中藥活化克巖酊對致炎致痛因子的影響

陳建衡 牟忠祥 許強 薛曉彤 張博 任青華

目前，無論是發(fā)達國家還是發(fā)展中國家，對一些不能忍受的癌性疼痛均使用麻醉鎮(zhèn)痛劑(如嗎啡等)，雖然有快速止痛的效果，但存在著很大的副作用和藥物成癮性。如作用時間短，藥物依賴性強，惡心嘔吐、同時引起植物神經(jīng)功能紊亂，出現(xiàn)失眠、幻覺、大汗淋漓等毒性反應(yīng)，加速了患者自身衰竭的過程。因此，開發(fā)天然植物，用中醫(yī)藥攻克人類這一大難題，已經(jīng)引起國內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注。中藥活化克巖酊是由通絡(luò)止痛、活血化淤中藥組成的外用酊劑，對肝癌疼痛具有顯著的鎮(zhèn)痛作用。為進一步探討其藥物機制，我們進行了藥理學(xué)的實驗研究。

1 資料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 動物 昆明種健康小白鼠，雌雄性、體重(20±0.5)g，山東省動物實驗中心提供，合格證書:動管質(zhì)字(2009)第078號。

1.1.2 藥品 正紅花油，20 mL/瓶，北京同仁堂藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號080112;中藥活化克巖酊，250 ml/瓶、高濃度為100%、低濃度為60%，由山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院中醫(yī)藥實驗室提供。

1.1.3 試劑 醋酸溶液，A級、500 ml/瓶，山東化學(xué)試劑公司生產(chǎn)，批號071229;二甲苯溶液，50 ml/瓶，山東金華生化試劑公司生產(chǎn)，批號071126。

1.1.4 儀器 YSD-Ⅸ藥理熱板儀，重慶光門科技有限公司生產(chǎn);JN-精密扭力天平，江蘇南京醫(yī)療器械總廠生產(chǎn);動物耳廓打孔器，江蘇無錫方達科技總公司生產(chǎn)。

2 實驗方法

2.1 中藥活化克巖酊對二甲苯致炎的影響:動物分組:取雄性小鼠44只，隨機分成4組，每組11只。模型對照組、陽性對照組、實驗高濃度組(100%中藥活化克巖酊)，實驗低濃度組(60%中藥活化克巖酊)。動物用藥:模型對照組小鼠右耳外涂生理鹽水0.5 ml，陽性對照組小鼠右耳外涂正紅花油0.5 ml，實驗高濃度組小鼠右耳外涂100%的中藥活化克巖酊0.6 ml，實驗低濃度組小鼠右耳外涂60%的中藥活化克巖酊0.5 ml，連續(xù)用藥3 d，最后1 d用藥30 min后，各組小鼠用干棉球擦凈耳部藥物，將二甲苯涂于小鼠右耳0.05 ml/只，20 min后處死動物，用直徑9 mm的打孔器將雙耳同部位的等面積打下，分別用精密天平稱重，以左右耳片重之差值作為腫脹度指標，比較各用藥組與模型對照組間的差異，并計算致炎抑制率(×100)。

2.2 中藥活化克巖酊對化學(xué)因子致痛的影響:動物分組:取雄性小鼠48只，隨機分成4組，每組12只。模型對照組、陽性對照組、實驗高濃度組(100%中藥活化克巖酊)，實驗低濃度組(60%中藥活化克巖酊)。動物用藥:模型對照組小鼠腹部外涂生理鹽0.5 ml，陽性對照組小鼠腹部外涂正紅花油0.5 ml，實驗高濃度組小鼠腹部外涂100%的中藥活化克巖酊0.6 ml，實驗低濃度組小鼠腹部外涂60%的中藥活化克巖酊0.5 ml，連續(xù)用藥5 d，最后1 d用藥10 min后，各組小鼠腹腔注射0.6%的醋酸溶液0.2 ml/只，5 min后觀察記錄小鼠在15 min內(nèi)的扭體反應(yīng)次數(shù)，比較各用藥組與模型對照組間的差異，并計算扭體抑制率。

2.3 中藥活化克巖酊對物理因子致痛的影響:動物分組:取雌性小鼠48只，隨機分成4組，每組12只。模型對照組、陽性對照組、實驗高濃度組(100%中藥活化克巖酊)，實驗低濃度組(60%中藥活化克巖酊)。動物用藥:選用藥前痛閾值＜30 s的小鼠，模型對照組小鼠兩足底外涂生理鹽0.5 ml，陽性對照組小鼠兩足底外涂正紅花油0.5 ml，實驗高濃度組小鼠兩足底外涂100%的中藥活化克巖酊0.6 ml，實驗低濃度組小鼠兩足底外涂60%的中藥活化克巖酊0.5 ml，連續(xù)用藥4 d，最后一天用藥5 min后，將小鼠置于YSD-Ⅸ藥理熱板儀中，調(diào)節(jié)溫度55℃，觀察記錄小鼠在不用的時間段內(nèi)接觸熱板后至舔后足所需的時間(S)作為痛閾值。

3 實驗結(jié)果

3.1 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 12.0統(tǒng)計軟件進行方差分析檢驗，研究數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差(±s)表示。各用藥組與模型對照組相比較，具有著性差異。

3.2 二甲苯致炎實驗 結(jié)果表明，中藥活化克巖酊對二甲苯所致的炎性耳腫具有良好的抑制作用，其中正紅花油組致炎抑制率為55.73%;中藥活化克巖酊高濃度組致炎抑制率為55.50%;中藥活化克巖酊低濃度組致炎抑制率為52.48%，見表1。

3.3 化學(xué)因子與物理因子致痛實驗 中藥活化克巖酊能明顯抑制小鼠扭體反應(yīng)的發(fā)生率，同時，延長小鼠疼痛反應(yīng)的的潛伏期，結(jié)果表明，中藥活化克巖酊具有顯著的鎮(zhèn)痛作用，且高濃度組優(yōu)于低濃度組，具有一定的量效關(guān)系，見表2和3。

表1 中藥活化克巖酊對二甲苯致炎的影響(±s)

表1 中藥活化克巖酊對二甲苯致炎的影響(±s)

注:與模型對照組相比較※※※P＜0.01

組別 動物(n) 劑量(ml) 腫脹度(mg) 致炎抑制率(%)模型對照11 0.50 33.84±10.89正紅花油 11 0.50 14.98±7.85※※※ 55.73活化克巖酊(高濃度) 11 0.60 15.06±8.82※※※ 55.50活化克巖酊(低濃度) 11 0.50 16.08±9.12※※※52.48

表2 中藥活化克巖酊對化學(xué)因子致痛的影響(±s)

表2 中藥活化克巖酊對化學(xué)因子致痛的影響(±s)

注:與模型對照組相比較 ※※※P＜0.01

組別 動物(n) 劑量(ml) 扭體次數(shù) 抑制率(%)模型對照12 0.50 54.85±10.66正紅花油 12 0.50 30.02±5.31※※※ 45.27活化克巖酊(高濃度) 12 0.60 24.80±4.12※※※ 54.78活化克巖酊(低濃度) 12 0.50 31.43±5.57※※※42.70

表3 中藥活化克巖酊對物理因子致痛的影響(±s)

表3 中藥活化克巖酊對物理因子致痛的影響(±s)

注:與模型對照組相比較※※P＜0.02、※※※P＜0.01

組別 例數(shù) 劑量(ml) 不同時間痛閾(S)15 min 30 min 60 min模型對照組12 0.50 21.7±2.22 22.5±2.99 20.9±3.89正紅花油 12 0.50 30.5±1.85※※※ 26.4±3.10※※ 23.6±3.81活化克巖酊(高濃度) 12 0.60 28.5±1.80※※※ 25.9±2.60※※ 24.0±3.66活化克巖酊(低濃度) 12 0.50 27.0±1.88※※※ 24.6±2.51※※22.9±3.51

4 討論 近年來，通過大量的臨床報道證實，中醫(yī)藥治療癌性疼痛取得了顯著的療效，受到國內(nèi)外學(xué)者的廣泛矚目。中藥活化克巖酊是由水蛭素、蝎毒、白花蛇、大黃、土元等活血化淤中藥組成的外用酊劑，經(jīng)超聲波震蕩、低溫提取，有效成分以離子狀態(tài)存在，分散程度好，透皮吸收快，對肝癌疼痛具有明顯的鎮(zhèn)痛作用。本課題組動物實驗表明，中藥活化克巖酊不但有鎮(zhèn)痛的功效，而且具有抗炎消腫的作用。同時，高濃度組優(yōu)于低濃度組，具有一定的量效關(guān)系。活化克巖酊的主要成分水蛭素，是一種多肽類蛋白。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明［1］，水蛭素是一種強有力的抗凝素，含有凝血酶抑制劑，凝血因子Xa抑制劑，血小板聚集抑制劑，能中和凝血酶元，促進血液循，對抗ADP誘導(dǎo)的血栓形成。水蛭素、蝎毒不但能活血止痛、通經(jīng)絡(luò)、抗腫瘤，還能增強網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能［2］，提高機體的免疫力，同時，能明顯降低瘤體局部的高凝狀態(tài)［3］，增強皮膚的通透性，這對于抑制癌性疼痛具有重要的意義。白花蛇、大黃、土元抗菌消炎，能降低血液粘度，擴張動脈血管、加速血液循環(huán)［4］。

［1］ 張效江，汪可加，劉小剛，等.中藥水蛭的藥理活性.中西醫(yī)結(jié)合雜志，2009，11(9):188-192．

［2］ 張娟，張源，真名林，等.活血化瘀中藥在腫瘤疾病中的應(yīng)用.新中醫(yī)雜志，2009，12(8):458-460．

［3］ 王明明，史春華，劉啟良，等.中藥內(nèi)服外用治療肝癌的臨床觀察.中國腫瘤雜志，2010，22(11):1251-1257．

［4］ 李行先，張國言，黃理清，等.中藥抗菌消炎的臨床意義.實用醫(yī)學(xué)雜志，2010，18(10):236-238．