血清嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白在5歲以下喘息兒童評估中的意義

楊金玲 王秀芳

喘息是嬰幼兒時(shí)期的常見癥狀，5歲以下喘息兒童根據(jù)其原因和轉(zhuǎn)歸可分為早期一過性喘息、早期起病的持續(xù)性喘息(指3歲前起病)和遲發(fā)性喘息/哮喘3種臨床表型[1]。因此，將可能發(fā)展為持續(xù)性哮喘的5歲以下喘息患兒識(shí)別出來進(jìn)行有效早期干預(yù)是非常必要的。本研究通過檢測5歲以下喘息兒童外周血中的血清嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白（ECP）水平和外周血嗜酸性粒細(xì)胞（EOS）計(jì)數(shù)，尋找鑒別兒童喘息臨床表型的炎癥指標(biāo)，為預(yù)測喘息兒童預(yù)后及早期干預(yù)治療提供參考。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2008年9月—2009年4月本院呼吸科門診和住院治療的患兒53例為喘息組，反復(fù)喘息判斷以喘息次數(shù)≥2次/半年或≥3次/1年為標(biāo)準(zhǔn)；均排除先天性疾病引起的喘息。根據(jù)患兒是否曾被診斷為過敏性疾病(包括濕疹、變應(yīng)性皮炎、過敏性鼻炎及食物過敏)或父母一方有哮喘病史者為特應(yīng)質(zhì)高危因素的標(biāo)準(zhǔn)，將喘息組分為為喘息Ⅰ組（有高危因素之一者）和喘息Ⅱ組（無高危因素者）,其中喘息Ⅰ組27例，男16例，女11例，平均年齡（1.8±0.2）歲；喘息Ⅱ組26例，男14例，女12例，平均年齡（1.9±0.3）歲。同時(shí)，從本院外科同期住院治療的疝氣、腎結(jié)石等非感染性疾病術(shù)前患兒中隨機(jī)抽取20例作為對照組，男11例，女9例，平均年齡（1.8±0.1）歲。所有兒童均為足月出生，年齡均在4個(gè)月～5歲，3組年齡（F=0.168）、性別（χ2=0.437）差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；均獲得其家長知情同意，所有患兒2周內(nèi)均無全身或局部哮喘藥物治療史。

1.2 方法

1.2.1 血清ECP的測定 應(yīng)用法瑪西亞公司UniCAP全自動(dòng)分析檢測儀及試劑盒。采用真空SST管，取頸靜脈血2 mL，輕輕倒轉(zhuǎn)試管5次，室溫下20℃～25℃凝血60～120 min,分離血清，然后轉(zhuǎn)至另一試管中，加入試劑，UniCAP自動(dòng)檢測血清ECP（正常值＜15 μg/L）。

1.2.2 外周血EOS計(jì)數(shù) 于試管中加入0.38 mL伊紅-甲醛緩釋液，再加入血液0.02 mL，立即混勻。10 min后再混勻，分別用吸管充入計(jì)數(shù)池內(nèi)，靜置片刻后，用低倍鏡計(jì)數(shù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示,組間比較用單因素方差分析,兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清ECP含量和外周血EOS計(jì)數(shù)比較 喘息Ⅰ組血清ECP水平和外周血EOS計(jì)數(shù)均高于喘息Ⅱ和對照組（均P＜0.05），而喘息Ⅱ組和對照組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

表1 各組患者血中ECP含量和外周血EOS計(jì)數(shù)比較（±s）

表1 各組患者血中ECP含量和外周血EOS計(jì)數(shù)比較（±s）

＊P＜0.05

組別 n ECP（μg/L） EOS(×109)喘息Ⅰ組（1）喘息Ⅱ組（2）對照組（3）F P（1）∶（2）（1）∶（3）（2）∶（3）0.55±0.10 0.10±0.01 0.02±0.01 18.76＊0.028 0.038 0.099 27 26 20 46.81±13.86 9.28±3.71 3.90±1.09 4.62＊0.045 0.011 0.058

2.2 血清ECP和外周血EOS計(jì)數(shù)相關(guān)性分析 喘息組血清ECP與外周血EOS計(jì)數(shù)呈正相關(guān)（r=0.786，P＜0.01）。

3 討論

嬰幼兒喘息與呼吸道病毒或支原體感染、氣道黏膜水腫、小氣道內(nèi)黏液栓形成、氣道慢性炎癥以及氣道高反應(yīng)性有關(guān)。多數(shù)喘息患兒經(jīng)治療可以完全緩解，不再反復(fù)。但部分喘息是兒童哮喘的早期表現(xiàn)，嬰幼兒喘息與兒童哮喘的關(guān)系尚未完全闡明。

EOS是引起哮喘呼吸道炎癥、支氣管高反應(yīng)性（BHR）和遲發(fā)型過敏反應(yīng)(LAR)的關(guān)鍵細(xì)胞，是哮喘發(fā)病中的主要效應(yīng)細(xì)胞及慢性哮喘患者下氣道的主要炎癥細(xì)胞[2]。ECP是活化的EOS分泌的一種核糖核酸酶，是EOS的特異性標(biāo)志物之一。ECP是一種單鏈、含鋅、強(qiáng)堿性糖蛋白，儲(chǔ)存在EOS的胞漿顆粒中，約占EOS胞漿顆粒的30%。ECP與氣道高反應(yīng)、通氣功能均存在一定的相關(guān)性，是EOS激活的標(biāo)志[3]。本研究顯示血清ECP和外周血EOS計(jì)數(shù)呈正相關(guān)。ECP能直接損傷氣道上皮細(xì)胞，導(dǎo)致氣道高反應(yīng)、氣道痙攣和肺功能受損[4],是反映哮喘患者氣道炎癥發(fā)生、發(fā)展變化的主要指標(biāo)。臨床研究顯示ECP與哮喘氣道炎癥的強(qiáng)度相關(guān)，可反映氣道高反應(yīng)性發(fā)展的早期階段，并可作為監(jiān)測兒童哮喘病情嚴(yán)重程度的指標(biāo)指導(dǎo)臨床用藥[5]。

本研究顯示具有特應(yīng)質(zhì)高危因素的喘息Ⅰ組血清中ECP與外周血EOS計(jì)數(shù)明顯高于無特應(yīng)質(zhì)高危因素的喘息Ⅱ組和對照組，提示其可能與哮喘存在相似的免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制，在治療中應(yīng)注意抑制炎癥細(xì)胞的活化和炎性介質(zhì)的產(chǎn)生，強(qiáng)調(diào)早期干預(yù)以降低氣道高反應(yīng)性、控制炎癥反應(yīng)，預(yù)防持續(xù)性哮喘的形成。無特應(yīng)質(zhì)高危因素的喘息Ⅱ組外周血ECP和外周血EOS計(jì)數(shù)與對照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示EOS并未參與其喘息的發(fā)作，其喘息發(fā)生機(jī)制與哮喘不同，多與呼吸道病毒感染有關(guān)，是誘發(fā)兒童反復(fù)喘息最常見致病因素。病毒感染損傷的上皮細(xì)胞和抗病毒反應(yīng)可引起呼吸道水腫、黏液高分泌和血管通透性增高，導(dǎo)致小氣道狹窄和通氣功能障礙，進(jìn)而引起喘息發(fā)作。呼吸道病毒感染引起的氣道高反應(yīng)性可持續(xù)6周才逐漸下降[6]。如在6周前后又重復(fù)感染，則高反應(yīng)性持續(xù)存在，造成喘息反復(fù)發(fā)作。隨著年齡的增長無特應(yīng)質(zhì)喘息兒童的體質(zhì)增強(qiáng)和免疫系統(tǒng)的發(fā)育成熟，病毒感染的概率減少，至學(xué)齡期喘息將消失。

感染是引起哮喘發(fā)作的常見誘因，而特應(yīng)質(zhì)高危因素則是導(dǎo)致持續(xù)性哮喘及哮喘反復(fù)發(fā)作的最主要因素。本研究顯示，5歲以反下復(fù)喘息的患兒具有特應(yīng)征傾向，其血清中ECP與外周血EOS計(jì)數(shù)明顯增加，可能是哮喘的早期表現(xiàn)。因此測定患兒的血清ECP水平及外周血EOS計(jì)數(shù)，有助于喘息的臨床分型及預(yù)后判斷，早期識(shí)別可能發(fā)展為持續(xù)喘息的兒童，為兒童哮喘的早期臨床干預(yù)提供依據(jù)。由于本研究樣本例數(shù)有限，其廣泛應(yīng)用有待于臨床進(jìn)一步研究。

[1]中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)會(huì)呼吸學(xué)組《中華兒科雜志》編輯委員會(huì).兒童支氣管哮喘診斷與防治指南[J].中華兒科雜志,2008,46(10): 745-753.

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