nèi)酯膜樣結(jié)構(gòu)[3]。

3.1 分子水平研究

史成銀等從紅體大菱鲆中分離得到大菱鲆紅體病虹彩病毒（Turbot reddish body iridovirus，TRBIV），測定了其全基因組序列，克隆了ATPase和MCP等基因，并對獲取的全序列進(jìn)行了基因組分析，從分子水平上進(jìn)一步驗(yàn)證了大菱鲆紅體病病原為虹彩病毒，同時(shí)也為虹彩病毒的分子研究奠定了基礎(chǔ)。在分子檢測領(lǐng)域陸續(xù)報(bào)道了根據(jù)該病毒的保守基因而建立的多種分子生物學(xué)檢測技術(shù)，包括常規(guī)PCR檢測技術(shù)、Real time PCR技術(shù)、套式PCR以及核酸探針技術(shù)等[4～8]，為大菱鲆紅體病的及時(shí)診斷提供了多種快速高效的檢測技術(shù)，以對癥下藥。

李向勇等對病毒粒子的蛋白組進(jìn)行了初步的研究，采用蔗糖密度梯度離心的方法，從患病大菱鲆不同組織中提純到了病毒粒子，對提純的病毒粒子進(jìn)行SDS-PAGE分析，并分離出了50.9 KDa的蛋白帶[9]。王亞楠等使主要衣殼蛋白MCP基因在畢赤酵母中重組分泌表達(dá)，運(yùn)用酵母雙雜交系統(tǒng)，以MCP構(gòu)建誘餌蛋白，篩選與TRBIV MCP相互作用的大菱鲆脾細(xì)胞蛋白，從而揭示虹彩病毒感染宿主細(xì)胞的分子機(jī)制[10]。

3.2 細(xì)胞培養(yǎng)水平研究

病毒的分離和培養(yǎng)常用方法是敏感細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。史成銀等利用牙鲆胚胎細(xì)胞（flounder embryonic cell line，F(xiàn)EC）接種TRBIV，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，過濾除菌的含大量病毒的病魚脾組織勻漿液可以使FEC單層培養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)生明顯的細(xì)胞病變（cytopathic effect，CPE），而且在病變細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中可觀察到大量的病毒粒子。樊廷俊等使用牙鲆鰓細(xì)胞系（FG）細(xì)胞接種TRBIV，細(xì)胞出現(xiàn)了典型的細(xì)胞病變，同時(shí)還優(yōu)化了病毒的培養(yǎng)條件[2，8，11]。

3.3 疫苗水平研究

在病毒疫苗研究方面，樊廷俊等利用甲醛滅活法制備了TRBIV滅活疫苗，并用病毒感染實(shí)驗(yàn)證明了TRBIV疫苗對健康大菱鲆具有安全性和極高的免疫保護(hù)率，可用于大菱鲆的預(yù)防免疫[12]。

4 前景展望

近年來，對大菱鲆紅體病虹彩病毒的研究從診斷檢測、疫苗研制、病毒培養(yǎng)等方面都取得了一定的進(jìn)展，但還有很多方面值得深入研究。比如揭示該病毒具體的感染機(jī)制和免疫逃逸機(jī)制，研究病毒和宿主細(xì)胞的相互作用以及調(diào)控方式，找出宿主抗病毒基因等，以便開發(fā)出有效可靠的特效疫苗，對大菱鲆紅體病的防治均具有重要的意義。

參考文獻(xiàn)

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