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    羥丙基-β-環(huán)糊精對吲達(dá)帕胺溶解度的影響

    2012-11-21 07:12:24秦貞苗陳燕忠陳卉孫美麗梁兆豐馮思欣林世源黃瓊趙雪晴陳超君
    關(guān)鍵詞:帕胺吲達(dá)包合物

    秦貞苗 陳燕忠 陳卉 孫美麗 梁兆豐 馮思欣 林世源 黃瓊 趙雪晴 陳超君

    吲達(dá)帕胺(Indapamide)為非噻嗪類吲哚衍生物,具有降壓利尿雙重的作用。受其溶解度影響,體內(nèi)吸收較差,目前臨床常用劑型為其緩釋片[1]。本實驗擬采用羥丙基-β-環(huán)糊精(HP-β-CD)對吲達(dá)帕胺進(jìn)行包合,并對其包合物進(jìn)行驗證。

    1 儀器與試藥

    1.1 儀器 UV1101紫外可見分光光度計(上海天美科學(xué)儀器有限公司);SWB-2000恒溫水浴振蕩器(天津奧特賽恩斯儀器有限公司);DZF-6050真空干燥箱(上海博訊實業(yè)有限公司);DSC4000差示掃描量熱儀(美國Perkin-Elmer公司);FTS-40傅立葉紅外光譜儀(美國BIO-RAD);KQ-300DA型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);PB-10pH計(德國Sartorius公司);CP225D分析天平(德國Sartorius公司)。

    1.2 試藥 吲達(dá)帕胺對照品(中國藥品生物制品檢定所,批號100257-200002);吲達(dá)帕胺原料藥(濟(jì)南高華制藥廠,批號20050701);HP-β-CD(山東淄博千匯精細(xì)化工有限公司);其余試劑均為分析純。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 HP-β-CD的增溶作用

    2.1.1 紫外檢測波長的確定精密稱取吲達(dá)帕胺對照品、HP-β-CD適量,用pH7.0磷酸鹽緩沖液配制澄清溶液,在200~400 nm波長范圍內(nèi)掃描。結(jié)果表明,吲達(dá)帕胺在242 nm處有最大吸收,而HP-β-CD在此波長處無吸收,因此確定242 nm為紫外檢測波長。

    2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密稱取吲達(dá)帕胺對照品10 mg,置100 ml量瓶中,用乙醇溶解,稀釋至刻度,作為貯備液。精密移取貯備液 0.2、0.5、0.8、1.0、1.5 ml置 10 ml量瓶中,加磷酸鹽緩沖液(pH7.0)稀釋至刻度,搖勻,在242 nm處測定吸光度,以吸光度(A)對濃度(C)進(jìn)行線性回歸,結(jié)果表明:吲達(dá)帕胺在2.0~15.0 μg/ml范圍內(nèi)濃度與吸光度呈較好的線性關(guān)系,其回歸方程為A=0.0586C+0.021,R2=0.9999。

    2.1.3 回收率試驗精密稱定HP-β-CD9份,以藥物與環(huán)糊精1∶1的比例,精密加入80%,100%,120%的吲達(dá)帕胺對照品溶液,配成低、中、高3種濃度的溶液,按上述方法測定,結(jié)果平均回收率分別為100.71%,103.28%和105.63%。

    2.1.4 不同pH值下吲達(dá)帕胺的增溶試驗配制pH5.0、pH7.0、pH9.0的磷酸鹽緩沖液,在同一pH磷酸鹽緩沖液中,加入不同量的 HP-β-CD 制成濃度為 0、20、40、80和 100 mmol/L的HP-β-CD溶液,將過量的吲達(dá)帕胺加入上述各溶液中,超聲溶解15 min后,置37℃水浴振蕩器中震蕩72 h(100 r/min)。待達(dá)到平衡后,5000 r/min離心15 min,精密移取適量上清液用pH5.0、pH7.0、pH9.0的磷酸鹽緩沖液稀釋至適宜濃度,在242 nm處測定吸光度,代入線性方程,計算藥物濃度。以HP-β-CD濃度為橫坐標(biāo),藥物濃度為縱坐標(biāo),繪制相溶解圖,并對其進(jìn)行線性回歸,得出不同pH條件下的回歸方程。由圖1可知,吲達(dá)帕胺的濃度隨HP-β-CD濃度的增加而增大,表明HP-β-CD對吲達(dá)帕胺以1∶1摩爾比例進(jìn)行包合。根據(jù)回歸方程,按以下公式計算表觀穩(wěn)定常數(shù)Kc[2]∶Kc=斜率/S0(1-斜率),結(jié)果穩(wěn)定常數(shù)根據(jù) pH 從小到大依次為 77.86,71.65,27.52。

    圖1 不同pH條件下HP-β-CD對吲達(dá)帕胺的增溶作用

    2.2 吲達(dá)帕胺-HP-β-CD包合物的驗證

    2.2.1 差示掃描量熱法驗證 以空坩堝為參比,升溫速率10℃/min,溫度范圍30℃ ~300℃,氣氛為高純氮氣,對吲達(dá)帕胺原料藥、HP-β-CD輔料、物理混合物及所制備的包合物進(jìn)行差示掃描分析。結(jié)果表明:170℃左右吲達(dá)帕胺出現(xiàn)吸收峰,混合物曲線則基本為原料藥與輔料的疊加,而包合物此處未見峰出現(xiàn)。

    2.2.2 紅外分光光度法驗證 以KBr壓片法分別制得吲達(dá)帕胺、HP-β-CD、包合物和混合物等樣品,在4000~400 cm范圍內(nèi)掃描。結(jié)果表明:在物理混合物和原料中均有吲達(dá)帕胺特征峰出現(xiàn),而包合物中該波處消失,說明物理混合物中HP-β-CD和吲達(dá)帕胺僅為簡單的機(jī)械混合,并未發(fā)生作用。綜合上述特征表明,HP-β-CD已包合了吲達(dá)帕胺,形成新的物質(zhì)。

    3 討論

    3.1 HP-β-CD 是 β-CD 的一種羥烷基化衍生物[3],與 β-CD一樣其與許多化合物可形成包合物,提高被包合物質(zhì)的穩(wěn)定性[4],在提高藥物溶解度方面優(yōu)于β-CD。

    3.2 實驗中吲達(dá)帕胺的溶解度隨緩沖鹽的pH和HP-β-CD濃度的增加而增大,但表觀穩(wěn)定常數(shù)卻隨pH的增大而減少,表觀穩(wěn)定常數(shù)越小,說明HP-β-CD對藥物穩(wěn)定作用越弱,解離度升高,使HP-β-CD飽和作用減弱。

    HP-β-CD對吲達(dá)帕胺具有增溶作用,不同濃度的HP-β-CD對吲達(dá)帕胺的增溶作用不同,相同濃度的HP-β-CD在不同pH條件下增溶作用也有所不同。本研究為環(huán)糊精衍生物提高難溶藥物的溶解度提供了依據(jù),但包合比相差懸殊,難以實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn),函待解決吲達(dá)帕胺的包封率問題。

    [1]王昕,唐素芳,高立勤,等.吲達(dá)帕胺片體外溶出度考查.天津藥學(xué),2011,(3):7-10.

    [2]劉玉雯,余祥彬,吳宏霞.2-羥丙基-β-環(huán)糊精對酮洛芬的包合作用研究.中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué),2006,23(5):377-379.

    [3]何仲貴,唐星,陳宣福等.β-環(huán)糊精及其衍生物2-羥丙基-β-環(huán)糊精對布洛芬的增溶作用.沈陽藥科大學(xué)學(xué)報,1998,15(4):235-237.

    [4]Backensfeld,T.,Muller,B.W.,Kolter,K.Interaction of NSA with cyclodextrins and hydroxypropyl cyclodextrin derivatives.Int.J.Pharm,2007,74(2-3):85-93.

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