舒筋消痛丸中阿魏酸的含量測定

張偉奇

(河南省藥品審評認(rèn)證中心，河南 鄭州450004)

舒筋消痛丸是經(jīng)批準(zhǔn)的醫(yī)院制劑(批準(zhǔn)文號:豫藥制字Z05140092)，處方由桑寄生、木瓜、當(dāng)歸、熟地、紅花、茯苓、地骨皮、羌活、獨活、乳香(制)、沒藥(制)、桃仁、延胡索、五加皮等14 味藥物組成，具有祛風(fēng)除濕、通絡(luò)止通之功能，用于氣滯血瘀、經(jīng)絡(luò)不通所致的各種痛癥，對風(fēng)濕、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎及骨質(zhì)增生癥療效顯著［1］。當(dāng)歸為方中主要藥味，阿魏酸是其有效成分之一。為了進一步提高標(biāo)準(zhǔn)，保證制劑的穩(wěn)定可靠，筆者采用高效液相色譜法對制劑中的阿魏酸進行了含量測定。

1 藥品、試劑與儀器

舒筋消痛丸，由桑寄生、木瓜、當(dāng)歸、熟地黃、紅花、茯苓、地骨皮、羌活、獨活、乳香(制)、沒藥(制)、桃仁、延胡索、五加皮等14 味藥物組成，商丘市中醫(yī)院提供，批號為110404，1104013，110521;陰性對照樣品，商丘市中醫(yī)院提供。阿魏酸對照品，中國藥品生物制品檢定所，批號110773－200611;乙腈，色譜純，天津市四友精細(xì)化學(xué)品有限公司產(chǎn)品，批號070226101;水為自制純化水;甲醇，分析純，國藥集團化學(xué)試劑有限公司產(chǎn)品，批號T20080109;磷酸，分析純，天津市化學(xué)試劑六廠產(chǎn)品，批號20010902。Agilent 1260 高效液相色譜儀，美國安捷倫科技有限公司產(chǎn)品;色譜柱Agilent－ C18(4．6mm ×150mm，5 μm)，安捷倫科技有限公司產(chǎn)品;AEU－210 電子天平，湖南湘儀儀器有限公司產(chǎn)品。

2 方法與結(jié)果

2．1 色譜條件

Agilent－C18色譜柱(150 mm×4．6 mm，5 μm)，流動相為乙腈－0．1%磷酸溶液(19∶81)，檢測波長316 nm，柱溫35 ℃，體積流量1．0 mL /min，進樣量10 μL。

2．2 對照品溶液的制備

精密稱取阿魏酸對照品12．42 mg，置25 mL 的棕色量瓶中，加甲醇溶解，并稀釋至刻度，搖勻，精密量取4 mL，置100 mL 的量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

2．3 供試品溶液的制備［2］

取供試品，研碎混勻，取約1．0 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中;精密加入體積分?jǐn)?shù)70%甲醇25 mL，稱定質(zhì)量;加熱回流30 min，放冷，再稱定質(zhì)量;用體積分?jǐn)?shù)70%甲醇補足減失重量，搖勻，濾過;取續(xù)濾液，用0．45 μm 微孔濾膜濾過，即得。

2．4 陰性對照品溶液的制備

除當(dāng)歸外，其他各藥按供試品處方量投料，按舒筋消痛丸工藝制成陰性對照品，然后按供試品的制備方法，制成陰性對照品溶液。

2．5 系統(tǒng)適應(yīng)性試驗

2．5．1 陰性對照試驗

取對照品溶液、供試品溶液及陰性對照品溶液各10 μL，按照2．1 項色譜條件，分別進樣測定，記錄色譜圖，結(jié)果表明其他成分對阿魏酸測定無干擾。見圖1。

2．5．2 線性關(guān)系考察

分別吸取對照品溶液(19．87 mg/L)1，5．0，7．5，12．5，20 μL，注入液相色譜儀，記錄峰面積分值，以阿魏酸峰面積積分值對進樣量進行回歸，得到回歸曲線Y=493．37X－33．437，r=0．999 9。結(jié)果表明其線性關(guān)系良好，線性范圍為:0．019 9～0．397 4 μg。

2．5．3 精密度試驗

精密吸取供試品溶液10 μL，重復(fù)進樣6 次，按上述色譜條件測定峰面積。結(jié)果RSD =0．68%，表明儀器精密度良好。

2．5．4 重復(fù)性試驗

精密稱取同一批(批號110404)樣品6 份，照2．2項下方法制備供試品溶液，按上述色譜條件進樣，測定。結(jié)果:平均含量為0．136 6 mg/g，RSD =0．87%。表明本方法重復(fù)性良好。

圖1 阿魏酸對照品、樣品及陰性對照品色譜圖

2．5．5 穩(wěn)定性試驗

取供試品溶液(批號110404)，分別于0，1，2，4，8，12 h 各精密吸取10 μL ，按上述色譜條件測定峰面積積分值。結(jié)果:峰面積平均值732．628，RSD=0．76%。表明供試品溶液在12 h 內(nèi)穩(wěn)定。

2．5．6 加樣回收率試驗

取已知含量的樣品9 份，各約0．5 g，精密稱定，分別精密加入一定量的阿魏酸對照品，照2．3 項下方法制備供試品溶液，按上述色譜條件進樣，測定，計算回收率。結(jié)果見表1。

表1 加樣回收實驗結(jié)果

2．6 樣品含量測定

按上述含量測定方法測定樣品中阿魏酸含量。結(jié)果見表2。

表2 舒筋消痛丸中阿魏酸的測定結(jié)果

3 小 論

在供試品制備的過程中，曾考慮到其他樣品對當(dāng)歸提取以及含量測定的影響［3］，考察了用不同提取方法的提?。?］，分別設(shè)計了超聲與回流不同提取方法和時間梯度，結(jié)果超聲提取不完全，阿魏酸僅為0．078 4 mg/g，回流30 min，提取效果較好，所以本試驗供試品的處理方法為體積分?jǐn)?shù)70%甲醇回流提取30 min，與《中國藥典》2010 版一部當(dāng)歸項下阿魏酸含量測定一致。舒筋消痛丸是醫(yī)院制劑，經(jīng)長期臨床實踐證明，具有良好的療效，但是長期以來，僅以薄層鑒別作為該藥的檢驗標(biāo)準(zhǔn)而沒有定量的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。當(dāng)歸是舒筋消痛丸的主藥之一，本實驗用HPLC 法對舒筋消痛丸中阿魏酸的含量進行了測定。通過以上實驗，建立了該制劑定量的質(zhì)量控制方法，該方法穩(wěn)定可靠，操作簡便，專屬性較強，可以作為舒筋消痛丸的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)的參考。

［1］張其鳳、王守英．HPLC 測定舒筋消痛丸中延胡索乙素的含量［J］．現(xiàn)代中藥研究與實踐，2008，22(1):44－45．

［2］國家藥典委員會．中華人民共和國藥典:一部［M］．北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2010:124．

［3］尹華，董曉燁．當(dāng)歸藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究［J］．中醫(yī)藥學(xué)刊，2005，23(8):1501－1503．

［4］王春艷，李尚禹．濃縮當(dāng)歸丸的提取工藝研究［J］．分子科學(xué)學(xué)報，2005，21(3):21－24．