高效液相色譜法測(cè)定蔬菜中鄰苯二甲酸二丁酯殘留

王少杰 孟雨吟 李秋順 孫士青 許強(qiáng) 孟令玗

摘要：用高效液相色譜法測(cè)定了蔬菜中的鄰苯二甲酸二丁酯殘留含量。實(shí)驗(yàn)色譜條件為色譜柱：ZOR-BAX SB-C18 4.6mm×150mm，5μm；溫度：室溫(25℃)；檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器；檢測(cè)波長(zhǎng)：224nm；進(jìn)樣量：10μl；流速：1.0ml/min。檢測(cè)方法在2～50μg/ml呈線性，最低檢出限(3/n)0.025μg/ml，相關(guān)系數(shù)0.9991。蔬菜中鄰苯二甲酸二丁酯含量0.45～7.70mg/kg。實(shí)驗(yàn)表明鄰苯二甲酸二丁酯在所檢測(cè)的蔬菜中均有殘留，可能與種植土壤污染有關(guān)。

關(guān)鍵詞：蔬菜；塑化劑；高效液相色譜；鄰苯二甲酸酯

中圖分類號(hào)：0657.7⁺2；X503.231文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A文章編號(hào)：1001-4942(2012)01-0112-03

鄰苯二甲酸酯(PAEs)又稱酞酸酯、塑化劑，一般為無色透明的油狀黏稠液體，難溶于水，不易揮發(fā)，凝固點(diǎn)低，易溶于甲醇、乙醇、乙醚等有機(jī)溶劑，是大約30種化合物的總稱。鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)中有6種被美國(guó)環(huán)境保護(hù)署(EPA)列入“優(yōu)先監(jiān)測(cè)污染物名單”，分別是鄰苯二甲酸二甲酯(DMP)、鄰苯二甲酸二乙酯(DEP)、鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)、鄰苯二甲酸二辛酯(DOP)、鄰苯二甲酸丁基芐基酯(BBP)和鄰苯二甲酸(2-乙基己基)酯(DEHP)。我國(guó)將鄰苯二甲酸酯類中的DMP、DBP和DOP列入優(yōu)先控制污染物黑名單。這類物質(zhì)具有類雌激素作用，影響生物體內(nèi)激素的正常分泌，可產(chǎn)生致畸、致癌、致突變作用。近來暴發(fā)的食品塑化劑事件，使人們對(duì)其危害性更加重視。本研究利用高效液相色譜法(HPLC)對(duì)幾種蔬菜中DBP含量進(jìn)行測(cè)定，從而了解DBP在蔬菜中的殘留情況。

1.材料與方法

1.1儀器、試劑與材料

Agilent 1100高效液相色譜儀(配備在線真空脫氣機(jī)、四元泵、手動(dòng)進(jìn)樣器、20μl定量環(huán)、紫外檢測(cè)器)、研缽、水浴鍋、XW-80A細(xì)胞粉碎儀。

甲醇為色譜純，乙醚、鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)均為分析純。

結(jié)球甘藍(lán)、茄子、黃瓜、油麥菜、大蔥、大蒜等蔬菜樣品購(gòu)于本地超市。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1前處理稱取剪碎的蔬菜樣品100.0g于研缽碾碎，加入200ml乙醚超聲處理20min，于蒸發(fā)皿中40℃蒸氣浴蒸發(fā)乙醚，蒸發(fā)皿冷卻后加入甲醇5ml提取DBP。將蒸發(fā)皿中的甲醇入10ml容量瓶中，再加入3ml甲醇于蒸發(fā)皿中，重復(fù)以上提取步驟，傾入10ml容量瓶中，并用甲醇定容至刻度，0.45μm有機(jī)濾膜過濾后，待測(cè)。

1.2.2色譜條件參考陳會(huì)明等(2004)的方法加以改良。

色譜柱：ZORBAX SB-C18 4.6mm/×150mm，5μm；溫度：室溫(約25％)；檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器；檢測(cè)波長(zhǎng)：224nm；進(jìn)樣量：10μl；流速：1.0ml/min。梯度如表1所示。

2.結(jié)果與分析

2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線與檢出限

將DBP用甲醇稀釋，分別制成1、5、10、30、50μg/ml系列濃度，按1.2.2色譜條件進(jìn)行測(cè)定，并以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，制得標(biāo)準(zhǔn)曲線(圖1)。相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.99912，按三倍噪聲信號(hào)計(jì)算，最低檢測(cè)限0.025μg/ml。標(biāo)準(zhǔn)色譜圖見圖2。

2.2樣品測(cè)定

將前處理好的樣品進(jìn)行測(cè)定，其色譜圖見圖3。所有蔬菜樣品中均有DBP檢出，檢測(cè)結(jié)果見表2。

2.3回收率及精密度實(shí)驗(yàn)

采用空白標(biāo)準(zhǔn)加入法進(jìn)行試驗(yàn)。在200ml乙醚中加入一定濃度的DBP標(biāo)準(zhǔn)溶液，超聲處理20min，并按1.2.2色譜條件進(jìn)行測(cè)定，重復(fù)10次，計(jì)算回收率及精密度。結(jié)果表明(表3)，該濃度下DBP溶液加標(biāo)回收率相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于2％符合常量和痕量分析要求。

3.討論

鄰苯二甲酸酯類(PAEs)相對(duì)于其他塑化劑而言，毒性不是最大的，但卻是存在最為普遍的。目前人們已從成人的尿液、血液、羊水等體液中檢測(cè)出了鄰苯二甲酸酯類，甚至新生兒的尿液中也發(fā)現(xiàn)了它們的存在。近幾年來，除了對(duì)各種鄰苯二甲酸酯類化合物的毒性進(jìn)行了更深入的研究外，鄰苯二甲酸單酯對(duì)動(dòng)物和人體的短期快速作用和長(zhǎng)期累積作用也引起了相當(dāng)?shù)年P(guān)注。這些研究為進(jìn)一步認(rèn)識(shí)鄰苯二甲酸酯類對(duì)人類健康的影響，采取預(yù)防和保護(hù)措施提供了重要參考。

對(duì)珠江三角洲地區(qū)蔬菜基地毒性有機(jī)污染物含量和分布特征的調(diào)查結(jié)果表明，土壤中有機(jī)污染物含量均以PAEs含量最高，美國(guó)環(huán)保局優(yōu)控的6種PAEs化合物總含量在3.00～45.67mg/kg，單個(gè)化合物以DEHP的含量最高，DBP的含量次之。污灌土壤中PAEs含量相對(duì)較高，如北京市工業(yè)污灌區(qū)土壤中DBP的含量高達(dá)59.8mg/kg，DEHP的含量高達(dá)16.8mg/kg，是對(duì)照土壤的幾倍，甚至幾十倍。濟(jì)南郊區(qū)塑料大棚菜地也有PAEs檢出。土壤中PAEs不僅影響土壤質(zhì)量、植物的生長(zhǎng)和品質(zhì)，而且還在作物中具有一定的生物累積效應(yīng)，其慢性毒性對(duì)人類的危害相當(dāng)大，應(yīng)高度重視。

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