銀納米敏化鋱-氧氟沙星二級散射法測定氧氟沙星含量

王曉麗，張桂枝，盧銳曉

(山西大同大學(xué)化學(xué)與化工學(xué)院，山西大同 0 37009)

二級散射(second order scattering，SOS)是由共振瑞利散射引起的一種共振非線性散射現(xiàn)象。二級散射具有較高的信號水平，可以用普通光源作為光源，它能夠在溶液中產(chǎn)生，近年來作為一種新型的光譜現(xiàn)象和分析技術(shù)被廣泛用于痕量金屬離子、非金屬及表面活性劑等物質(zhì)的測量[1]。

氧氟沙星 (Ofloxacin，OFLX)，又名氟嗪酸，其分子式為 C18H20FN3O4，化學(xué)名為(±)－9－氟－2，3－二氫－3－甲基－10－(4－甲基－1－哌嗪基)－7－氧代－7H－吡啶并[1，2，3－de]－[1，4]苯并噁嗪－6－羧酸。氧氟沙星是目前廣泛應(yīng)用于臨床的第3代喹諾酮類抗菌藥物，對革蘭氏陽性菌及陰性菌均有強大的抗菌作用，對厭氧菌和肺炎支原體也有良好的作用，具有與多種抗菌藥物間無交叉耐藥性的特點，主要用于治療呼吸道、泌尿道、腸道、皮膚、關(guān)節(jié)及軟組織等多種系統(tǒng)細菌感染性疾病，效果良好。因此，測定氧氟沙星的含量是十分有意義的。關(guān)于氧氟沙星含量的測定，文獻報道主要有敏化紫外分光光度法[2]、高效液相色譜法[3]、熒光光度法[4]、電化學(xué)分析法[5]等。

我們根據(jù)銀納米能有效地增強Tb(Ⅲ)－氧氟沙星的二級散射峰，且體系的二級散射強度與氧氟沙星的濃度在一定范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，建立了銀納米敏化的二級散射法測定氧氟沙星的新方法，并對銀納米粒子濃度和Tb(Ⅲ)離子濃度以及溶液酸度進行優(yōu)化選擇。

1 實驗部分

1.1 主要儀器和試劑

Cary Zclipse熒光分光光度計(美國瓦里安技術(shù)中國有限公司)；氧氟沙星(OFLX)標(biāo)準(zhǔn)溶液：1.0×10－3mol/L；TbCl3標(biāo)準(zhǔn)溶液：1.0 × 10－2mol/L；銀納米：1.0 × 10－4mol/L。

1.2 實驗方法

在10 mL比色管中依次加入pH＝5.3的HAc－NaAc緩沖溶液，Tb(Ⅲ)離子，銀納米及氧氟沙星，用水稀釋至10 mL，混勻，放置30 min。在熒光分光光度計上設(shè)置參數(shù)λex＝1/2，λem＝230 nm，狹縫寬度為5 nm，測量體系的二級散射(SOS)強度Isos。以Isos，與氧氟沙星濃度作圖得到工作曲線。

2 結(jié)果與討論

不同的稀土離子對該體系的二級散射的增敏作用不同。由文獻[6]可知Tb(Ⅲ)離子對該體系的增敏作用最佳，所以在以后的試驗中選擇Tb(Ⅲ)離子作為增敏離子。

為了提高采用二級散射方法測定氧氟沙星含量的靈敏度，對銀納米和Tb(Ⅲ)離子濃度、溶液酸度這3個實驗條件進行了優(yōu)化。在優(yōu)化實驗過程中，保持氧氟沙星濃度為 1.0 × 10－6mol/L。

2.1 實驗條件的優(yōu)化選擇

1.0 × 10－6～ 2.0 × 10－5mol /L 濃度范圍內(nèi)，隨著銀納米粒子濃度的增加，二級散射強度也在增加，但隨著銀納米粒子濃度的增加二級散射強度與藥物濃度的線性關(guān)系不好，當(dāng)銀納米粒子濃度為 5.0×10－6mol/L時，在一定范圍內(nèi)信號強度變化與藥物濃度有線性關(guān)系，因此在以后的實驗中選擇濃度為5.0×10－6mol/L的銀納米溶液。

Tb(Ⅲ)離子濃度在 10－6～ 5×10－4mol/L 范圍內(nèi)體系的二級散射強度，隨著Tb(Ⅲ)離子濃度的增加而逐漸增加，但當(dāng)Tb(Ⅲ)離子濃度達到2.0×10－4mol/L時，體系的二級散射強度變化趨于最大。因此在以后的實驗中，選擇2.0×10－4mol/L作為Tb(Ⅲ)離子的最佳濃度。

實驗中通過在溶液中加入HAc－NaAc來調(diào)節(jié)體系的pH值。實驗了pH范圍3.9～6.5時體系的二級散射強度，當(dāng)溶液的pH值為5.3時，體系的二級散射強度最大，因此在以后的實驗中選擇pH＝5.3。

3 分析特征

3.1 工作曲線

選擇濃度為 2.0 × 10－4mol/L 的 Tb(Ⅲ)離子，5.0 × 10－6mol/L 的銀納米溶液，最佳緩沖溶液pH＝5.3的HAc－NaAc作為最佳實驗條件，按照實驗方法進行測定，信號強度與濃度為10－8～10－6mol/L范圍內(nèi)的OFLX呈線性關(guān)系。為了提高實驗的精密度與準(zhǔn)確度，工作曲線按OFLX濃度的數(shù)量級分段繪制。在選定的最佳實驗條件下進行實驗，每個濃度讀取3個光強度數(shù)據(jù)，用其平均值作為該濃度下的二級散射光強度。以二級散射光強度對OFLX的濃度作工作曲線，見圖1～4及表1。

圖1 二級散射光譜

圖2 二級散射光譜

圖3 OFLX的工作曲線

圖4 OFLX的工作曲線

3.2 精密度

在最佳的實驗條件下測定11個濃度為1.0×10－6mol/L的OFLX溶液，測出其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD ＝0。

表1 OFLX測定的分析參數(shù)

3.3 檢出限

平均測定21次空白信號，以IUPAC定義的3σ方法計算，得OFLX的檢出限為3.98 × 10－9mol/L。

從精密度以及檢出限看，用銀納米敏化的二級散射法測定氧氟沙星含量，結(jié)果令人滿意。銀納米可以有效地增強Tb(Ⅲ)－氧氟沙星配合物的二級散射強度，且實驗操作簡單，靈敏度高，選擇性好，可以作為測定氧氟沙星的一種新的分析方法。

[1]Chen G Z，Huang X Z，Zhang Z Z，et al.Fluorescence Analysis Method[M].北京：科學(xué)出版社，1990.

[2]陶玉龍，敖登高娃，劉惠民，等.鋁敏化紫外分光光度法測定氧氟沙星[J].內(nèi)蒙古大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版，2006，37(1)：23－25.

[3]張忠君，韓銘，劉暉，等.高效液相色譜法測定氧氟沙星滴眼液的含量和有關(guān)物質(zhì)[J].中國實用醫(yī)藥，2010，5(12)：101－102.

[4]鮑霞.熒光光度法直接測定氧氟沙星的含量 [J].光譜實驗室，2001，18(2)：265－267.

[5]漆紅蘭，陳沛，張成孝.氧氟沙星的測定及其與DNA相互作用的研究[J].藥物分析雜志，2007，27(1)：96－99.

[6]丁芬.銀納米對稀土離子－核酸(藥物)的二級散射光譜影響的研究及其應(yīng)用[D].北京：北京師范大學(xué)，2005.