氣相色譜法測定羥丙甲纖維素中甲氧基和羥丙氧基含量

李賜恩，葉 芳，張敏怡，梁鳳坤，岑劍暉

（1.廣州中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院，廣東 廣州 510405； 2.中山大學第一附屬醫(yī)院，廣東 廣州 510080）

氣相色譜法測定羥丙甲纖維素中甲氧基和羥丙氧基含量

李賜恩1，葉 芳2，張敏怡2，梁鳳坤1，岑劍暉1

（1.廣州中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院，廣東 廣州 510405； 2.中山大學第一附屬醫(yī)院，廣東 廣州 510080）

目的 建立測定羥丙甲纖維素中甲氧基和羥丙氧基含量的氣相色譜法。方法 將羥丙甲纖維素和氫碘酸共同加熱反應，產(chǎn)生揮發(fā)性的碘甲烷和2-碘丙烷，注入氣相色譜儀進樣，采用Agilent DB-624柱（30 m×0.53 mm，1.0!m），火焰離子化檢測器（FID），通過測得碘甲烷和2-碘丙烷的量折算得到甲氧基和羥丙氧基的含量。結果 所建立的氣相色譜法有良好的分離度，在所考察的濃度范圍內(nèi)各溶劑的峰面積與濃度線性關系良好。結論 氣相色譜法較藥典方法更靈敏、更準確，可用于羥丙甲纖維素中甲氧基和羥丙氧基的含量測定。

羥丙甲纖維素；甲氧基；羥丙氧基；氣相色譜法

Abstract：Objective To establish a method to determine the methoxy and hydroxyproxy in hydroxypropyl methylcellulose by gas chromatography.Methods Hydroxypropyl methylcellulose and hydriodic acid were heated together.The reaction products，methyl iodide and 2-propyliodide，were assayed by gas chromatography.Agilent DB-624 capillary column and FID were used.Results The peaks of methyl iodide and 2-propyliodide were separated well.The good linear correlations were obtained during the detection.Conclusion The method is proved to be sensitive and accurate.It can be used for the determination of methoxy and hydroxyproxy in hydroxypropyl methylcellulose.

Key words：hydroxypropyl methylcellulose；methoxy；hydroxyproxy；gas chromatography

羥丙甲纖維素（hydroxypropyl methylcellulose，HPMC）是一種優(yōu)良的藥用輔料，具有其他許多輔料所不具備的特性，如優(yōu)異的冷水水溶性、較強的抗敏性和代謝惰性等，可作為薄膜包衣材料，也可作為黏合劑、崩解劑，還可作為固體制劑促溶出和緩釋、控釋的材料，是目前國內(nèi)外用量最大的輔料之一[1-2]。HPMC因甲氧基和羥丙氧基兩種取代基含量不同而有多種型號的產(chǎn)品，一般通過測定甲氧基和羥丙氧基含量以控制其質量。筆者將HPMC和氫碘酸共同加熱反應，采用氣相色譜法測定衍生出的碘甲烷和2-碘丙烷，從而折算出HPMC中甲氧基和羥丙氧基的含量，現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

Agilent GC-6890N型氣相色譜儀（檢測器為FID）。羥丙甲纖維素（湖州展望藥業(yè)有限公司，批號分別為200603037，200603038，200603039）；碘甲烷（中國海川化學品有限公司，含量為99.8%，批號為 051120）；2-碘丙烷（含量為 99.5%，批號為 A0253547）、氫碘酸（批號為A0249573）均為Acros Organics BVBA產(chǎn)品；正辛烷（天津華真特種化學試劑廠）；己二酸（國藥集團化學試劑有限公司）。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱：Agilent DB-624柱（30 m ×0.53 mm，1.0!m），Varian CP-624柱（30 m×0.53 mm，3.0!m）；柱溫：150℃；進樣口溫度：200 ℃ ；檢測器溫度：260 ℃；流速：3.0 mL/min；分流比：5 ∶1；載氣：氮氣；進樣量：1!L。

2.2 溶液制備

取正辛烷0.5 g，置100 mL量瓶中，加鄰二甲苯溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得內(nèi)標溶液。取70 mg己二酸，置10 mL頂空瓶中，分別精密加入內(nèi)標溶液和氫碘酸溶液各2.0 mL，密封，精密稱定；用注射器加入碘甲烷38!L，精密稱定，即為加入碘甲烷的質量；再同法加入2-碘丙烷8!L，精密稱定，即為加入2-碘丙烷的質量；振搖，靜置，取上層液體即得對照品溶液。取干燥供試品約60 mg，精密稱定，置反應瓶中，加入70 mg己二酸，并分別精密加入內(nèi)標溶液和氫碘酸溶液各2.0 mL，密封，135℃反應30 min，振搖2 min，135℃繼續(xù)反應30 min后，靜置，冷卻至室溫，取上層液體作為供試品溶液。

2.3 方法學考察

系統(tǒng)適用性試驗：取制備的對照品溶液1.0!L，注入氣相色譜儀，各峰分離度符合規(guī)定，結果見圖1 A。

專屬性試驗：按對照品溶液制備方法，分別制備不加對照品的陰性對照品溶液和內(nèi)標、對照品都不加的空白溶液，取1.0!L注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，結果顯示空白無干擾（圖1 B）。

耐用性試驗：分別考察己二酸加入量、反應溫度和反應時間對HPMC中甲氧基和羥丙氧基測定結果的影響。按供試品溶液制備方法，己二酸的加入量分別為0，50，70，90 mg（每種濃度各3份），取所得上層液體1.0!L注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，結果顯示不加己二酸的測定結果偏低，加入50～90 mg己二酸的測定結果較一致。按供試品溶液制備方法，分別反應50，60，70 min，靜置冷卻至室溫后，取所得上層液體1.0!L注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，結果顯示反應時間在50～70 min范圍內(nèi)測定結果一致。按供試品溶液制備方法，分別在120，135，150℃反應，靜置冷卻至室溫后，取所得上層液體1.0!L注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，結果顯示120℃時的測定結果偏低，而135℃和150℃時的測定結果一致。

線性關系考察：按對照品溶液制備方法，用注射器分別加入碘甲烷 30，34，38，42，46!L，同法分別對應加入 2- 碘丙烷 4，6，8，10，12!L，取上層液體1.0!L注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，結果甲氧基質量濃度范圍為7.632～11.703 g/L，回歸方程為 Y=0.062 9X+0.003 9，r=0.999 2；羥丙氧基質量濃度范圍為1.321～3.963g/L，回歸方程為 Y=0.0537X+0.0051，r=0.9996。

回收率試驗：取干燥供試品約30 mg，精密稱定，置反應瓶中，加入己二酸70 mg，再精密加入內(nèi)標溶液和氫碘酸溶液各2.0 mL，用注射器分別加入3種不同量的碘甲烷和相應的2-碘丙烷（每種濃度各2份），加熱反應1 h后，靜置至室溫，取上層液體1.0!L注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，結果見表1。

圖1 氣相色譜圖

表1 回收率試驗結果（n=6）

精密度試驗：按對照品溶液制備方法，用注射器加入碘甲烷38!L和2-碘丙烷8!L，取上層液體1.0!L連續(xù)進樣6次，計算各組分峰面積的 RSD，結果碘甲烷的 RSD為0.9%，2-碘丙烷的 RSD為 0.6%（n=6）。

穩(wěn)定性試驗：取批號為200603037的供試品溶液，分別在0，3，6，12，24 h進樣測定，考察溶液穩(wěn)定性。因碘甲烷和2-碘丙烷的揮發(fā)性均較大，6 h后測定結果開始偏低，所以制備的供試品溶液應及時進樣。

定量限檢測：精密量取適量對照品溶液，用鄰二甲苯溶液稀釋，進樣，以各組分峰達信噪比的3倍和10倍時的量為最低檢測限和最低定量限，結果甲氧基的最低檢測限為0.718!g/mL，最低定量限為2.152!g/mL，羥丙氧基的最低檢測限為1.210!g/mL，最低定量限為3.628!g/mL。

2.4 樣品含量測定

按本測定方法和2005年版《中國藥典（二部）》收載的方法[3]同時測定 3批（批號分別為 200603037，200603038，200603039）供試品，結果表明用本方法測定的效果更好。兩種測定方法的測定結果見表2。

表2 3批供試品的含量測定結果（%）

3 討論

HPMC質量標準廣泛收載于各國藥典中，《歐洲藥典》和《英國藥典》的HPMC質量標準中無甲氧基和羥丙氧基的含量測定項，2005年版《中國藥典》[3]采用容量法測定羥丙氧基和甲氧基，先蒸餾再滴定，操作過程煩瑣，準確度不高。筆者參照《美國藥典》的有關規(guī)定，將原方法的填充柱改為毛細管柱。試驗中所用的氫碘酸將甲氧基和羥丙氧基分別轉變?yōu)榈饧淄楹?-碘丙烷，濃度應不低于570 g/L，己二酸的作用是將HPMC中的羥基保護起來，使反應向生成碘甲烷和2-碘丙烷的方向定量進行，所用己二酸的量不應太少，否則會使測定結果偏低。與《中國藥典》中方法相比，本方法更易于操作，準確度和重現(xiàn)性更高，可推廣用于HPMC中甲氧基和羥丙氧基的含量測定。

[1]沈麗琳.羥丙甲纖維素在藥物制劑方面的應用與研究[J].中國藥業(yè)，2007，16（12）：66.

[2]張存彥，王成港，王 杰.新型膠囊囊材——羥丙甲纖維素[J].中國藥學雜志，2005，40（12）：891-892.

[3]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（二部）.北京：化學工業(yè)出版社，2005：909.

Determination of Methoxy and Hydroxyproxy in Hydroxypropyl Methylcellulose by Gas Chromatography

Li Cien1，Ye Fang2，Zhang Minyi2，Liang Fengkun1，Cen Jianhui1
(1.First Affiliated Hospital，Guangzhou University of TCM，Guangzhou，Guangdong，China 510405；2.First Affiliated Hospital，Zhongshan University，Guangzhou，Guangdong，China 510080)

R927.2

A

1006－4931(2010）03－0027－02

2009－01－14；

2009－05－09）