實驗性“痰瘀伏邪”模型病理演變規(guī)律及中藥干預作用研究

陳 穎，李 松

（長春中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院，吉林長春130117）

實驗性“痰瘀伏邪”模型病理演變規(guī)律及中藥干預作用研究

陳 穎，李 松

（長春中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院，吉林長春130117）

目的：建立大鼠高脂血癥和動脈粥樣硬化模型及中藥參紅化濁通絡顆粒對其干預的影響。方法：將實驗性大鼠80只分為空白組、模型組、中劑量給藥組和高劑量給藥組，采用喂飼高脂飼料和腹腔注射維生素D3的方法復制大鼠高脂血癥模型和動脈粥樣硬化模型，觀察實驗大鼠TC、TG、LDL－C、HDL－C含量變化以及主動脈組織形態(tài)學改變。結(jié)果：高脂飼料的喂養(yǎng)可以使大鼠TC、LDL－C、HDL－C明顯升高，形成高膽固醇血癥；高脂飼料喂養(yǎng)配合維生素D3腹腔注射，未能形成動脈粥樣硬化斑塊；參紅化濁通絡顆粒對升高HDL－C具有一定療效。結(jié)論：中藥參紅化濁通絡顆粒對升高HDL－C具有一定療效。

參紅化濁通絡顆粒；動脈硬化；高脂血癥；大鼠

中醫(yī)伏痰伏瘀理論認為，冠心病在臨床前期痰瘀伏邪內(nèi)藏，蘊結(jié)成毒，伏于血絡，而正能勝邪，邪氣內(nèi)藏，伏而待發(fā)；臨床期正不勝邪，觸動而發(fā)；緩解期正能勝邪，邪氣內(nèi)藏，伏而待發(fā)。中藥參紅化濁通絡顆粒具有活血通絡，化濁祛瘀等功效。動脈粥樣硬化是導致心腦血管疾病的主要病理因素，而長期高脂血癥易導致動脈硬化加速形成。其發(fā)病機制一般認為，隨著高膽固醇食物攝入及年齡的不斷增長，動脈血管內(nèi)皮下脂質(zhì)蛋白的滯留［1］，及動脈粥樣斑塊與血栓的形成，促發(fā)心腦疾病。［2－3］因此，為研究本方的藥理作用機制，筆者通過觀察大鼠TC、TG、LDL－C，Hdl－c以及主動脈組織形態(tài)學的改變，對該方進行藥效學研究。

1 材料與方法

1.1 動物 選用6周齡Wistar幼鼠80只，由吉林大學基礎(chǔ)實驗動物科學部提供。

1.2 飼料制備 飼料有普通飼料和高脂飼料?；A(chǔ)飼料的組成：由面粉20％，米粉2％，玉米20％，麩皮25％，豆料20％，骨粉2％，魚粉2％組成。大鼠維持了和大鼠面料均購自吉林大學基礎(chǔ)動物實驗部。高脂飼料：由10％豬油，1％膽固醇，0.2％丙基硫氧嘧啶，0.2％膽酸鈉，8％蛋黃粉，80.6％基礎(chǔ)飼料配制而成。豬油自備，膽固醇和膽酸鈉購自長春市鼎國生物技術(shù)有限公司，丙基硫氧嘧啶購自長春市義善堂大藥房，蛋黃粉購自北京康德生物制品有限公司。

1.3 藥物組成與制備 維生素D3注射液，購自長春市義善堂大藥房。蘇丹Ⅲ染色劑和甲醛溶液，均購自長春市科技化玻站。參紅化濁通絡顆粒（藥物組成：黨參10g，紅景天15g，丹參20g，水蛭6g，降香10g，瓜蔞20g，甘松10g，石菖蒲10g），由長春中醫(yī)藥大學屬附醫(yī)院心病內(nèi)科自擬，藥物購自吉林省仙草醫(yī)藥有限公司，并由此公司中藥制劑室提供水煎濃縮至所需濃度，放置于4℃冰箱內(nèi)儲存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 相關(guān)耗材與試劑盒制備 EP管、5mL注射器、1mL注射器、烏拉坦、脫脂棉及取材所需物品均購自長春市科技化玻站。前列環(huán)素Elisa試劑盒（PGI2 48T）、血栓素Elisa試劑盒（TAX2 48T）、內(nèi)皮素Elisa試劑盒（ET 48T）、一氧化氮Elisa試劑盒（NO 48T）均購自長春市鼎國生物技術(shù)有限公司。

1.5 實驗動物分組與造模 80只健康實驗大鼠，雌雄各半，適應性喂養(yǎng)1周，觀察活動、糞便等均未見異常后，采用隨機數(shù)字表法隨機分為4組：空白組10只、模型對照組20只、中劑量給藥組25只、高劑量給藥組25只。空白組、模型組大鼠每日等容積生理鹽水灌胃。給藥組在造模后即開始給藥。按照實驗藥理方法學進行計算，高劑量組以參紅化濁通絡顆粒懸液24g/kg灌胃，中劑量組以參紅化濁通絡顆粒懸液12g/kg灌胃?？瞻捉M和模型組，按照相應體質(zhì)量標準給予等容積生理鹽水灌胃。每組每天灌胃1次，每次灌胃的體積按照每100g給予1mL計算。造膜方法參考相關(guān)文獻［4－5］，空白組大鼠飼喂基礎(chǔ)飼料，其余組均飼喂高脂飼料，喂養(yǎng)10周。除空白組外其余組飼喂高脂飼料，飼養(yǎng)4周后，模型組、中劑量給藥組和高劑量給藥組采用一次性腹腔靜脈注射維生素D3（60萬IU/kg）的方法，促進鈣離子沉積，制作動脈粥樣硬化斑塊模型。在高脂飼料喂養(yǎng)基礎(chǔ)上造成“痰瘀”模型。

1.6 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，所有數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差（±s，mmol/L）表示。用單因素方差分析來表示多組均數(shù)間的比較，兩兩間比較用LSD檢驗。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠血清TC、TG、LDL－C、HDL－C含量變化比較 見表1。

表1 各組大鼠血清TC、TG、LDL－C和HDL－C含量變化比較（±s）

表1 各組大鼠血清TC、TG、LDL－C和HDL－C含量變化比較（±s）

注：與空白組比較，＃P＜0.05，＃＃P＜0.01；與模型組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。

組 別n TC TG LDL－C HDL－C空白組 10 1.21±0.23 0.75±0.28 0.10±0.07 0.71±0.16模型組 20 3.34±1.70＃＃0.62±0.26 0.87±0.63＃ 1.53±0.54＃＃中劑量組25 4.32±2.50＃＃0.53±0.29 1.11±0.92＃?！?.75±0.81高劑量組25 5.51±2.35＃＃0.65±0.36 1.31±0.98＃?！鳌?.11±0.67＃＃

2.2 參紅化濁通絡顆粒方對大鼠主動脈組織形態(tài)學的影響 主動脈組織在光鏡下可見：空白組大鼠主動脈內(nèi)皮細胞完整，主動脈壁的內(nèi)膜光滑，無增生性改變，無奶油色病變及炎性細胞的侵潤；模型組大鼠的主動脈壁內(nèi)膜光滑，見少許脂肪沉積，無奶油色病變及炎性細胞侵潤，內(nèi)皮細胞完整；中劑量給藥組和高劑量給藥組大鼠的主動脈壁內(nèi)膜光滑，內(nèi)皮細胞完整，無奶油色病變，見少許脂肪沉積，無增生性改變。

3 討論

3.1 冠心病痰瘀模型的制作 對于冠心病的造膜方法中，給予高脂飼料喂養(yǎng)，是動脈粥樣硬化模型制作的一個基礎(chǔ)，在高脂飼料喂養(yǎng)的基礎(chǔ)上配合多種方法，如心肌缺血、球囊損傷、冠脈結(jié)扎以及維生素D3的注射等等，均可有效的促使動脈硬化斑塊的形成，縮短模型制作的時間。本實驗采用給大鼠飼喂高脂飼料配合一次性腹腔注射維生素D3的方法，復制大鼠冠心病模型。考慮到大鼠沒有膽囊，膽鹽分泌不足，對膽固醇的吸收充分，因此，在高脂飼料中加入膽酸鈉，促進大鼠對膽固醇的吸收。同時在高脂飼料中加入丙基硫氧嘧啶，以抑制大鼠甲狀腺功能亢進，致使大鼠脂質(zhì)代謝紊亂，最終誘發(fā)大鼠高脂血癥的形成。

3.2 參紅化濁通絡顆粒方組方依據(jù) 本方由人參、丹參、紅景天、水蛭、絳香、瓜蔞、甘松、石菖蒲8味藥組成，本方主要功能是養(yǎng)心安神，化痰通絡。人參大補元氣，固脫生津，安神，現(xiàn)代研究可改善心臟功能，增加心肌收縮力；丹參祛瘀止痛，養(yǎng)血除煩安神，加強心肌收縮力，降低血黏度，改善微循環(huán)促進組織的修復與再生；紅景天具有益氣活血，益智養(yǎng)心的功效，能降低心臟的負荷，改善心臟功能。紅景天與丹參2藥配伍，輔助人參，共奏穩(wěn)心、強心、改善心臟功能的作用。水蛭、降香、瓜蔞3味藥，共奏其化瘀理氣通絡之功效；干松理氣止痛，具有通絡功效；石菖蒲開竅凝神，化濕和胃，對于痰蒙神竅者具有良好的療效，研究［6－8］表明，石菖蒲中含有大量揮發(fā)油，其中二聚－細辛醚具有明顯降脂效果，α－細辛醚可顯著降低血清膽固醇，但此揮發(fā)油的降脂作用需要對石菖蒲進行水煎醇沉，如未經(jīng)水煎醇沉，則該揮發(fā)油的降脂作用不確切。

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R241.0

A

1007－4813（2013）02－0336－02

2013－01－10）

國家中醫(yī)臨床研究基地建設項目。

陳 穎（1966－），女，主任醫(yī)師，博士研究生導師。研究方向：心血管內(nèi)科。