水飛薊提取物對燙傷創(chuàng)面愈合作用的實(shí)驗(yàn)研究

衛(wèi) 昊 萬朝陽 王 瑩 陜西中醫(yī)學(xué)院（咸陽712046）

水飛薊為菊科植物水飛薊Silybum marianum（L.）Gaertn.的干燥成熟果實(shí)，具有清熱解毒，保肝利膽等功效，其黃酮類成分如水飛薊素、水飛薊賓等生物活性廣泛，臨床多用于治療各型肝病，外用治療燙傷尚未報道，課題組前期對水飛薊復(fù)方制劑進(jìn)行了抗炎和鎮(zhèn)痛作用研究，效果良好［1］。在此基礎(chǔ)上本實(shí)驗(yàn)主要研究君藥水飛薊提取物對燙傷創(chuàng)面的治療作用。

1 材料

1.1 試藥和試劑 水飛薊軟膏劑的制備［2］準(zhǔn)確稱取水飛薊500g，用65%乙醇回流提取兩次（第一次七倍量乙醇提取1h，第二次六倍量乙醇提取40min）過濾，合并濾液，加熱濃縮，回收乙醇。濃縮至800mL加適量水沉淀，靜置3h，待沉淀析出抽濾。棄去濾液，濾渣置烘箱干燥2h，取出，研成細(xì)粉。稱量約20g，即每1g 細(xì)粉相當(dāng)于25g藥材。準(zhǔn)確稱取10g水飛薊提取物粉末，加入到20g熔融的凡士林和20mL 植物油中，攪拌均勻，精密稱取0.5g羥苯乙酯作為防腐劑。美寶濕潤燒傷膏（汕頭市美寶制藥有限公司生產(chǎn)，批號：1220303A），乙酰水楊酸片（西安美辰藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號：1210497.8）；凡士林、乙醇，硫化鈉，水合氯醛，羥苯乙酯，二甲苯，CMC－Na；

1.2 實(shí)驗(yàn)動物 健康昆明小鼠120只，雌性，由西安交大醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供，體重18～22g，動物合格證號：SCXK（陜）2012－003。

1.3 實(shí)驗(yàn)器材 電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（DHG－9075A），調(diào)溫電熱套（ZNHW 型），電子天平GH－202（220／51g～0.1mg／0.01mg），打耳器（廣州飛迪生物科技有限公司），手術(shù)刀，鑷子。

2 方法與結(jié)果

2.1 水飛薊對小鼠燙傷創(chuàng)面愈合作用的影響［3］取昆明小鼠60只，適應(yīng)性飼養(yǎng)3d后按體重隨機(jī)分為空白對照組、模型組、潤濕燒傷膏組、水飛薊組（140g／kg，70g／kg），用10%硫化鈉進(jìn)行背部脫毛，隔日除空白組外其余各組小鼠均以5%的水合氯醛腹腔注射麻醉，將3cm×4cm 鐵棒置于沸水中10min，取出鐵棒立即貼于脫毛小鼠背部無毛部位并持續(xù)10s，復(fù)制深Ⅱ度燙傷創(chuàng)傷面積約為1cm×2cm，傷后立即給藥，1 次／d，連續(xù)給藥20d。給藥10d后參考文獻(xiàn)［4］測創(chuàng)面愈合率待燙傷傷口基本愈合后，剪取愈合傷口組織稱重，在80℃下烘干48h后再次稱重，測定創(chuàng)面組織含水量。含水量＝（組織濕重－組織干重）／組織濕重×100%。結(jié)果與空白對照組比較，水飛薊各劑量組能顯著縮短傷口愈合時間，提高創(chuàng)面愈合率，水飛薊大劑量組顯著降低創(chuàng)面組織含水量（P＜0.05）。見表1。

表1 水飛薊對小鼠燙傷創(chuàng)面愈合作用的影響（±s，n＝12）

表1 水飛薊對小鼠燙傷創(chuàng)面愈合作用的影響（±s，n＝12）

注：與空白對照組比較，ΔP＜0.05（下同）

分 組劑量（g／kg）創(chuàng)面愈合時間（d）創(chuàng)面愈合率（%）創(chuàng)面組織含水量（mg）——模型組—17.51＋1.26 35 65.73＋1.44潤濕燒傷膏組50 15.03＋1.71 70 62.44＋3.47水飛薊大劑量組140 13.89＋1.53 75 60.69＋1.34Δ水飛薊小劑量組空白對照組———70 15.27＋1.06 60 61.47＋1.25

2.2 水飛薊對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響［4］取昆明小鼠40只，隨機(jī)分為5組，每組8只。分別為為空白對照組，乙酰水楊酸組，水飛薊大、中、?。?40g／kg、70g／kg、35g／kg）劑量組?？瞻讓φ战M給予等量生理鹽水，其余各組灌胃水飛薊混懸液，1次／d，連續(xù)給藥3d，末次給藥后1h，將二甲苯均勻涂于各組小鼠左耳前后兩面，每只小鼠50μL，2h后將小鼠脫頸椎處死，沿耳廓基線剪下兩耳，用直徑9mm 打孔器在耳部同一位置打下圓形耳片，用精密電子天平稱取耳片重量，計算小鼠耳廓腫脹度及抑制率。腫脹度（mg）＝左耳片重－右耳片重；抑制率（%）＝（生理鹽水組平均腫脹度－給藥組平均腫脹度）／生理鹽水組平均腫脹度×100%。結(jié)果與空白對照組比較，水飛薊140g／kg，70g／kg劑量組可明顯減輕小鼠耳腫脹（P＜0.05）。見表2。

表2 水飛薊對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的抑制作用（±s）

表2 水飛薊對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的抑制作用（±s）

組 別動物數(shù)（只）劑量（g／kg）耳腫脹度（mg）抑腫率（%）空白對照組8—15.10＋1.54—阿司匹林組8 1.1 3.98＋0.63Δ 73.64水飛薊大劑量組8 140 4.73＋1.31Δ 68.68水飛薊中劑量組8 70 8.97＋1.72Δ 40.60水飛薊小劑量組8 35 14.35＋0.43 4.97

3 討 論 水飛薊具有清熱解毒之功效，其有效成分包括水飛薊素、水飛薊賓、異水飛薊賓、β－谷甾醇等，其中水飛薊素等黃酮類成分能直接清除活性氧，對抗脂質(zhì)過氧化，維持細(xì)胞膜的流動性，對燙傷創(chuàng)面有較好的保護(hù)作用［5］。水飛薊所含的β－谷甾醇等植物固醇類有一定的抗炎作用，而且沒有可的松類激素藥物的副作用，其預(yù)防炎癥性反應(yīng)與細(xì)胞內(nèi)Ca2＋濃度失調(diào)相關(guān)；此外，β－谷甾醇等植物固醇還有一定的解熱鎮(zhèn)痛作用。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，水飛薊提取物可明顯促進(jìn)燙傷創(chuàng)面愈合，在縮短結(jié)痂時間和縮小疤痕面積方面更優(yōu)于濕潤燒傷膏，表明水飛薊醇提物有良好的促進(jìn)皮膚傷口愈合作用。

［1］ 郭惠玲，衛(wèi) 昊，武可泗，等.燙傷靈對小鼠抗炎、鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)研究［J］.陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2008，31（6）：63－64.

［2］ 李玉山，王經(jīng)安.水飛薊素提取純化工藝研究［J］.化學(xué)工程師Chemical Engineer，2009，58（2）：58－59.

［3］ 孫同柱，付小兵.重組人表皮生長因子促進(jìn)兔燙傷創(chuàng)面愈合的實(shí)驗(yàn)研究［J］.實(shí)驗(yàn)動物科學(xué)與管理，2000，17（4）：12－14.

［4］ 劉小平，盧金剛，陳 譜，等，蘆薈凝膠外涂對大鼠淺度燙傷創(chuàng)面愈合及其相關(guān)因子表達(dá)的影響［J］.陜西醫(yī)學(xué)雜志，2006，35（6）：646－648.

［5］ 劉篤寬.水飛薊的藥理與臨床研究概況［J］.陜西中醫(yī)，1984，5（4）：37－39.