毛細(xì)管氣相色譜法測定二乙基二硫的含量

賀紅舉

(河南化學(xué)工業(yè)技師學(xué)院 工業(yè)分析系，河南 開封 475002)

乙蒜素是大蒜素的乙基同系物，是一種高效廣譜仿生殺菌劑[1]，兼具植物生長調(diào)節(jié)作用，能促進(jìn)萌芽、提高發(fā)芽率、增加產(chǎn)量和改善品質(zhì)，是復(fù)配殺菌劑農(nóng)藥的首選原料[2-3]. 二乙基二硫則是乙蒜素合成過程中的關(guān)鍵中間體，它的含量對乙蒜素的質(zhì)量及收率具有十分重要的意義[4]. 目前國內(nèi)有關(guān)二乙基二硫的分析方法，尚未公開報道. 本文采用OV-17毛細(xì)管氣相色譜柱和FID檢測器，對二乙基二硫進(jìn)行了分離和定量分析，該方法準(zhǔn)確性高，分析速度快，重復(fù)性好，適用于產(chǎn)品的中控分析，為生產(chǎn)投料提供了依據(jù).

1 實驗部分

1.1 儀器

SP6800A氣相色譜儀，F(xiàn)ID檢測器，N-2000氣相色譜工作站； OV-17毛細(xì)管柱；FA1004N電子天平.

1.2 試劑

丙酮：分析純；正十四烷內(nèi)標(biāo)物；二乙基二硫?qū)φ掌罚菏惺?上海有機(jī)化工研究所)；二乙基二硫樣品：市售(河南大地農(nóng)化責(zé)任公司)，優(yōu)等品.

1.3 內(nèi)標(biāo)溶液的配制

用差減法精密稱取正十四烷5 g，于500 mL容量瓶中，用丙酮溶解，稀釋至刻度，搖勻，即得內(nèi)標(biāo)溶液.

1.4 對照品溶液的配制

用差減法精密稱取二乙基二硫?qū)φ掌?.1 g加入25 mL容量瓶中，準(zhǔn)確加入10.00 mL內(nèi)標(biāo)溶液，用丙酮稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液.

1.5 樣品溶液的配制

精密稱取含二乙基二硫約0.1 g的試樣置于25 mL容量瓶中，準(zhǔn)確加入10.00 mL內(nèi)標(biāo)溶液，用丙酮稀釋至刻度，搖勻，即得樣品溶液.

1.6 色譜條件

采用SP6800A氣相色譜儀，OV-17彈性石英毛細(xì)管柱(30 m×0.32 mm×0.6 μm),載氣為氮氣,氫火焰離子化檢測器,柱溫100 ℃,汽化室溫度135 ℃,檢測器溫度150 ℃,N2流速1.0 mL/min,尾吹氣流速20 mL/min,H2流速30 mL/min，空氣流速300 mL/min,分流比50∶1,進(jìn)樣量0.5 μL,標(biāo)樣色譜圖見圖1. 二乙基二硫的保留時間為4.4 min，正十四烷的保留時間為5.1 min.

圖1 二乙基二硫標(biāo)樣的氣相色譜圖Fig.1 Gas chromatogram of standard sample for ethyl disulfide

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件的選擇

柱溫的選擇：在使最難分離的組分有盡可能好的分離效果的前提下，盡可能采用較低的柱溫，但以保留時間適宜，峰形不拖尾為好. 進(jìn)行了95 ℃、100 ℃、105 ℃、110 ℃、120 ℃、125 ℃、130 ℃柱溫實驗，最終選擇了100 ℃的柱溫較為適宜.

汽化室的溫度選擇：一般汽化溫度比柱溫高30～70 ℃或比樣品組分最高沸點高30～50 ℃，以保證進(jìn)入的液體瞬間汽化，分別選擇了110 ℃、120 ℃、130 ℃、135 ℃、140 ℃、145 ℃、150 ℃進(jìn)行對比，最終選擇了135 ℃為汽化溫度較為適宜.

檢測器的溫度選擇：一般來說，檢測器和從色譜柱到檢測器的鏈接處必須熱到使樣品和流出組分不出現(xiàn)冷凝，峰的加寬和各峰的衰減是冷凝作用的表征，選擇了120 ℃、130 ℃、140 ℃、150 ℃、160 ℃進(jìn)行比較，最終選擇了150 ℃為檢測器溫度較為適宜.

2.2 內(nèi)標(biāo)物的選擇

為使內(nèi)標(biāo)物與有效成分或雜質(zhì)得到有效分離，分別選擇了理化性質(zhì)較穩(wěn)定的鄰苯二甲酸二甲酯、正十五烷和正十四烷等作為內(nèi)標(biāo)物進(jìn)行試驗，根據(jù)內(nèi)標(biāo)物選擇和待測組分出峰接近又能完全分離的原則選擇正十四烷為內(nèi)標(biāo)物.

2.3 工作曲線的繪制

準(zhǔn)確稱取0.2 g二乙基二硫?qū)φ掌酚?00 mL容量瓶中，用丙酮稀釋至刻度，搖勻，配制成2 g/L的儲備液. 分別移取上述儲備液2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL,置于50 mL容量瓶中，分別加入10.00 mL內(nèi)標(biāo)溶液，用丙酮稀釋至刻度，搖勻，從而配制成一系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液. 依次進(jìn)樣進(jìn)行測定，以二乙基二硫標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，以二乙基二硫與其相應(yīng)的內(nèi)標(biāo)物峰面積比為縱坐標(biāo)，將所得數(shù)據(jù)進(jìn)行線性回歸. 回歸曲線方程為y=6.335 57x-0.019 41，線性相關(guān)系數(shù)(R)為0.999 73. 二乙基二硫濃度在0.01 g/L～0.4 g/L范圍內(nèi)，具有較好的線性. 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線見圖2.

2.4 精密度試驗

按照1.6所述色譜條件，對同一份二乙基二硫樣品溶液進(jìn)行5次平行測定，由回歸方程計算得到二乙基二硫的含量分別為90.99%、90.87%、90.99%、90.98%、90.94%，平均值為90.95%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.05%.

圖2 二乙基二硫標(biāo)準(zhǔn)工作曲線Fig.2 The standard working curve of ethyl disulfide

2.5 重復(fù)性試驗

取同一批二乙基二硫樣品，按1.5樣品溶液的配制方法配制5份. 按照1.6所述色譜條件進(jìn)行測定，由回歸方程計算得到二乙基二硫的含量分別為91.0%、90.97%、90.91%、90.86%、90.88%，平均值為90.92%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.058%.

2.6 加標(biāo)回收率測定

分別稱取4份已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)的二乙基二硫，精密加入一定量的已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)的二乙基二硫?qū)φ掌?，配制成線性范圍內(nèi)的溶液. 在1.6所述色譜條件下測定，進(jìn)行加標(biāo)回收實驗，計算回收率，結(jié)果見表1.

表1 回收率測定結(jié)果Table 1 The result of recovery ratio

2.7 樣品分析

用差減法精密稱取適量的樣品，在所述色譜條件下進(jìn)行測定，以外標(biāo)法計算二乙基二硫的含量，測定結(jié)果為96%，樣品測定的氣相譜圖見圖3. 二乙基二硫的保留時間為4.690 min，正十四烷保留時間為5.340 min.

圖3 二乙基二硫樣品的氣相色譜圖Fig.3 Gas chromatogram of sample for ethyl disulfide

結(jié)論：從精密度實驗、重復(fù)性實驗、加標(biāo)回收率實驗的結(jié)果來看，該方法的精密度、重復(fù)性、回收率良好，符合分析測定的要求. 所建立的測定二乙基二硫的方法，簡便、快速，結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，可用于工業(yè)二乙基二硫的含量測定.

參考文獻(xiàn)：

[1] 佘佳榮. 乙蒜素在黃瓜、土壤中的殘留及其生態(tài)毒性研究[D]. 湖南: 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué), 2009.

[2] ANKRI S, MIRELMAN D. Antimicrobial properties of allicin from garlic [J]. Microb Infect, 1991, 1(2): 125-129.

[3] 佘佳榮, 楊仁斌. 乙蒜素乳油在黃瓜和土壤中的殘留消解動態(tài)[J]. 環(huán)境科學(xué)與管理, 2009, 34(8): 25-28.

[4] 程 宇. 大蒜素提取分離研究[D]. 江蘇: 江蘇大學(xué), 2006.