Sysmex UF-1000 i全自動(dòng)尿沉渣分析儀的性能評(píng)價(jià)分析

何巍巍，梁曉君，潘斌，何鵬飛

(九江學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西 九江332000)

尿液中有形成分的檢查在臨床診治泌尿生殖系統(tǒng)疾病及全身相關(guān)疾病方面具有極其重要的作用。人工在顯微鏡下檢測(cè)離心后的尿液沉渣一直是該檢測(cè)項(xiàng)目的主要方式，但此法費(fèi)時(shí)費(fèi)力、誤差大、重復(fù)性差、不能定量、受人為因素影響、無(wú)統(tǒng)一質(zhì)控物難以進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)量控制。Sysmex UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀彌補(bǔ)了傳統(tǒng)方法的不足之處，其能快速(100份／h)篩選異常樣本，可對(duì)紅細(xì)胞、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞、管型、細(xì)菌等主要參數(shù)進(jìn)行定量報(bào)告，并可將結(jié)晶、類酵母細(xì)胞、小圓上皮細(xì)胞、病理管型、黏液、精子等作為標(biāo)記參數(shù)，輸出標(biāo)記信息，檢測(cè)速度快、重復(fù)性好、準(zhǔn)確度高、易于質(zhì)量控制等特點(diǎn)。為了解該儀器的性能狀態(tài)，本科對(duì)新引進(jìn)的Sysmex UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀性能情況進(jìn)行了驗(yàn)證,現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 Sysmex UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀，配套的原裝試劑和質(zhì)控物。

1.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13．0軟件進(jìn)行回歸、線性分析。

1.3 方法

1.3.1 批內(nèi)精密度 (1)實(shí)驗(yàn)方案：使用UF CHECK高低兩個(gè)水平，按照說明書要求混勻后分別連續(xù)進(jìn)行11次測(cè)定，去除第一個(gè)數(shù)據(jù)，取后10次結(jié)果分別計(jì)算中值的CV值，高值和低值結(jié)果。CV值均應(yīng)符合下列要求：RBC≤10.0%,WBC≤10.0,EC≤30.0%,CAST≤40.0%,BACT≤20.0%.

1.3.2 準(zhǔn)確度 (1)實(shí)驗(yàn)方案：使用UF CHECK按照說明書要求混勻后連續(xù)進(jìn)行5次測(cè)定，計(jì)算其平均值與靶值(單位：個(gè)/μl)相比較，計(jì)算其偏差值。(2)判斷依據(jù)與標(biāo)準(zhǔn)：低值偏差要求RBC：39.00±19.50,WBC:39.00 ±19.50,EC:9.20 ±5.50,CAST:4.89 ±3.91,BACT:193.10±57.90。 高值偏差值 RBC:187.40±37.50,WBC:744.80 ±149.00,EC:73.60 ±36.80,CAST:17.45±8.73,BACT:767.90±191.90。

1.3.3 攜帶污染 (1)實(shí)驗(yàn)方案：取高濃度尿液樣本(RBC：5000 左右 /μl,BACT：10000 左右/μl)。 混合均勻后連續(xù)測(cè)定三次，測(cè)定值分別為H1、H2、H3；再取低濃度尿液樣本，連續(xù)測(cè)定3次，測(cè)定值分別為L(zhǎng)1、L2、L3。按公式計(jì)算攜帶污染率。攜帶污染率(%)=(L1－L3)/(H3－L3)×100%。

1.3.4 臨床可報(bào)告范圍 (1)實(shí)驗(yàn)方案：分別選取新鮮尿樣本，WBC、RBC(10000/μl左右)、BACT 分別按 1：2、1：4、1：16、1：64、1：256 的比例用鞘液進(jìn)行稀釋。每個(gè)稀釋度測(cè)定3次，取均值為檢測(cè)值，將檢測(cè)值與期望值作比較，計(jì)算回歸方程Y=bX+a及相關(guān)系數(shù)r。(2)判斷依據(jù)與線性標(biāo)準(zhǔn)：b值在 (1±0．05)范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù) r≥0.975。

1.3.5 批間精密度 (1)實(shí)驗(yàn)方案：使用UF CHECK按照說明書要求混勻后進(jìn)行測(cè)定，取連續(xù)20天的結(jié)果分別計(jì)算CV值，結(jié)果CV值應(yīng)符合下列要求：RBC≤10.0%,WBC≤10.0,EC≤30.0%,CAST≤40.0%,BACT≤20.0%。

1.3.6 模式之間的結(jié)果比對(duì) (1)實(shí)驗(yàn)方案：準(zhǔn)備10份新鮮樣本，濃度覆蓋生物參考區(qū)間，整個(gè)實(shí)驗(yàn)應(yīng)該在樣本老化之前完成。在手動(dòng)模式和自動(dòng)模式下檢測(cè)這10份樣本，計(jì)算手動(dòng)模式和自動(dòng)模之間的結(jié)果偏差百分比。(2)判斷依據(jù)：比對(duì)的偏差要求RBC≤10.0%,WBC≤10.0,EC≤30.0%,CAST≤40.0%,BACT≤20.0%，比對(duì)結(jié)果在偏差要求范圍內(nèi)為滿足要求，10份標(biāo)本全部滿足要求為比對(duì)合格。

1.3.7 生物參考區(qū)間驗(yàn)證 實(shí)驗(yàn)依據(jù)：NCCLS C28-A2“臨床實(shí)驗(yàn)室怎樣定義和確定參考區(qū)間應(yīng)用指南”(1)實(shí)驗(yàn)方案：收集40份健康人尿液標(biāo)本，男女各20例，年齡20~60歲，按儀器說明書要求檢測(cè)，并將檢測(cè)結(jié)果與廠家提供的參考范圍進(jìn)行比較。(2)參考區(qū)間引用標(biāo)準(zhǔn)：R≥95%。R=(檢測(cè)值在引用參考區(qū)間的參考個(gè)體數(shù)/總的參考個(gè)體數(shù))×100%。

2 結(jié)果

2.1 批內(nèi)精密度 測(cè)定結(jié)果見表1。

表1 UF-1000i批內(nèi)精密度檢測(cè)結(jié)果

2.2 準(zhǔn)確度 用UF-1000i高、低兩個(gè)水平質(zhì)控品，按照儀器說明書要求，在Sysmex UF-1000i尿液有形成分分析儀上連續(xù)測(cè)定5次，計(jì)算均值，與質(zhì)控品理論值進(jìn)行比較，結(jié)果見表2。

表 2 UF-1000i準(zhǔn)確度檢測(cè)結(jié)果(個(gè)/μl)

2.3 攜帶污染 攜帶污染率 (%)=(L1－L3)/(H3－L3)×100%(H代表高值，L代表低值)攜帶污染檢測(cè)結(jié)果：RBC攜帶污染率為0.00%，BACT攜帶污染率為0.01%，均符合RBV：0.1%和BACT：0.05%的要求。

2.4 臨床可報(bào)告范圍 將檢測(cè)值與期望值作比較，進(jìn)行線性回歸相關(guān)分析，結(jié)果如下：紅細(xì)胞臨床可報(bào)告范圍(0~10715.1 個(gè)/μl)：b=1.0041，r=1.0000；白細(xì)胞臨床可報(bào)告范圍 (0~5591.2個(gè)/μl)：b=0.9965，r=1.0000；BACT 臨床可報(bào)告范圍(0~9543.6 個(gè)/μl)：b=0.9940，r=0.9999。

2.5 批間精密度 使用UF CHECK按照說明書要求混勻后進(jìn)行測(cè)定，取連續(xù)20d的結(jié)果分別計(jì)算CV值，報(bào)告如表3。

表3 UF-1000i批間精密度檢測(cè)結(jié)果(n=20，個(gè)/μl)

2.6 模式間結(jié)果比對(duì) 取10份新鮮尿液樣本(各細(xì)胞成分濃度覆蓋生物參考區(qū)間)在手動(dòng)模式和自動(dòng)模式下檢測(cè)，計(jì)算手工模式和自動(dòng)模式間的結(jié)果偏差百分比.結(jié)果為：RBC偏差2.5%~9.8%，WBC偏差 3.6%~8.9%，EC偏差 0~29.1%，CAST偏差7.4%~28.4%，BACT偏差1.1%~18.3%，均符合要求。

2.7 生物參考區(qū)間驗(yàn)證 (R≥0.95為合格)檢測(cè)結(jié)果：RBC、WBC、EC、CAST、BACT 等指標(biāo)生物參考區(qū)間的R值均落在擬驗(yàn)證區(qū)間內(nèi)，結(jié)果見表4。

3 討論

國(guó)家實(shí)驗(yàn)室ISO15189認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)[1]在臨床體液部分細(xì)則要求，尿液有形成分分析儀在進(jìn)行臨床樣本檢測(cè)前，必須進(jìn)行儀器性能驗(yàn)證。UF-1000i尿流式分析儀是定量檢測(cè)儀器，因此，按照國(guó)家實(shí)驗(yàn)室ISO15189認(rèn)可要求和全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程(第3版)要求[2]，本科以住院患者、健康體檢者和儀器配套質(zhì)控物為標(biāo)本，對(duì)UF-1000i的批內(nèi)精密度、批間精密度、準(zhǔn)確度、攜帶污染率、臨床可報(bào)告范圍、模式間的比對(duì)以及參考區(qū)間進(jìn)行了驗(yàn)證。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來看，批內(nèi)精密度、批間精密度、準(zhǔn)確度、攜帶污染率、臨床可報(bào)告范圍、模式間的比對(duì)以及參考區(qū)間驗(yàn)證都符合儀器說明書的要求，UF-1000i完全可用于臨床尿液沉渣分析的篩選檢測(cè)[3]。但在實(shí)際使用過程中，我們發(fā)現(xiàn)UF-1000i對(duì)于高值標(biāo)本的檢測(cè)，除了需稀釋后再進(jìn)行，還需注意高值標(biāo)本檢測(cè)后儀器管路的清洗，以免影響后續(xù)樣本的檢測(cè)。另外，UF-1000i無(wú)法對(duì)病理管型和生理管型進(jìn)行區(qū)分計(jì)數(shù)且計(jì)數(shù)結(jié)果往往偏高，因此其結(jié)果必須和干化學(xué)結(jié)果以及顯微鏡檢查相結(jié)合進(jìn)行綜合分析[4]。

表4 參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果(個(gè)/μl)

[1]國(guó)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)化組織.醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室-質(zhì)量和能力專用要求ISO15189[S].2003.

[2]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國(guó)臨床操作規(guī)程[M].第 3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:58.

[3]杭建峰,孫朝暉.Sysmex UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀的性能分析及臨床應(yīng)用[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2011,26(2):108-110.

[4]張紅霞,費(fèi)安興,江鴻,等.尿干化學(xué)分析法、尿沉渣分析儀法和顯微鏡檢查法聯(lián)合檢測(cè)尿白、紅細(xì)胞及管型結(jié)果分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2012，30(3)：288-290.