HPLC法測(cè)定鹽酸嗎啉胍片含量的考察

康 軍，李 征

（遼陽(yáng)市食品藥品檢驗(yàn)所，遼寧遼陽(yáng) 111000）

鹽酸嗎啉胍片主要用于病毒性感冒，亦可用于腮腺炎、扁桃腺炎、皰疹和水痘等。現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)采用紫外分光光度法測(cè)定其含量。本文建立了以高效液相色譜法測(cè)定鹽酸嗎啉胍片中鹽酸嗎啉胍的含量，該方法簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、可靠、專(zhuān)屬性強(qiáng)，能夠較原標(biāo)準(zhǔn)更好地控制藥品質(zhì)量[1]。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

高效液相色譜儀（日本島津公司）包括LC-10ATvp輸液泵、SPD 10Avp輸液泵、SPD 10Avp可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器、TA-130柱溫箱和ANASTAR色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)；蘭博牌超聲波清洗器HS-3120型；賽多利斯電子天平BP211-D；電子天平ES120J-4H。

1.2 試藥

鹽酸嗎啉胍片 （XX制藥有限公司，批號(hào)：20090109、20090802、20091001）；鹽酸嗎啉胍（中國(guó)生物制品檢定所，批號(hào)：100483-200402）；甲醇、乙腈為色譜純；磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)[2-8]

色譜柱：Diamonsil C18（4.6 mm×200 mm，5 μm）色譜柱；流動(dòng)相：甲醇-乙腈-磷酸鹽緩沖液（60∶20∶20），流速：1.0 ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)：237 nm，柱溫：25℃，進(jìn)樣量：10 μl。

2.2 溶液制備

2.2.1 對(duì)照品溶液制備 精密稱(chēng)取鹽酸嗎啉胍對(duì)照品10 mg，置于100 ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5 ml，置100 ml量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。

2.2.2 供試品溶液制備 取本品20片，研細(xì)，精密稱(chēng)定，精密稱(chēng)取適量 （約相當(dāng)于鹽酸嗎啉胍50 mg），置于200 ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，制成對(duì)照品貯備液。精密量取續(xù)濾液2 ml，置100 ml量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.2.3 陰性樣品溶液制備 取不加鹽酸嗎啉胍的空白樣品按“2.2.2”項(xiàng)下方法操作，即得。

2.3 陰性干擾試驗(yàn)

照上述色譜條件，分別取對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性樣品溶液各10 μl，注入高效液相色譜儀中測(cè)定，陰性樣品在鹽酸嗎啉胍出峰處無(wú)干擾峰出現(xiàn)，證明本方法可行。結(jié)果見(jiàn)圖1。

2.4 線性關(guān)系考察

精密吸取上述對(duì)照品溶液 4.0、6.0、8.0、10.0、12.0、14.0 μl，注入高效液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定峰面積，以峰面積Y為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量X為（μg）橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為Y＝26 789X-121 717（r=0.999 2），表明進(jìn)樣量在20～70 μg范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。

2.5 精密度試驗(yàn)

取“2.2.1”項(xiàng)下對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次，平均峰面積為1 117 876，RSD為0.62%。結(jié)果表明本法精密度良好。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取對(duì)照品溶液和供試品溶液（批號(hào)：20091001）于0、3、6、12、24 h分別進(jìn)行測(cè)定，平均峰面積分別為1 108 772和1 269 050，RSD分別為0.61%和0.83%，表明溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.7 重復(fù)性試驗(yàn)

取供試品溶液（批號(hào)：20091001）6份，按含量測(cè)定方法分別進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算求得鹽酸嗎啉胍的平均含量為94.5%，RSD為0.52%（n=6），表明本法重復(fù)性良好。

2.8 回收率試驗(yàn)

精密稱(chēng)取9份已知含量的同一批號(hào)樣品 （批號(hào)：20091001，含量為94.5%，約相當(dāng)于鹽酸嗎啉胍25 mg），分別加入鹽酸嗎啉胍對(duì)照品適量，使加入的3種對(duì)照品的量分別為標(biāo)示量的80%、100%、120%，每種加入量各3份。按供試品溶液的制備方法配制供試品溶液，測(cè)定鹽酸嗎啉胍的含量，計(jì)算回收率，結(jié)果平均回收率為99.90%，RSD為0.69%（n=9）。見(jiàn)表1。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果（n=9）Tab.1 Results of recovery test（n=9）

2.9 樣品含量測(cè)定

精密量取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10 μl，注入液相色譜儀，按上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定，以外標(biāo)法計(jì)算含量。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 樣品含量測(cè)定結(jié)果（%，n=3）Tab.2 Content determination results of samples(%,n=3)

3 討論

3.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

鹽酸嗎啉胍片在237 n m處有最大吸收，因此選擇237 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)[1，5]。

3.2 流動(dòng)相的選擇

通過(guò)比對(duì)試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)甲醇-乙腈-磷酸鹽緩沖液（60∶20∶20）比例的流動(dòng)相比其他流動(dòng)相能獲得更好的分離效果，峰形好，柱效高。

3.3 溶解方法的選擇

本試驗(yàn)分別采用甲醇、磷酸氫二鈉等溶劑溶解鹽酸嗎啉胍，最后測(cè)定鹽酸嗎啉胍的含量，結(jié)果認(rèn)定甲醇-乙腈-磷酸鹽緩沖液（60∶20∶20）溶解效果最好。

本文建立的HPLC法測(cè)定鹽酸嗎啉胍片的方法精密度好，操作簡(jiǎn)單、快速，是測(cè)定鹽酸嗎啉胍片含量的有效方法。

[1]國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局.國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)[S].WS-10001-(HD-0650)-2002.

[2]方東偉,王正權(quán).反相高效液相色譜法測(cè)定鹽酸嗎啉胍片的含量[J].中國(guó)藥業(yè),2006,15(5):41.

[3]周小露,何勇虎,伍思強(qiáng).治感佳片中對(duì)乙酰氨基酚和鹽酸嗎啉胍的含量測(cè)定[J].中國(guó)藥業(yè),2008,17(14):41.

[4]楊懷鏡,李雪梅,張玲.鹽酸嗎啉胍片含量測(cè)定方法的比較[J].中國(guó)藥事,2001,15(2):123-124.

[5]羅鳳琴,張錦,劉韻琪.紫外分光光度法測(cè)定鹽酸嗎啉胍片的含量[J].川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2007,18(3):93-95.

[6]呂海華,陳軍.HPLC法同時(shí)測(cè)定感冒清膠囊中3組分的含量[J].安徽醫(yī)藥,2007,11(8):708-709.

[7]梁敏,李芳,張彬.高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定感冒清膠囊中兩組分的含量[J].廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào),2006,22(5):521-523.

[8]李小燕.反相高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定感冒清片中兩組分的含量[J].中國(guó)藥房,2003,14(9):560-561.