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    酸漿中嗜酸乳桿菌發(fā)酵豆腐廢水發(fā)酵條件的研究

    2010-09-22 06:20:54于海峰徐國(guó)華郭英熙
    飼料工業(yè) 2010年7期
    關(guān)鍵詞:產(chǎn)酸量酸漿漿水

    于海峰 徐國(guó)華 郭英熙

    豆腐廢水,俗稱(chēng)黃漿水,是豆腐在生產(chǎn)過(guò)程中形成的豆腐瀝水。在豆腐的加工過(guò)程中,需加入約10倍于大豆干重的水來(lái)研磨成漿,其中約有1/3~1/2漿在隨后的加工過(guò)程中被瀝出,形成豆腐瀝水。其中約含1%的固形物,主要是蛋白質(zhì)、低聚糖,此外尚有部分微量成分如維生素、脂類(lèi)等成分[1]。豆腐廢水中有機(jī)物質(zhì)含量高,直接排放對(duì)環(huán)境造成污染,而且其有機(jī)物質(zhì)可以被微生物利用,通過(guò)微生物發(fā)酵可以獲取蛋白質(zhì)、淀粉等牲畜可消化吸收的物質(zhì),可以直接用作飼料或飼料生產(chǎn)的原料。

    酸漿是一種傳統(tǒng)的天然豆腐凝固劑,是黃漿水經(jīng)多種微生物自然發(fā)酵的產(chǎn)物。酸漿在我國(guó)作為豆制品的點(diǎn)漿劑已有400多年的歷史,其凝固大豆蛋白的機(jī)理已經(jīng)證明為酸凝[2]。酸是由酸漿中產(chǎn)酸菌發(fā)酵黃漿水產(chǎn)生。將酸漿中功能菌單獨(dú)或者混合培養(yǎng),可以充分利用大豆乳清中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),降低大豆乳清中有機(jī)物的含量。同時(shí)也可將酸漿中產(chǎn)酸菌應(yīng)用于黃漿水的發(fā)酵,對(duì)其進(jìn)行綜合利用,生產(chǎn)單細(xì)胞蛋白和乳清發(fā)酵飲料,其菌體蛋白氨基酸組成合理,是一種優(yōu)質(zhì)的飼料菌體蛋白。通過(guò)微生物轉(zhuǎn)化方法可以為豆腐廢水的處理與綜合利用開(kāi)辟新的思路。

    酸漿中的微生物種類(lèi)很多,關(guān)系復(fù)雜,我們已經(jīng)對(duì)酸漿中產(chǎn)酸菌進(jìn)行了分離,獲得一株產(chǎn)酸能力最強(qiáng)的菌株,鑒定其屬于嗜酸乳桿菌[3]。為了更好地對(duì)酸漿中微生物利用,本文對(duì)嗜酸乳桿菌發(fā)酵豆腐廢水的發(fā)酵條件進(jìn)行研究,為豆腐廢水綜合利用提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    菌種:嗜酸乳桿菌AP117,本實(shí)驗(yàn)室分離保存;豆腐廢水,取自豆腐作坊。

    1.2 儀器

    PYX-DHS型隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱;YXQG01型電熱式蒸汽消毒器;202-1型電熱恒溫干燥箱;HZQ-Q型振蕩器;Nikon E20o-F型生物顯微鏡;PHS-2C型pH計(jì)。

    1.3 培養(yǎng)基

    豆腐廢水液體培養(yǎng)基:豆腐作坊廢水,添加葡萄糖2%(m/V)。

    豆腐廢水固體培養(yǎng)基:在豆腐廢水液體培養(yǎng)基中添加水洗瓊脂粉2%(m/V)。

    1.4 方法

    1.4.1 發(fā)酵種子的活化和種子液制備

    取斜面保存菌種一環(huán),接入100 ml豆腐廢水液體培養(yǎng)基中,35℃恒溫靜置培養(yǎng)48 h;

    取活化后的菌液5 ml,接入100 ml豆腐廢水液體培養(yǎng)基中,35℃恒溫靜置培養(yǎng)18 h。

    1.4.2 產(chǎn)酸量的測(cè)定[4]

    采用總酸的測(cè)定方法。黃漿水液體培養(yǎng)基的總酸含量作為對(duì)照。

    式中:C——標(biāo)準(zhǔn)NaOH溶液的濃度,mol/l;

    V1——滴定待測(cè)樣消耗的標(biāo)準(zhǔn)NaOH溶液的體積(ml);

    V0——滴定黃漿水原樣消耗的標(biāo)準(zhǔn)NaOH溶液的體積(ml);

    K——換算為酸的主要系數(shù),即1 mol NaOH相當(dāng)于主要酸的克數(shù),用乳酸計(jì)則K=0.090;

    V——待測(cè)樣的體積(ml)。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 葡萄糖添加量對(duì)AP117產(chǎn)酸量的影響

    改變豆腐廢水中葡萄糖的添加量進(jìn)行嗜酸乳桿菌AP117發(fā)酵豆腐廢水試驗(yàn),35℃培養(yǎng)48 h,試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖1。

    計(jì)算方法:

    從圖1可以看出,在葡萄糖的一定濃度范圍內(nèi),嗜酸乳桿菌AP117發(fā)酵豆腐廢水產(chǎn)酸量與葡萄糖添加量呈正相關(guān),即隨葡萄糖添加量的增加而增加。當(dāng)葡萄糖的添加量從4%繼續(xù)增加時(shí),產(chǎn)酸量卻稍有下降,這是因?yàn)殡S著葡萄糖添加量的增加,產(chǎn)酸菌生長(zhǎng)速度加快,產(chǎn)酸量增加,使環(huán)境pH值下降,抑制了菌體的生長(zhǎng)。同時(shí)當(dāng)葡萄糖添加量到一定濃度時(shí),環(huán)境的滲透壓增加,使菌體生長(zhǎng)受到抑制甚至不能忍受高滲環(huán)境死亡。因此最適葡萄糖添加量為4%。

    2.2 溫度對(duì)AP117產(chǎn)酸量的影響

    不同的發(fā)酵溫度,嗜酸乳桿菌AP117的產(chǎn)酸量不同,試驗(yàn)結(jié)果如圖2所示。

    由圖2可以看出,在35℃時(shí)嗜酸乳桿菌AP117產(chǎn)酸量最大。

    2.3 AP117最佳產(chǎn)酸條件的確定

    參考兩個(gè)單因素試驗(yàn),根據(jù)預(yù)備試驗(yàn)的結(jié)果,選擇對(duì)菌體產(chǎn)酸影響較大的接種量、初始pH值、發(fā)酵溫度、發(fā)酵時(shí)間4個(gè)因素設(shè)計(jì)4因素3水平正交試驗(yàn),并根據(jù)產(chǎn)酸量確立最佳產(chǎn)酸條件。正交試驗(yàn)因素水平見(jiàn)表1,試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

    表1 正交試驗(yàn)因素水平

    以產(chǎn)酸量作為指標(biāo),根據(jù)正交試驗(yàn)結(jié)果可以看出發(fā)酵溫度對(duì)嗜酸乳桿菌AP117發(fā)酵豆腐廢水影響最大,發(fā)酵時(shí)間和接種量次之,初始pH值影響最小。

    表2 嗜酸乳桿菌AP117產(chǎn)酸條件正交試驗(yàn)結(jié)果

    根據(jù)極差分析結(jié)果得出最佳發(fā)酵條件是溫度37℃、初始pH值6.0、接種量6%、發(fā)酵時(shí)間48 h,在最佳條件下產(chǎn)酸量達(dá)到0.551 4 g/100 ml。此最優(yōu)方案與正交試驗(yàn)7號(hào)試驗(yàn)相符。

    3 結(jié)論

    從培養(yǎng)基初始pH值、發(fā)酵溫度、接種量和發(fā)酵時(shí)間等不同的方面對(duì)從酸漿中分離得到的嗜酸乳桿菌AP117進(jìn)行發(fā)酵豆腐廢水發(fā)酵條件的研究,找出AP117發(fā)酵豆腐廢水的最佳條件,即:發(fā)酵溫度37℃;初始pH值6.0;接種量6%;發(fā)酵時(shí)間48 h。本試驗(yàn)菌株是酸漿中功能菌株之一,對(duì)其發(fā)酵豆腐廢水條件的研究為豆腐廢水資源化提供了新的探索途徑,具有廣闊的應(yīng)用前景。

    [1]于海峰.大豆乳清發(fā)酵飲料菌株的選育及發(fā)酵條件的研究[D].山東輕工業(yè)學(xué)院,2004,6.

    [2]宋俊梅,曲靜然,李燕,等.脆豆腐老漿液點(diǎn)漿機(jī)理的研究[J].食品科技,2002(4):14-15.

    [3]王國(guó)良,宋俊梅,曲靜然.從酸漿中分離出的一株產(chǎn)酸菌的鑒定[J].河南工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2006(1):77-83.

    [4]大連輕工業(yè)學(xué)院等八大院校主編.食品分析(第一版)[M].北京:中國(guó)輕工業(yè)出版社,1994:10.

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