恩諾沙星棕櫚酸鹽的合成和譜學(xué)研究

李玉江,郭曉河,陶 樂,王 強,董黎紅

(河南省科學(xué)院 高新技術(shù)研究中心，河南 鄭州 450002)

恩諾沙星( enrofloxacin) 是德國拜爾公司率先開發(fā)的氟喹諾酮類獸醫(yī)專用抗菌藥，又名恩氟喹啉羧酸，屬于氟喹諾酮類 (fluoroquinolones)的化學(xué)合成抑菌劑，為微黃色或淡黃色結(jié)晶性粉末，味苦，不溶于水，其抗菌譜廣、抗菌活性強，對 G+、G-菌均有很強的抗菌活性[1-4]，具有低毒、高效、體內(nèi)組織分布廣等特點，對各種畜禽致病菌和支原體均有強大的殺滅作用，而且口服吸收快、組織穿透力強，該藥已成為畜禽抗感染的主導(dǎo)藥物. 市場上常用其鹽酸鹽、乳酸鹽和鈉鹽.但是這幾種鹽和恩諾沙星均有苦味，動物不愛吃，影響治療動物疾病的療效. 為了改善恩諾沙星的口感，減少苦味，作者依據(jù)恩諾沙星屬兩性化合物、可與酸或者堿作用形成酸式鹽或者堿性鹽的化學(xué)性質(zhì)[5]，參照文獻[6]首次合成了恩諾沙星棕櫚酸鹽，采用紅外光譜、核磁共振氫譜、高分辨質(zhì)譜，表征了目標(biāo)化合物的分子結(jié)構(gòu)，并對化合物紅外光譜吸收峰及核磁譜帯進行了歸屬分析.

1 實驗部分

1.1 儀器及測試條件

質(zhì)譜儀為高分辨質(zhì)譜儀Bruker microTOF-QII；核磁共振光譜儀為Bruker AV-300型，TMS為內(nèi)標(biāo)，溶劑DMSO-d6; IR采用Nicolet 6700 FT-IR紅外光譜儀，KBr壓片制樣.

1.2 合成方法

在500 mL圓底燒瓶中，加入95%的乙醇(146 mL)、恩諾沙星(11.14 g，0.031 mol)和棕櫚酸(15.80 g，0.062 mol)，攪拌升溫至溶解，加入活性炭(0.20 g)，繼續(xù)升溫至回流.回流1 h后，趁熱抽濾. 濾液自然冷卻，慢慢析出晶體，冷至室溫后再放置10 h，抽濾，用95%乙醇(20 mL)洗滌、濾干，得到略帶黃色的白色粉末恩諾沙星棕櫚酸鹽(12.10 g，0.0197 mol)，收率：63.43%. 合成路線如圖1.

圖1 恩諾沙星棕櫚酸鹽的合成路線Fig.1 Synthesis of enrofloxacin palmitate

2 結(jié)果與討論

2.1 紅外光譜分析

現(xiàn)代紅外光譜技術(shù)以其分析速度快、重現(xiàn)性好、成本低、且不消耗樣品等特點得到越來越廣泛的應(yīng)用. 恩諾沙星棕櫚酸鹽的紅外光譜如圖2所示.

圖2 恩諾沙星棕櫚酸鹽的紅外光譜圖Fig.2 FT-IR spectrum of enrofloxacin palmitate

2.2 核磁共振

圖3 恩諾沙星棕櫚酸鹽的核磁共振1H譜Fig.3 1H NMR spectra of enrofloxacin palmitate

以DMSO-d6為溶劑，TMS為內(nèi)標(biāo)對合成樣品進行了1H NMR測試，結(jié)果如圖3所示.從圖3可以看出，在δ=15.10～14.82出現(xiàn)一個寬單峰是恩諾沙星棕櫚酸鹽中兩個羧基上的氫的共振信號;δ=8.66出現(xiàn)的單尖峰是喹啉環(huán)上2位氫的化學(xué)位移;δ=7.91～7.87出現(xiàn)一個雙峰，是喹啉環(huán)上8位氫的化學(xué)位移，J=12.00 Hz;δ=7.57～7.55出現(xiàn)一個雙峰，是喹啉環(huán)上5位氫的化學(xué)位移，J=6.00 Hz;δ=3.84～3.83出現(xiàn)多重峰，是1-位環(huán)丙基環(huán)上1′位氫的化學(xué)位移；δ=3.35～3.32出現(xiàn)多重峰，是7-位哌嗪環(huán)上CH2氫的化學(xué)位移；δ=2.60～2.57出現(xiàn)多重峰，是7-位哌嗪環(huán)上3′位上氫的化學(xué)位移；δ=2.51～2.50出現(xiàn)多重峰，是7-位哌嗪環(huán)上2′位上氫的化學(xué)位移；δ=1.23～1.19出現(xiàn)多重峰，是棕櫚酸上和其他位置CH2基團上氫的化學(xué)位移；δ=1.07～1.03出現(xiàn)三重峰，是7-位哌嗪環(huán)上4′位上甲基的3個氫的化學(xué)位移；δ=0.87～0.83出現(xiàn)三重峰，是棕櫚酸甲基上的3個氫的化學(xué)位移.

2.3 質(zhì)譜分析

質(zhì)譜分子離子峰([M+H]+)為360.158 1，與恩諾沙星棕櫚酸鹽堿基部分恩諾沙星C19H22O3FN3的分子量相符合，而酸性部分的棕櫚酸在高分辨質(zhì)譜里不出峰[5].

2.4 物理性質(zhì)與藥效

經(jīng)穩(wěn)定性實驗證實用恩諾沙星棕櫚酸鹽制備的粉末，除了隨放置時間的延長外觀色澤由略帶黃色的白色逐漸變?yōu)轭慄S色外，其內(nèi)在化學(xué)性質(zhì)沒有發(fā)生變化.經(jīng)過動物口服實驗發(fā)現(xiàn)，抑菌效果與恩諾沙星的抑菌效果一樣，同時，有效地抑制了恩諾沙星的苦味，適宜動物口感，便于給藥.

參考文獻：

[1] 董漓波, 葉啟薇, 孫永學(xué), 等. 恩諾沙星對sD系大白鼠急性及亞急性毒性研究[J].華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報, 1995, 16(4):1-4.

[2] 陳向丹, 曾 勇. 高效液相色譜法測定恩諾沙星、鹽酸小檗堿粉中兩種有效成分含量[J]. 中國獸藥雜志, 2012, 46(5):31-33.

[3] JACOBSON E, GRONWALL R, MAXWELL L, et al. Plasma concentration of enrofloxacin after single-dose oral administration in Loggerhead Sea Turtles (Curetta caretta) [J]. J Zoo Wildl Med, 2005, 36(4):628-634.

[4] MARIN R P, LAI P, LARICCHIUTA G, et al. Pharmacokinetics of marbofloxacin after a single oral dose to loggerhead sea turtles (Caretta caretta) [J]. Res Vet Sci, 2009, 87:284-286.

[5] 姚鳳云，王付華，王樹槐. 鹽酸恩諾沙星制備及結(jié)構(gòu)確證[J]. 中國獸藥雜志, 1999, 33(2):29-31.

[6] 林國權(quán)，呂竹芬，徐潔媚，等. 乳酸環(huán)丙沙星的制備[J]. 中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，1998, 24(11):484-485.