臍血干細胞移植對頑固性心力衰竭患者神經(jīng)體液因子及運動耐量的影響

祝 煒 鄭瓊莉 周 軍 程振業(yè)(武漢市第一醫(yī)院心內(nèi)科，湖北 武漢 430022)

心力衰竭是一種復雜的臨床癥狀群，為各種心臟病的嚴重階段，其5年存活率與惡性腫瘤相仿〔1〕。而且是一種進行性病變，一旦起始，即使沒有新的心肌損害，臨床亦處于穩(wěn)定階段，仍可自身不斷發(fā)展〔2〕。抑制心室重塑，改善心衰患者預后，已成為各國醫(yī)學專家及學者的研究熱點。本文選擇反復多次住院治療的頑固性心力衰竭老年患者，在標準治療的基礎(chǔ)上，進行臍血干細胞移植治療，取得一定療效。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇自2011年12月至2012年9月我院心血管內(nèi)科住院患者18例，年齡55～82〔平均(71±2.1)〕歲;其中男10例，女8例;缺血性心臟病9例，高血壓性心臟病7例，擴張型心肌病2例;按紐約心臟病協(xié)會(NYHA)心功能分級標準分級，心功能Ⅲ級5例，心功能Ⅳ級13例。排除標準:①合并嚴重心律失常、休克、造血系統(tǒng)疾病;②中度以上肝腎功能損害者;③＞85歲者;④既往有腫瘤病史或直系親屬曾患腫瘤相關(guān)疾病者;⑤艾滋病、乙肝、梅毒等血清學檢查陽性者;⑥高度過敏體質(zhì)或者有嚴重過敏史者;⑦不配合或不同意接受干細胞治療者，極個別期望值過高或者不切合實際的要求者。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 所有患者均予以休息、限鹽、針對心衰病因及誘因治療，并根據(jù)病情需要聯(lián)合應用血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(ACEI)/血管緊張素受體拮抗劑(ARB)、β-受體拮抗劑、利尿劑、醛固酮受體拮抗劑、洋地黃、硝酸酯類藥物等。在此基礎(chǔ)上，完善相關(guān)檢查(胸片、心臟彩超、腹部肝膽胰脾彩超、腫瘤標志物篩查、肝炎全套/艾滋/梅毒等血清學檢查)，選擇合適臍血行臍血干細胞分離，經(jīng)外周靜脈注入。

1.2.2 臍血干細胞分離方法 應用骨髓、臍帶血干細胞分離試劑盒(加拿大威爾森公司研制，中國寧夏中聯(lián)達生物制品有限公司生產(chǎn))。將含有肝素抗凝的臍帶血(80～150 ml)先后加入試劑盒A液、B液后靜置，取上清液2 500 r/min，4℃，離心5 min，棄上清液，每管先后3次加注射用生理鹽水2～3 ml混勻，收集離心管底部的細胞，總體積40～50 ml并為一管;所得細胞懸液以雞尾酒加法緩緩加入到裝有C液的離心管中，1 200～2 000 r/min離心30 min;取中間云霧狀的薄層經(jīng)3次洗滌后，按臨床需求將細胞溶解在5 ml細胞轉(zhuǎn)移管中(一般加1～5 ml鹽水)，充分混勻后，備用。

1.3 觀察指標 治后3個月分別行心臟彩色多普勒超聲及左心功能測定、心肌耗氧量及6 min步行距離測定?？崭共伸o脈血檢測血漿 N-端腦鈉肽前體(Nt-proBNP)、腫瘤壞死因子(TNF)-α、白細胞介素-6(IL-6)濃度。治療前后觀察有無不良反應及一般性安全檢測，如血、尿、糞常規(guī)和肝、腎功能等。

1.4 統(tǒng)計學方法 應用SPSS10.0軟件，計量資料以s表示，均數(shù)比較用配對t檢驗。

2 結(jié)果

2.1 治療前后心功能分級、心肌耗氧量及運動耐量比較 治療前后心率、左室射血分數(shù)(LVEF)、6 min步行距離有改善(P ＜0.05)。見表1。

表1 治療前后心功能分級心肌耗氧量及運動耐量比較(n=18，s)

表1 治療前后心功能分級心肌耗氧量及運動耐量比較(n=18，s)

與治療前比較:1)P＜0.05，2)P＜0.01;下表同

組別 NYHA分級(n)Ⅱ級 Ⅲ級 Ⅳ級心率(次/min)LVEF(%)心肌耗氧量(次·mmHg·s)6 min步行距離(m)0 5 13 88±21 38±6 103.34±13.96 301.2±55.2治療后 6 9 3 81±161)42±71)100.53±14.23 384.7±46.52)治療前

2.2 治療前后神經(jīng)體液因子的比較 治療前后Nt-proBNP、TNF-α、IL-6水平，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。見表2。

表2 治療前后神經(jīng)體液因子比較(n=18，s)

表2 治療前后神經(jīng)體液因子比較(n=18，s)

組別 Nt-proBNP(ng/L)TNF-α(pg/ml)IL-6(pg/ml)1 903.34±113.96 18.42±1.26 10.2±0.55治療后 1 263.53±122.682)10.80±1.132) 6.6±1.212)治療前

2.3 安全性指標 治療過程中所有均未出現(xiàn)發(fā)熱、心慌、胃腸道反應及口干、頭暈等不良反應。治療前后查三大常規(guī)及肝、腎功能均無明顯變化(P＞0.05)。

3 討論

心肌結(jié)構(gòu)和功能的改變是慢性心力衰竭發(fā)生發(fā)展的機制，而神經(jīng)激素-細胞因子系統(tǒng)的激活對心肌重塑起重要的觸發(fā)作用，心肌損傷的加重又進一步激活神經(jīng)激素-細胞因子，形成惡性循環(huán)〔3，4〕。如何改善慢性心力衰竭尤其是終末期頑固性心力衰竭患者的預后，一直是各國心血管專家關(guān)注的熱點，心室輔助裝置、心臟移植等治療方法由于技術(shù)條件、經(jīng)濟因素及供體不足等因素難以普及〔5〕。臍血中含有豐富的造血干細胞和間充質(zhì)干細胞，臍帶血干細胞是近年發(fā)現(xiàn)的一類具有與骨髓干細胞、外周血干細胞相同的多向分化潛能的原始祖細胞〔6〕。近幾年的研究發(fā)現(xiàn)，臍帶血干細胞在特定因素影響或誘導下，可向各種細胞或組織分化，成為臨床細胞移植中良好的種子細胞?；A(chǔ)研究顯示移植的干細胞不僅起到心肌再生、穩(wěn)定心肌組織結(jié)構(gòu)的作用，還可通過細胞因子分泌促進梗死心肌的血管再生，改善心功能，減輕氧自由基對心肌的損傷，縮小心肌梗死面積〔7〕。

腦鈉肽(BNP)具有利鈉、利尿、擴張血管和抑制腎素分泌和醛固酮生成的作用，在心室壓力負荷和容量負荷增高時分泌增加以反映心室過勞〔8〕。血漿Nt-proBNP是在蛋白酶作用下與BNP一起生成的，與BNP相比，其半衰期長，血中濃度穩(wěn)定，對心力衰竭的診斷具有高敏感性和特異性，其濃度越高，則心力衰竭越嚴重。TNF-α能夠直接損傷心肌纖維，使細胞間質(zhì)分裂，重新分布和毛細血管滲透性增加造成心肌水腫，導致心肌收縮功能的減退，與心室功能不全、肺水腫、左室重塑、心肌纖維化和瘢痕形成等密切相關(guān);IL-6則通過影響細胞內(nèi)鈣平衡和(或)誘發(fā)一氧化碳產(chǎn)生，促進心肌細胞肥大和加重心肌重構(gòu)，抑制心肌細胞的興奮收縮耦聯(lián)，從而導致心肌收縮力降低。冠心病、高血壓性心臟病、擴張型心肌病、心肌炎所致的心力衰竭患者，其血漿中的TNF-α、IL-6水平升高，并且隨著心功能不全的加重而逐漸增高〔9〕。本研究結(jié)果提示臍血干細胞治療能抑制神經(jīng)細胞因子的過度激活，從而延緩心衰進展。

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