心臟手術(shù)患者檢測心臟型脂肪酸結(jié)合蛋白含量變化及其臨床意義

詹克勤 ，彭衛(wèi)華 ，詹長欣 ，洪智海 ，吳欽生

(1、婺源縣人民醫(yī)院檢驗科，江西 婺源333200；2、南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗科，江西 南昌330006)

心臟型脂肪酸結(jié)合蛋白(heart fatty acid-binding protein,H-FABP)是心肌細(xì)胞胞漿中含量最豐富的蛋白質(zhì)之一[1]。當(dāng)心肌細(xì)胞因缺血缺氧發(fā)生不可逆損害時，細(xì)胞膜破裂，胞漿中的H-FABP進(jìn)人細(xì)胞間質(zhì)，從而使H-FABP在心肌細(xì)胞中的含量減少呈脫失狀態(tài)[2]。近年來，H-FABP作為一種新的心臟手術(shù)后觀察的標(biāo)志蛋白，日益受到重視和關(guān)注。本文對53例行心臟手術(shù)患者進(jìn)行了H-FABP的觀察，并對其結(jié)果分析報告如下。

1 研究對象與方法

1.1 研究對象 選取2011年10月至2012年12月在南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院胸外科住院行心臟手術(shù)的53例患者，其中男性25例，女性28例，年齡為17~48歲，平均年齡為38.7歲。對照組為在南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院體檢科40名健康體檢者，其中男性18例，女性26例，年齡為22~53歲，平均年齡為35.6歲。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集與保存 在患者主動脈阻斷前、主動脈阻斷開放后30min、主動脈阻斷開放后3h、主動脈阻斷開放后12h、主動脈阻斷開放后24h分別取靜脈血2～3ml，對照組為健康體檢者，采集空腹血，常規(guī)分離血清標(biāo)本，于-20℃保存。集中檢測H-FABP。

1.2.2 試劑與測定方法 H-FABP采用美國MARKET INC公司生產(chǎn)的酶聯(lián)免疫吸咐試驗試劑。嚴(yán)格按我室SOP標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行檢測：將5μl樣本血清加入500μl樣本稀釋液中，將10μl標(biāo)準(zhǔn)系列H-FABP和10μl已稀釋的樣品分別加入反應(yīng)孔，每孔再加入100μl酶標(biāo)物，混勻10s，置室溫反應(yīng)45min，用緩沖液洗滌5次，拍板后每孔加100μl TMB顯色液，室溫20min后加終止液，在450nm波長下比色。根據(jù)同標(biāo)準(zhǔn)H-FABP比較進(jìn)行計算得標(biāo)本中H-FABP含量。

1.2.3 手術(shù) 麻醉后，對患者施行開胸手術(shù)，關(guān)閉主動脈并建立體外循環(huán)，在心肌暫時缺血缺氧的情況下施行心內(nèi)直視手術(shù)，手術(shù)后開放主動脈恢復(fù)心臟血供，并閉胸腔。

1.3 統(tǒng)計方法 數(shù)據(jù)以(x±s)表示，各組與對照組之間的比較采用t檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。均應(yīng)用SPSS 11.5軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

2 結(jié)果

53例心臟手術(shù)患者手術(shù)過程中不同時刻外周血及40例健康對照組檢測血清H-FABP結(jié)果詳見表1。

表1 手術(shù)過程中不同時刻外周血H-FABP濃度的改變(x±s，ng/ml)

3 討論

體外循環(huán)心內(nèi)直視手術(shù)時，是在心肌暫時性缺血缺氧的情況下施行，心肌的切割和術(shù)后心肌的縫合會對心肌有一定的損傷，手術(shù)后開放主動脈恢復(fù)心臟血供，由于缺血后恢復(fù)氧合血灌注，心肌損害會較缺血時更為明顯和嚴(yán)重，稱為缺血再灌注損傷[3]。

H-FABP是存在于心肌細(xì)胞漿內(nèi)的小分子可溶性蛋白質(zhì)，相對分子質(zhì)量為(14KD～15KD)，其作用是在細(xì)胞內(nèi)攝取游離脂肪酸，將其轉(zhuǎn)運至線粒體，從而進(jìn)入能量代謝體系并最終生成三磷酸腺苷，后者是心肌收縮的主要能量來源[4]。在臨床上，心肌損傷的標(biāo)記物先后應(yīng)用了CK-MB、肌紅蛋白、心肌肌鈣蛋白 T(cardiac troponinT，cTnT)、cTnI等。其中，H-FABP具有很高的組織特異性，非常符合心肌損傷的理想標(biāo)記物所具有的特征。由于心肌細(xì)胞對缺血、缺氧的高度敏感性，因此，在缺血缺氧狀態(tài)下，心肌細(xì)胞損傷，動員脂肪酸進(jìn)行氧化供能，使心肌細(xì)胞內(nèi)的H-FABP相應(yīng)地迅速上升，而且由于H-FABP的相對分子質(zhì)量小，可快速釋放入血，因而是檢測心臟手術(shù)時心肌損傷的理想標(biāo)記物，目前已鑒定出有9種不同類型的FABP，主要分布在哺乳動物脂肪酸代謝活躍的組織如心肌、肝臟、小腸、脂肪細(xì)胞等[5,6]，但不同類型的FABP具有不同的免疫學(xué)特征。H-FABP在脂肪酸代謝旺盛的心肌中含量高達(dá)骨骼肌的3～10倍，從而依據(jù)血中的H-FABP與肌紅蛋白(Mb)之比可以區(qū)別心肌損傷和骨骼肌損傷[7]。心臟手術(shù)主動脈阻斷開放后，血清中H-FABP逐漸升高。結(jié)果顯示主動脈阻斷放開后3h開始H-FABP增高，與文獻(xiàn)報道基本一致[8]。

綜上所述，血清H-FABP可作為心臟手術(shù)后心肌損傷的理想標(biāo)記物之一，也可對心肌細(xì)胞缺血、缺氧后造成的心肌損傷控制具有非常重要的價值。

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