應(yīng)用與創(chuàng)新為導(dǎo)向的微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)設(shè)計(jì)

劉延剛 丁翠玲 鄭旭

［摘 要］ 實(shí)驗(yàn)教學(xué)是加深醫(yī)學(xué)微生物理論知識(shí)的關(guān)鍵部分，也是培養(yǎng)醫(yī)學(xué)生創(chuàng)造力和動(dòng)手能力的重要途徑。教學(xué)實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)傳統(tǒng)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程內(nèi)容與方法已經(jīng)逐漸與社會(huì)實(shí)踐脫節(jié)，教學(xué)效果有待提高。在前期探索的基礎(chǔ)上，為進(jìn)一步提升教學(xué)效果，課程組充分分析教學(xué)問(wèn)題，整合教學(xué)內(nèi)容，改革教學(xué)方法。以乙型腦炎病毒減毒活疫苗制備為主要內(nèi)容，在保障生物安全的基礎(chǔ)上，將病毒標(biāo)本處置、生物安全與個(gè)人防護(hù)、病毒分離培養(yǎng)和鑒定等教學(xué)目標(biāo)及病毒學(xué)相關(guān)的重要內(nèi)容融入其中，并在多個(gè)部分融入對(duì)學(xué)員創(chuàng)新能力的培養(yǎng)，形成了一套以應(yīng)用與創(chuàng)新為導(dǎo)向，從理論到實(shí)踐、從實(shí)踐到創(chuàng)新的“醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)”課程教學(xué)模式。這種模式的初步應(yīng)用取得了良好的效果。

［關(guān)鍵詞］ 微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)；教學(xué)設(shè)計(jì)；乙型腦炎病毒；應(yīng)用與創(chuàng)新

［基金項(xiàng)目］ 2021年度上海市青年科技英才揚(yáng)帆計(jì)劃“SARS-CoV-2感染肺泡上皮細(xì)胞的入侵機(jī)制研究”（21YF1457800）；2021年度國(guó)家自然科學(xué)基金青年項(xiàng)目“JEV非結(jié)構(gòu)蛋白1在誘導(dǎo)自身免疫性神經(jīng)元損傷中的作用機(jī)制研究”（32100122）

［作者簡(jiǎn)介］ 劉延剛（1990—），男，四川內(nèi)江人，博士，海軍軍醫(yī)大學(xué)海軍醫(yī)學(xué)系講師，主要從事醫(yī)學(xué)微生物學(xué)研究；鄭 旭（1987—），男，河北徐水人，博士，海軍軍醫(yī)大學(xué)海軍醫(yī)學(xué)系講師（通信作者），主要從事醫(yī)學(xué)微生物學(xué)與病毒疫苗研究。

［中圖分類(lèi)號(hào)］ G642.0 ［文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼］ A［文章編號(hào)］ 1674-9324（2023）10-0113-04［收稿日期］ 2022-05-27

引言

國(guó)務(wù)院于2015年印發(fā)的《統(tǒng)籌推進(jìn)世界一流大學(xué)和一流學(xué)科建設(shè)總體方案》中明確要求：“要著力培養(yǎng)富有創(chuàng)新精神和實(shí)踐能力的各類(lèi)創(chuàng)新型、應(yīng)用型、復(fù)合型優(yōu)秀人才［1］?！彪S著醫(yī)學(xué)事業(yè)的飛速發(fā)展，對(duì)醫(yī)學(xué)生創(chuàng)新與實(shí)踐能力也提出了更高的要求。“醫(yī)學(xué)微生物學(xué)”是醫(yī)學(xué)相關(guān)專(zhuān)業(yè)的一門(mén)必修課程，具有較強(qiáng)的應(yīng)用性和實(shí)踐性。微生物學(xué)是一門(mén)建立在實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上的學(xué)科，而實(shí)驗(yàn)教學(xué)作為“醫(yī)學(xué)微生物學(xué)”至關(guān)重要的一個(gè)模塊，是加深對(duì)理論知識(shí)學(xué)習(xí)的關(guān)鍵部分，也是培養(yǎng)醫(yī)學(xué)生創(chuàng)造力和動(dòng)手能力的重要途徑［2-3］。如何改革教學(xué)體系，優(yōu)化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，提高對(duì)學(xué)生創(chuàng)新與實(shí)踐能力的培養(yǎng)效果，是“醫(yī)學(xué)微生物學(xué)”教學(xué)的一項(xiàng)重要課題，也是教學(xué)改革的研究熱點(diǎn)［4］。

傳統(tǒng)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程針對(duì)學(xué)生理論課程授課內(nèi)容，盡可能多地將理論知識(shí)重點(diǎn)納入實(shí)驗(yàn)課程中來(lái)。然而，在近年的實(shí)踐中我們發(fā)現(xiàn)，隨著科學(xué)技術(shù)的突飛猛進(jìn)，盡管微生物經(jīng)典原理與理論變化不大，但是原本的多數(shù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與方法已經(jīng)與社會(huì)實(shí)踐脫節(jié)。這不僅會(huì)讓學(xué)生喪失學(xué)習(xí)興趣，違背課程設(shè)計(jì)的本意，更對(duì)學(xué)生未來(lái)在工作實(shí)踐中運(yùn)用醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)原理與技術(shù)不利。鑒于此，本課程組前期根據(jù)這門(mén)課程的特點(diǎn)，在教學(xué)改革方面做了諸多有意義的嘗試，并獲得了良好的教學(xué)效果［5］。在此基礎(chǔ)上，為進(jìn)一步調(diào)動(dòng)學(xué)生積極性，提升教學(xué)效果，本課程組改革教學(xué)模式，更新教學(xué)內(nèi)容，以乙型腦炎病毒減毒活疫苗制備技術(shù)為基礎(chǔ)，初步建立了一套以應(yīng)用與創(chuàng)新為導(dǎo)向的實(shí)驗(yàn)課程教學(xué)模式。筆者現(xiàn)就此教學(xué)設(shè)計(jì)作簡(jiǎn)要交流，為讀者提供參考。

一、分析教學(xué)問(wèn)題

“醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)”課程內(nèi)容基本與理論教材相對(duì)應(yīng)，分為細(xì)菌、病毒、真菌以及其他病原體相關(guān)實(shí)驗(yàn)。各部分實(shí)驗(yàn)結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)基本相似，主要包括概述與具體病原體特性相關(guān)實(shí)驗(yàn)。在這里，我們以“病毒學(xué)實(shí)驗(yàn)”為例進(jìn)行設(shè)計(jì)?！安《緦W(xué)實(shí)驗(yàn)”部分的教學(xué)目標(biāo)是讓學(xué)生掌握病毒的標(biāo)本處理、分離培養(yǎng)和鑒定技術(shù)?？紤]到生物安全，原來(lái)開(kāi)展的實(shí)驗(yàn)課程中學(xué)生只操作“血凝實(shí)驗(yàn)”部分，“流感病毒雞胚接種”和“病毒致細(xì)胞病變”均只作為展示內(nèi)容。盡管內(nèi)容上達(dá)到了教學(xué)目標(biāo)，但是在實(shí)踐中我們發(fā)現(xiàn)：一方面，實(shí)驗(yàn)內(nèi)容比較分散，缺乏連貫性，學(xué)生整體掌握情況比較一般；另一方面，實(shí)驗(yàn)內(nèi)容距離生活比較遠(yuǎn)，部分學(xué)生缺乏興趣，導(dǎo)致上課過(guò)程不夠?qū)Ｗ?，?shí)驗(yàn)完成度較低，更難培養(yǎng)創(chuàng)造性；此外，操作部分太少，學(xué)生難有動(dòng)手機(jī)會(huì)，容易缺乏感性認(rèn)識(shí)，導(dǎo)致學(xué)生學(xué)完以后印象不深。

這些問(wèn)題不同程度地存在于本課程的其他部分，也廣泛存在于其他學(xué)科實(shí)驗(yàn)課程中。因此，亟須設(shè)計(jì)一套科學(xué)合理、行之有效的新教學(xué)模式，不僅要全面涵蓋教學(xué)目標(biāo)，還應(yīng)貼近生活、連貫有序、全程參與，讓學(xué)生想來(lái)做、可以做、做得好。這不僅對(duì)我們上好病毒學(xué)實(shí)驗(yàn)課有重要意義，還可以為微生物學(xué)其他部分實(shí)驗(yàn)課程乃至其他學(xué)科的實(shí)驗(yàn)課程改革提供重要的參考。

（一）整合實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

本課程組在教研室主任的領(lǐng)導(dǎo)下，組織進(jìn)行了系統(tǒng)的分析與研究，最終選擇了以“乙型腦炎病毒減毒活疫苗制備”基本過(guò)程為實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，主要考慮是：一方面，乙型腦炎病毒減毒活疫苗是我國(guó)計(jì)劃免疫的重要部分，所有兒童均需接種，貼近學(xué)生生活；另一方面，乙型腦炎病毒減毒疫苗株無(wú)致病性，可以作為安全的研究材料。實(shí)驗(yàn)的流程參考《中國(guó)生物制品規(guī)程》2000年版中《凍干流行性乙型腦炎活疫苗制造及檢定規(guī)程》部分要求，在保障生物安全的基礎(chǔ)上，將生物安全與個(gè)人防護(hù)、病毒標(biāo)本處置、病毒分離培養(yǎng)和鑒定等教學(xué)目標(biāo)及病毒學(xué)相關(guān)的重要內(nèi)容融入其中。同時(shí)，實(shí)驗(yàn)技術(shù)是在不斷發(fā)展的，盡管目前已經(jīng)有標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，但是在各方面需要與時(shí)俱進(jìn)，不斷創(chuàng)新。因此，我們?cè)趯?shí)驗(yàn)過(guò)程的多個(gè)部分中融入了學(xué)員可以發(fā)散思維的內(nèi)容，激發(fā)學(xué)員學(xué)習(xí)熱情的同時(shí)，加強(qiáng)對(duì)學(xué)員創(chuàng)新能力的培養(yǎng)。在此基礎(chǔ)上，所有實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與流程均以實(shí)際應(yīng)用與創(chuàng)新為導(dǎo)向，最終設(shè)計(jì)了如下教學(xué)內(nèi)容。

（二）進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室

生物安全是醫(yī)學(xué)微生物學(xué)的重要內(nèi)容，不僅是從事醫(yī)學(xué)微生物學(xué)研究的基本原則，也與醫(yī)學(xué)生從事臨床工作密切關(guān)聯(lián)，是醫(yī)學(xué)生培養(yǎng)的關(guān)鍵內(nèi)容［3，6］。對(duì)此，我們采用無(wú)致病性的乙型腦炎病毒疫苗株，模擬具有一定致病性的病毒，讓學(xué)員從一開(kāi)始接觸病原體就培養(yǎng)生物安全觀念。所以在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室之前，不僅要對(duì)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容進(jìn)行面授講解，同時(shí)還要對(duì)學(xué)員在實(shí)驗(yàn)室生物安全、個(gè)人防護(hù)裝備的穿脫方法與注意事項(xiàng)等方面進(jìn)行全面培訓(xùn)。進(jìn)出過(guò)程由教員全程監(jiān)督，并對(duì)不規(guī)范操作進(jìn)行指正。課后通過(guò)監(jiān)控回放，引導(dǎo)學(xué)生討論并指出典型錯(cuò)誤，加深學(xué)生印象。同時(shí)，預(yù)留課后思考題，如“設(shè)計(jì)一套保證防護(hù)效果，不增加生產(chǎn)成本，但是穿脫更方便的防護(hù)裝備”。如果學(xué)員中有突出設(shè)計(jì)（可以多人合作設(shè)計(jì)），則鼓勵(lì)其撰稿申請(qǐng)實(shí)用新型專(zhuān)利。通過(guò)這一過(guò)程，可以讓學(xué)員真正建立起生物安全觀，并激發(fā)學(xué)員創(chuàng)新能力。

（三）病毒接種與培育

給每組（兩人一組）分發(fā)提前準(zhǔn)備好的單層BHK細(xì)胞，鏡下觀察并對(duì)正常細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行拍照。在生物安全柜中取出病毒原液，接種于細(xì)胞，置于35～36 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2小時(shí)后，更換新鮮的培養(yǎng)基。最后對(duì)相關(guān)實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行消毒滅菌，退出實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后要求學(xué)員做好實(shí)驗(yàn)記錄，繪制細(xì)胞形態(tài)，并預(yù)留課后思考題，如“如何快速或?qū)崟r(shí)了解培養(yǎng)基中病毒滴度”。這一教學(xué)過(guò)程不僅要融入病毒分離培養(yǎng)的知識(shí)，還要培養(yǎng)學(xué)員無(wú)菌操作觀念和正確處理帶有生物威脅的樣本的能力，同時(shí)還要讓學(xué)員感性了解生物制品（如疫苗）生產(chǎn)過(guò)程的操作環(huán)境，提升學(xué)員的參與感與學(xué)習(xí)興趣。

（四）細(xì)胞病變觀察

經(jīng)過(guò)72小時(shí)培養(yǎng)以后，每天需要學(xué)生自主觀察2次細(xì)胞狀態(tài)（早晚各一次，拍照保存），直到學(xué)生自己判斷約60%細(xì)胞出現(xiàn)明顯細(xì)胞病變。這一過(guò)程要求學(xué)生動(dòng)態(tài)觀察細(xì)胞形態(tài)的變化，掌握細(xì)胞發(fā)生病變時(shí)的具體表現(xiàn)，做好實(shí)驗(yàn)記錄。同時(shí)，還要求學(xué)生課后根據(jù)實(shí)驗(yàn)經(jīng)歷復(fù)習(xí)病毒感染細(xì)胞后復(fù)制、釋放、再感染的過(guò)程，不斷加深對(duì)理論知識(shí)的理解。

（五）病毒液收獲與鑒定

學(xué)生根據(jù)自己判斷，當(dāng)60%細(xì)胞出現(xiàn)明顯細(xì)胞病變時(shí)，對(duì)細(xì)胞進(jìn)行拍照并收集培養(yǎng)上清液，離心過(guò)濾分裝至無(wú)菌安瓿瓶中密封保存，隨后取病毒原液利用空斑法滴定病毒滴度。同時(shí)教員取各組學(xué)員收獲的病毒液統(tǒng)一滴定。一方面比較學(xué)員測(cè)定的病毒滴度與教員的結(jié)果是否存在明顯差異，一方面比較不同組別學(xué)員滴度高低。最終，確定疫苗制備成功的小組，給予適當(dāng)獎(jiǎng)勵(lì)。課后，要求學(xué)生在完成實(shí)驗(yàn)記錄之后撰寫(xiě)整個(gè)課程心得，根據(jù)自己操作過(guò)程提出疫苗制備中應(yīng)該改進(jìn)的環(huán)節(jié)及改進(jìn)的方法。

二、優(yōu)化考核方式

以往我們主要通過(guò)實(shí)驗(yàn)記錄對(duì)學(xué)生進(jìn)行考核，考核方式單一，并且無(wú)法避免抄作業(yè)情況，難以區(qū)分學(xué)員是否積極參與到實(shí)驗(yàn)操作中來(lái)。而在這一教學(xué)實(shí)踐中，我們采取了綜合考核方式：將實(shí)驗(yàn)課程的考核內(nèi)容分為4個(gè)部分，實(shí)驗(yàn)過(guò)程參與情況占比20%，實(shí)驗(yàn)記錄占比20%，實(shí)驗(yàn)結(jié)果占比40%，創(chuàng)新性思維占比20%。具體來(lái)說(shuō)，對(duì)于學(xué)員整個(gè)實(shí)驗(yàn)課程的考核，首先是對(duì)上課態(tài)度的考核，這是整個(gè)課程能順利完成的基礎(chǔ)，對(duì)于不積極參與甚至逃課的學(xué)員應(yīng)予以扣分并體現(xiàn)在最終成績(jī)中。其次，正確的實(shí)驗(yàn)記錄是科學(xué)研究和生物制品制備中的重要環(huán)節(jié)和基礎(chǔ)，要求做好實(shí)驗(yàn)記錄有利于培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)細(xì)致的工作態(tài)度，同時(shí)培養(yǎng)良好的科研習(xí)慣，為未來(lái)從事科學(xué)研究打下基礎(chǔ)。再次，實(shí)驗(yàn)結(jié)果在整個(gè)考核中占據(jù)最大比重，這一設(shè)計(jì)的目的是要以應(yīng)用為導(dǎo)向，驅(qū)動(dòng)學(xué)員在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中朝著制備高質(zhì)量高滴度疫苗去努力，這不僅可以更好地將實(shí)驗(yàn)內(nèi)容串聯(lián)起來(lái)保持學(xué)生興趣，還可以避免學(xué)生在實(shí)驗(yàn)中途懈怠而造成操作失誤。最后，對(duì)創(chuàng)新性思維的考核占有重要的地位，主要對(duì)學(xué)員課后創(chuàng)新性的設(shè)計(jì)（如新的防護(hù)裝備、病毒滴度監(jiān)測(cè)方法和其他新的改進(jìn)設(shè)計(jì)），以及對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)的反思與建議進(jìn)行評(píng)價(jià)。這就要求學(xué)員在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中充分發(fā)揮創(chuàng)造性，思考并挖掘可改進(jìn)的地方，并提出新的設(shè)計(jì)或改進(jìn)建議。這樣的考核方式更加靈活和系統(tǒng)，促使學(xué)生更加積極地投入到實(shí)驗(yàn)課程中去。

三、教學(xué)效果反饋

經(jīng)過(guò)前期教研室論證后，我們?cè)谝粋€(gè)班級(jí)試行了一個(gè)學(xué)期新的教學(xué)設(shè)計(jì)。整體運(yùn)行下來(lái)發(fā)現(xiàn)此教學(xué)設(shè)計(jì)具有以下優(yōu)勢(shì)：（1）實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備更方便。實(shí)驗(yàn)所使用的材料多數(shù)可從實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有課題材料中獲取，不用單獨(dú)存儲(chǔ)和管理，提高了資源利用率，避免了浪費(fèi)，同時(shí)減輕了教師的工作負(fù)擔(dān)。（2）學(xué)生參與度更高。學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)更有興趣了，多數(shù)學(xué)生在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中都比較積極且能提出各種有意義的問(wèn)題。（3）實(shí)驗(yàn)完成度較高。設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)難度不大，將實(shí)驗(yàn)結(jié)果作為重要的考核目標(biāo)，所有學(xué)員均全程參與并成功培養(yǎng)出病毒，完成了實(shí)驗(yàn)。（4）激發(fā)了學(xué)生的創(chuàng)造性。學(xué)生設(shè)計(jì)了多種更方便穿脫的防護(hù)服以及檢測(cè)病毒的方法，如在培養(yǎng)板中貼抗原檢測(cè)試劑條等，說(shuō)明學(xué)生在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中以及課后進(jìn)行了深入的研究和思考。（5）培養(yǎng)了團(tuán)隊(duì)協(xié)作能力，每組學(xué)員需要密切配合才能高效地完成實(shí)驗(yàn)，需要多討論與交流才更利于優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，從而獲取高滴度病毒。

同時(shí)，在經(jīng)過(guò)一學(xué)期的試行后，學(xué)生們提出應(yīng)在獲取病毒后通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)所制備疫苗的免疫效果，從而更直觀地感受疫苗的應(yīng)用價(jià)值。對(duì)此，本課程組也認(rèn)為，疫苗的實(shí)際應(yīng)用確實(shí)也更能凸顯本教學(xué)設(shè)計(jì)的應(yīng)用導(dǎo)向初衷并能提升教學(xué)效果。然而，受課程時(shí)間的限制，實(shí)踐中難以在收獲病毒后再安排動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，這需要我們更加深入地研究來(lái)調(diào)整實(shí)驗(yàn)內(nèi)容或課程設(shè)計(jì)。此外，還有學(xué)生提出，由于沒(méi)有見(jiàn)過(guò)生物制品生產(chǎn)的實(shí)際工作流程，對(duì)疫苗生產(chǎn)技術(shù)的應(yīng)用理解不深，希望能夠現(xiàn)場(chǎng)參觀生物制品生產(chǎn)流水線。

結(jié)語(yǔ)

隨著社會(huì)對(duì)應(yīng)用型、創(chuàng)新型、復(fù)合型人才需求的日益增加，我們?cè)谂囵B(yǎng)人才的時(shí)候也需要靈活調(diào)整，敢于創(chuàng)新和突破。要注重以學(xué)生的發(fā)展為牽引，以應(yīng)用和創(chuàng)新為導(dǎo)向，將人才培養(yǎng)的目標(biāo)融入課程的各個(gè)階段中。本課程組基于前期探索，以乙型腦炎病毒減毒活疫苗制備為主要內(nèi)容，創(chuàng)新教學(xué)設(shè)計(jì)，形成了一套從理論到實(shí)踐、從實(shí)踐到創(chuàng)新的“醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)”課程教學(xué)模式。這種模式的初步應(yīng)用取得了很好的效果，并且還進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)了學(xué)生對(duì)技術(shù)實(shí)用性以及現(xiàn)場(chǎng)參觀的需求。在未來(lái)的課程中，我們將逐步將這種模式運(yùn)用到“醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)”其他部分的教學(xué)，甚至推廣運(yùn)用到其他課程的實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，以期達(dá)到更好的教學(xué)效果。同時(shí)，學(xué)生對(duì)“知識(shí)走出去”具有強(qiáng)烈渴望，我們擬在課程時(shí)間允許的基礎(chǔ)上，帶領(lǐng)學(xué)生通過(guò)參觀生物制品生產(chǎn)工廠、體驗(yàn)工廠生物制品制備等方式，開(kāi)闊眼界，了解最前沿、最先進(jìn)的生產(chǎn)設(shè)備和工藝，加深對(duì)理論知識(shí)的理解。

參考文獻(xiàn)

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［4］陳萍，李敏，王沛珍，等.線上線下混合教學(xué)模式在醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的應(yīng)用［J］.衛(wèi)生職業(yè)教育，2022（40）：109-111.

［5］彭浩然，唐海琳，任浩，等.以成果為導(dǎo)向的微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)探索研究［J］.現(xiàn)代職業(yè)教育，2021（11）：170-171.

［6］萬(wàn)雙雙，宋廣忠，楊珺.淺談高校病原微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的生物安全管理［J］.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2019（29）：124-126.

Application and Innovation-oriented Teaching Design of Microbiology Experiment： Taking the Preparation of Live Attenuated Japanese Encephalitis Virus Vaccine as an Example

LIU Yan-gang， DING Cui-ling， ZHENG Xu

（Department of Biomedical Defense， Naval Medical University， Shanghai 200433， China）

Abstract： Experiment teaching is a key part of deepening the theoretical knowledge of medical microbiology， and it is also an important way to cultivate the creativity and practical ability of medical students. In teaching practice， it is found that the content and methods of traditional microbiology experiment courses have gradually become out of touch with social practice， and the teaching effect needs to be improved. On the basis of previous exploration， in order to further improve the teaching effect， the course group fully analyzes the teaching problems， integrates the teaching content， and reforms the teaching method. Taking the preparation of live attenuated Japanese encephalitis vaccine as the main content， on the basis of ensuring biosafety， the teaching objectives such as virus specimen disposal， biosafety and personal protection， virus isolation， culture and identification， and the important content related to virology are integrated. The cultivation of students innovative ability are integrated in many parts， forming a set of application and innovation-oriented teaching model of medical microbiology experiment courses from theory to practice， and from practice to innovation. The initial application of this model has achieved good results.

Key words： microbiology experiment; teaching design; Japanese encephalitis virus; application and innovation