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    禽流感滅活疫苗免疫鵪鶉效力試驗(yàn)

    2012-04-29 08:49:45楊峻王紅琳等
    湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2012年24期
    關(guān)鍵詞:免疫鵪鶉效果評(píng)價(jià)

    楊峻 王紅琳等

    摘要:禽流感滅活疫苗對(duì)鵪鶉首次免疫試驗(yàn)結(jié)果表明,20日齡、28日齡和35日齡的鵪鶉首次免疫禽流感疫苗2周后,部分鵪鶉能測(cè)定到AI-HI抗體,3周時(shí)抗體水平達(dá)到高峰,AI-HI抗體為5log2以上,但維持時(shí)間很短,4周時(shí)開(kāi)始下降,5周時(shí)降至3log2以下;二次免疫2周后抗體達(dá)到7.6log2,3周時(shí)抗體開(kāi)始下降,6周時(shí)降至3log2以下;不同免疫途徑免疫效果比較,皮下注射抗體水平明顯高于肌肉注射抗體水平;試驗(yàn)同時(shí)設(shè)雞免疫試驗(yàn)為對(duì)照,相同劑量二次免疫后雞的抗體水平明顯高于鵪鶉,且維持時(shí)間可達(dá)6周以上;疫苗的安全性試驗(yàn)表明,免疫鵪鶉未見(jiàn)任何不良臨床反應(yīng),精神、食欲和體重均正常。

    關(guān)鍵詞:禽流感;滅活疫苗;免疫;鵪鶉;效果評(píng)價(jià)

    中圖分類號(hào):S839;S855.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):0439-8114(2012)24-5734-02

    高致病性禽流感對(duì)鵪鶉產(chǎn)業(yè)發(fā)展威脅很大[1,2],目前商品化的禽流感疫苗效力檢驗(yàn)是以雞作為試驗(yàn)動(dòng)物[3],國(guó)內(nèi)外有關(guān)疫苗對(duì)鵪鶉的免疫效果評(píng)價(jià)試驗(yàn)報(bào)告較少。通過(guò)對(duì)不同日齡鵪鶉不同免疫次數(shù)的免疫試驗(yàn),評(píng)價(jià)禽流感疫苗對(duì)鵪鶉的免疫效果。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    鵪鶉由湖北神丹健康食品有限公司提供的200只20日齡的非免疫鵪鶉,分為3個(gè)不同日齡免疫組和非免疫對(duì)照組,每組50只。自然條件下籠養(yǎng)。試驗(yàn)用雞為18日齡海蘭褐非免疫雛雞50只,本實(shí)驗(yàn)室孵化,自然條件下籠養(yǎng)。禽流感滅活疫苗:重組禽流感病毒H5亞型二價(jià)滅活疫苗(青島易邦生物工程有限公司生產(chǎn),生產(chǎn)批號(hào):2011142)。

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1 不同日齡首次免疫 分別在鵪鶉20日齡、28日齡和35日齡時(shí)頸背皮下注射0.2mL,免疫后2、3、4、5周隨機(jī)取樣,免疫組和對(duì)照組各5只鵪鶉采血,分離血清,檢測(cè)AI-HI抗體。同時(shí)設(shè)18日齡雛雞免疫組和非免疫組,觀察疫苗免疫效果。

    1.2.2 二次免疫試驗(yàn) 20日齡鵪鶉在第一次免疫后3周(41日齡,產(chǎn)蛋前)進(jìn)行二次免疫(0.3mL)。二次免疫后每周隨機(jī)取樣,免疫組和對(duì)照組各5只鵪鶉采血,分離血清,檢測(cè)AI-HI抗體。同時(shí)設(shè)雛雞二次免疫組,觀察疫苗免疫效果。

    1.2.3 不同免疫途徑的免疫試驗(yàn) 將首次免疫試驗(yàn)(AI-HI抗體下降為0)的60只鵪鶉(70日齡)分為3組,皮下注射和胸肌注射免疫組各20只,另20只為對(duì)照組。免疫后每周采血,檢測(cè)AI-HI抗體。

    1.2.4 疫苗對(duì)鵪鶉的安全性試驗(yàn) 每周測(cè)定免疫組和對(duì)照組鵪鶉的體重,觀察精神狀態(tài),解剖免疫局部組織的病變,評(píng)價(jià)疫苗的安全性。

    1.2.5 抗體檢測(cè) 參照文獻(xiàn)[2]中常規(guī)的血凝抑制試驗(yàn)(HI)檢測(cè),AI-HI抗原購(gòu)于哈爾濱獸醫(yī)研究所;1%雞和鵪鶉紅細(xì)胞為本實(shí)驗(yàn)室制備。為了解兩種紅細(xì)胞在作AI-HI檢測(cè)時(shí)是否存在差異,本試驗(yàn)進(jìn)行雞和鵪鶉紅細(xì)胞檢測(cè)抗原和抗體效果比較。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 不同日齡首次免疫效果

    由表1可知,20、28、35日齡的鵪鶉首次免疫禽流感疫苗2周后,部分鵪鶉能測(cè)到AI-HI抗體,3周抗體水平達(dá)到高峰,AI-HI抗體為5log2以上,但維持時(shí)間很短,4周后開(kāi)始下降,5周降至3log2以下。雞疫苗免疫組抗體能維持到5周以上。

    2.2 二次免疫試驗(yàn)效果

    由表2可知,20日齡鵪鶉在第一次免疫后3周進(jìn)行二次免疫,免疫量0.3mL/只,免疫后2周抗體達(dá)到7.6log2,3周后抗體下降,6周降至3log2以下。二次免疫雛雞組抗體水平能持續(xù)到6周以上。

    2.3 不同途徑免疫試驗(yàn)效果

    由表3可知,70日齡的成年鵪鶉分別經(jīng)頸背皮下和肌肉注射進(jìn)行二次免疫,結(jié)果為皮下免疫組1周抗體明顯上升,2周達(dá)到高峰,抗體為8.2log2,4周后開(kāi)始下降;肌肉注射組2周才測(cè)定到抗體,3周抗體達(dá)高峰,且抗體水平明顯低于皮下免疫組。

    2.4 疫苗對(duì)鵪鶉安全性試驗(yàn)

    試驗(yàn)結(jié)果表明,禽流感油乳劑滅活疫苗免疫鵪鶉后未見(jiàn)不良臨床反應(yīng),精神、食欲和體重正常;每周抽檢1~2只鵪鶉進(jìn)行局部注射觀察,2周時(shí)可見(jiàn)少量的未吸收的疫苗黃色顆粒,3周時(shí)疫苗完全吸收。

    2.5 1%雞和鵪鶉紅細(xì)胞檢測(cè)抗原和抗體效果比較

    通過(guò)對(duì)同批次抗體和血清樣品的檢測(cè)比較,兩種禽類紅細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果無(wú)明顯差異,證明用1%雞紅細(xì)胞作AI-HI檢測(cè)是完全可行的。

    3 小結(jié)與討論

    1)通過(guò)對(duì)不同日齡鵪鶉不同免疫次數(shù)的免疫試驗(yàn)結(jié)果表明,商品化滅活疫苗免疫鵪鶉的AI-HI抗體水平與鴨、鵝相比存在較大的差異[3-5],主要表現(xiàn)在抗體水平低,持續(xù)時(shí)間短,不論是首次還是二次免疫,持續(xù)時(shí)間均不超過(guò)6周,而成年產(chǎn)蛋鵪鶉的淘汰周期為8~12個(gè)月,這與生產(chǎn)需要相差較大。

    2)為了評(píng)價(jià)疫苗的免疫效果,本研究設(shè)有同批疫苗免疫雞對(duì)照組和鵪鶉紅細(xì)胞對(duì)照組,結(jié)果表明二次免疫雞的AI-HI抗體能持續(xù)6周以上,證明疫苗是有效的。為了驗(yàn)證不同禽類的紅細(xì)胞檢測(cè)鵪鶉抗體的敏感性,還作了1%雞和鵪鶉紅細(xì)胞檢測(cè)抗原和抗體效果比較試驗(yàn),通過(guò)對(duì)同批次抗原和血清樣品的檢測(cè)比較,2種禽類紅細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果完全一致,證明用雞的紅細(xì)胞作AI-HI檢測(cè)是完全可行的。

    3)本次試驗(yàn)的疫苗安全性試驗(yàn)表明,免疫鵪鶉未見(jiàn)不良臨床反應(yīng),精神、食欲和體重正常。疫苗免疫效果表明,不同日齡首次免疫后2周可檢測(cè)到抗體,3周抗體水平達(dá)到高峰,為5log2以上,但維持時(shí)間很短,4周后開(kāi)始下降,5周降至3log2以下;二次免疫后2周抗體達(dá)到7.6log2,3周后抗體開(kāi)始下降,6周降至3log2以下;不同免疫途徑免疫效果比較,頸背皮下注射抗體水平明顯高于肌肉注射抗體水平。至于抗體維持時(shí)間短的問(wèn)題,可能與鵪鶉免疫系統(tǒng)有關(guān)。

    參考文獻(xiàn):

    [1]SAIFYM.禽病學(xué)[M].第十一版.蘇敬良,高 福,索 勛,譯.北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2005.147-166.

    [2]白文彬,于康震.動(dòng)物傳染病診斷學(xué)[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2002.

    [3]中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部.獸用生物制品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)匯編[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2010.

    [4]陳永忠,李啟紅,李俊平,等.鴨免疫重組禽流感病毒H5亞型二價(jià)滅活疫苗(H5N1,Re-5+Re-4)后抗體消長(zhǎng)規(guī)律的研究[J].養(yǎng)禽與禽病防治,2010(3):8-9.

    [5]楊 峻,邵華斌,艾地云,等.鵝禽流感免疫程序研究[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,47(4):449-451.

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