酒精性肝炎患者血清中天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶線粒體同工酶檢測(cè)的診斷意義

朱妍

肝臟使人體重要的生命器官之一，也是生物轉(zhuǎn)化的重要器官，當(dāng)肝臟受到大量的酒精刺激和侵襲時(shí)，會(huì)引起酒精性肝病[1]。近年來，隨著人們生活水平的提高，應(yīng)酬增多，對(duì)飲酒的需求增大，由此，酒精性肝病的發(fā)病率(ALD)也逐年增加。診斷肝病的酶類有幾十種，由于酶類化學(xué)反不同，分布部位不同。當(dāng)肝臟發(fā)生病變時(shí)，細(xì)胞膜的通透性增加，各種酶釋放入血，導(dǎo)致酶的活性增高。過去診斷ALD常用的生化指標(biāo)如r-谷氨酰基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)等缺乏特異性。近來國(guó)內(nèi)外對(duì)天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶線粒體同工酶(m-AST)的研究較多。本研究用免疫抑制法對(duì)ALD患者血清中m-AST進(jìn)行了檢測(cè)，并與GGT、AST、ALT、TBA等指標(biāo)進(jìn)行了比較，評(píng)價(jià)其對(duì)ALD的診斷價(jià)值。

1 材料和方法

1.1 儀器與試劑 OLYMPUS AU2700全自動(dòng)生化分析儀。M-AST試劑盒(上海北加生物試劑有限公司)，GGT、ALT、AST(日本OLYMPUS公司)，TBA試劑盒英國(guó)朗道公司產(chǎn)品。

1.2 研究對(duì)象

1.2.1 對(duì)照組 選擇本院體驗(yàn)中無肝病史、平時(shí)不飲酒的健康體檢者46例，均為男性，年齡在18～62歲，平均年齡42歲。

1.2.2 非酒精性肝病的其他肝病組(NALD組)選擇本院確診的乙型病毒性肝炎患者46例，不飲酒，年齡在20～70歲，平均年齡46歲。

1.2.3 酒精性肝病組(ALD組)根據(jù)中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝臟病學(xué)分會(huì)脂肪肝和酒精性肝病學(xué)組2001年制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]，選擇本院確診的ALD男性患者47例，年齡在21～53歲，平均40歲。

1.3 標(biāo)本采集 清晨空腹抽血，自然分離血清，所有項(xiàng)目6 h內(nèi)測(cè)定。

1.4 方法

1.4.1 原理試劑中的單抗人C-AST抗體與樣本中的C-AST結(jié)合形成免疫復(fù)合物，使C-AST活力被抑制，而m-AST活力不受影響，此時(shí)利用速率法測(cè)得AST結(jié)果即為m-AST活力。

1.4.2 方法 按試劑盒說明書進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室條件作適當(dāng)修改。分析參數(shù):速率法:樣本10 μl、試劑Ⅰ 120 μl、試劑Ⅱ30 μl、被一波長(zhǎng) 340nm、第二波長(zhǎng) 410nm、檢測(cè)時(shí)間10 min。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 組間比較采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

ALD組 m-AST為(24.2±5.3)，NALD組為(22.5±8.2)，ALD組與NALD組相比差異無顯著性(P＞0.05)，兩者與正常對(duì)照組相比差異有顯著性(P＜0.01)，ALD、NALD患者血清m-AST陽性率分別高達(dá)97.9%和86.9%。見表1。

表1 ALD組與對(duì)照組、NALD組各項(xiàng)生化指標(biāo)測(cè)定表

3 討論

天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶屬于細(xì)胞內(nèi)功能酶，細(xì)胞外液中含量極低。AST有兩種同工酶，存在于細(xì)胞漿中的稱胞質(zhì)型天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(c-AST)，存在于線粒體稱為線粒體型天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶[3]。這兩種同工酶廣泛存分布在心、臟、骨骼肌、腎等組織中，當(dāng)這些臟器損傷時(shí)，可使血清中同工酶升高，兩者在血清中升高臨床意義不同。C-AST升高表示細(xì)胞膜通透性改變，m-AST活力升高。因此，測(cè)定血清m-AST可間接了解肝細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)損傷及線粒體損傷的嚴(yán)重程度。由于m-AST在血清中半衰期短，清除率比c-AST快5倍以上，當(dāng)細(xì)胞不再壞死時(shí)，血清中m-AST將迅速下降甚至恢復(fù)正常水平。所以m-AST可作為肝臟、心臟損傷壞死及預(yù)后判斷指標(biāo)。

乙醇的毒性作用使肝細(xì)胞線粒體受損，m-AST釋放入血，使血清m-AST活力升高。與其他肝炎相比，略低于急性肝炎，與慢性肝炎相近。我們的結(jié)果也證實(shí)了這一點(diǎn)，說明m-AST對(duì)酒精性肝病的診斷和鑒別診斷具有重要價(jià)值。

近年來，檢測(cè)m-AST用于肝臟疾患、急性心肌損傷的診斷價(jià)值得到了重新認(rèn)識(shí)和了解，由于所用的免疫抑制法適用于各類型的自動(dòng)化分析儀，因此特異性高、重復(fù)性好、診斷價(jià)值高，更適用于臨床作大批量的檢測(cè)，可列為肝功能常規(guī)項(xiàng)目，值得推廣。

[1]孫杰生，王炳元.酒精性肝炎的治療策略.臨床肝膽病雜志，2010，26(3):260-263.

[2]中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝臟病學(xué)分析會(huì)脂肪和酒精性肝病學(xué)組.酒精性肝病診斷標(biāo)準(zhǔn)(草案).現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué)，2002，14(2):101.

[3]傳良敏，王文建，曹萬惠.肝臟疾病患者血清中線粒體型天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶檢測(cè)的臨床意義.淮海醫(yī)藥，2009，27(2):110-111.